黃麗清

廣東省深圳市龍崗區(qū)骨科醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東深圳 518116

新生兒溶血病是因母嬰血型不合，母親產(chǎn)生抗胎兒紅細(xì)胞抗原的免疫性抗體免疫球蛋白(Ig)G，IgG通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒體內(nèi)，引起新生兒紅細(xì)胞破壞所致的同族被動(dòng)免疫性溶血。新生兒溶血病僅發(fā)生于胎兒與早期新生兒，可導(dǎo)致死胎、死產(chǎn)、胎兒水腫、胎兒貧血及新生兒黃疸，嚴(yán)重者可并發(fā)新生兒膽紅素腦病，遺留嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥。我國(guó)ABO血型不合溶血病約占85.8%，Rh血型不合溶血病約占14.2%[1]。新生兒溶血病的實(shí)驗(yàn)室檢查有助于明確診斷、早期干預(yù)，對(duì)降低新生兒死亡率及避免神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥的發(fā)生具有重要意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 此病例為筆者在上海市血液中心血型參比實(shí)驗(yàn)室進(jìn)修所遇?；純?，女，6 d，無(wú)輸血史；以新生兒高膽紅素血癥入院，血紅蛋白152 g/L，總膽紅素358.94 μmol/L，訴求為新生兒溶血病檢測(cè)及抗體鑒定。患兒母親，孕2產(chǎn)2，懷本胎20周時(shí)曾在參比實(shí)驗(yàn)室做過(guò)抗體鑒定及效價(jià)測(cè)定，無(wú)輸血史。

1.2儀器與試劑 抗A、抗B單克隆試劑(20171227)，抗-D(IgM，20181810)，抗-C(20183001),抗-c(20183101)，抗-E(20183201)，抗-e(20183301)，抗球蛋白試劑(20185001)，抗-IgG(20185102)，抗-C3d(20185201)，凝聚胺試劑(20197502)，ABO標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞(20195326)，不規(guī)則抗體篩選細(xì)胞(20197034)，3%～5%十系抗體鑒定譜細(xì)胞(20190401)均購(gòu)自上海血液生物醫(yī)藥有限公司。血清學(xué)離心機(jī)為久保田公司生產(chǎn)。3%～5%十六系抗體鑒定譜細(xì)胞(荷蘭sanquin公司，批號(hào)8000258849)；抗人球蛋白檢測(cè)卡(50531.38.18、IGC055F)依次購(gòu)自俄羅斯DiaMed公司、美國(guó)Ortho公司。

1.3方法 ABO正反定型、Rh血型鑒定、直接抗人球蛋白試驗(yàn)、游離試驗(yàn)、放散試驗(yàn)、不規(guī)則抗體篩查和抗體鑒定試驗(yàn)，以及抗體效價(jià)的測(cè)定均嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行操作。

2 結(jié) 果

2.1血型鑒定 患兒血型為A型CcDee，患兒母親血型為A型CCDee。

2.2新生兒溶血病三項(xiàng)檢測(cè) 結(jié)果顯示游離試驗(yàn)陰性，放散試驗(yàn)陰性。

2.3規(guī)則抗體篩查 患兒及母親1～3號(hào)抗篩細(xì)胞分別呈2+，0，2+凝集強(qiáng)度，患兒5號(hào)細(xì)胞及16號(hào)細(xì)胞呈1+的凝集強(qiáng)度，初步判定血清中存在抗-E抗體。

2.4抗體鑒定 患兒血清中含有抗-E抗體及抗-Wra抗體?；純耗赣H血清中含有抗-E抗體。

2.5抗體效價(jià)測(cè)定 患兒抗-E、抗-Wra抗體鹽水效價(jià)為4，室溫下效價(jià)均<1，患兒抗-E、抗-Wra抗體間接抗人球蛋白法效價(jià)均<1，微柱凝膠法抗-E抗體效價(jià)為2，抗-Wra抗體效價(jià)為2；患兒母親間接抗人球蛋白法抗-E抗體效價(jià)<2。

3 小 結(jié)

新生兒溶血病是由血型不合引起的被動(dòng)同種免疫性疾病，在Rh抗原中，抗原的強(qiáng)弱順序依次為D>E>C>c>e,我國(guó)漢族RhD陰性者僅占0.34%，而Rh血型系統(tǒng)抗-E抗體是最常檢出的抗體，王曉寧等[2]在10 000份住院患者標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)RhE抗原陰性者占48.54%，RhE抗體陽(yáng)性率為51.46%。這說(shuō)明中國(guó)人群中RhE抗原陰陽(yáng)性分布比較接近，因此，因妊娠產(chǎn)生免疫性抗-E抗體的概率比抗-D抗體大，也是間接導(dǎo)致發(fā)生新生兒溶血病的原因之一。

本文患兒血型為A型，Rh分型為CcDEe，患兒母親血型為A型，Rh分型為CCDee。由于ABO系統(tǒng)血型相合，排除ABO血型不合引起的新生兒溶血病，從患兒與母親的Rh分型可以看出，存在不相合抗原?；純耗赣H在本胎孕20周時(shí)，曾在本參比實(shí)驗(yàn)室做過(guò)抗體鑒定，血清中存在抗-E抗體，抗體效價(jià)<2，直至分娩未進(jìn)行抗體效價(jià)連續(xù)監(jiān)測(cè)?；純撼錾笥坞x試驗(yàn)陰性，放散試驗(yàn)陰性的原因是ABO標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞的RhE抗原與患兒一致?；純貉逯锌贵w鑒定結(jié)果與抗-E格局基本一致，但5號(hào)細(xì)胞及16號(hào)細(xì)胞呈1+的凝集強(qiáng)度，而E抗原為陰性，說(shuō)明患兒血清中除抗-E抗體外還存在其他抗體，對(duì)照細(xì)胞譜綜合分析，得出血清中除抗-E抗體還合并了抗-Wra抗體。對(duì)患兒放散液譜細(xì)胞進(jìn)行分析，放散液中的抗體鑒定與抗-E格局一致，且符合劑量效應(yīng)。選取E抗原為純合子譜細(xì)胞進(jìn)行抗-E抗體效價(jià)測(cè)定，Wra抗原只有5號(hào)細(xì)胞、16號(hào)細(xì)胞是陽(yáng)性，就只選取了兩種細(xì)胞混合進(jìn)行測(cè)定，效價(jià)均為2，在鹽水介質(zhì)中均無(wú)凝集，存在IgG抗體。

由于參比實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有抗-Wra血清試劑，未對(duì)患兒Wra抗原表型進(jìn)行檢測(cè)。Wra是一個(gè)低頻抗原，在血型中出現(xiàn)的概率<0.01[3]。與Wrb互為對(duì)偶抗原，同屬Diego血型系統(tǒng)。關(guān)于此抗原在不同人群中的分布報(bào)道較少，其中高加索人中以Wrb純合子為主，Wra抗原的檢出率約為1/1 000[4]。朱自嚴(yán)等[5]對(duì)4 000例上海地區(qū)人群進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)Wrb(-)個(gè)體為0；溫機(jī)智等[6]對(duì)廣州地區(qū)漢族人群Diego血型系統(tǒng)基因多態(tài)性進(jìn)行分析，未發(fā)現(xiàn)基因多態(tài)性，基因型均為D14/D14(抗原表型為Wrb純合)?？紤]到中國(guó)人群中Wrb基本為純合子，推測(cè)患兒體內(nèi)的抗-Wra抗體可能是來(lái)自母親，經(jīng)胎盤(pán)屏障進(jìn)入母體。患兒母親在孕20周時(shí)只檢出抗-E抗體，存在漏檢現(xiàn)象?；純貉逯袡z出抗-E抗體及抗-Wra抗體，而放散液中放散出抗-E抗體，從另一側(cè)面可以了解到患兒不含有Wra抗原?；純撼錾笱t蛋白水平下降至152 g/L，總膽紅素水平上升358.94 μmol/L，提示患兒體內(nèi)存在溶血現(xiàn)象，可見(jiàn)此例患兒為抗-E抗體引起的新生兒溶血病。臨床進(jìn)行對(duì)癥處理后，病情快速轉(zhuǎn)歸，這跟患兒母親抗體效價(jià)低，進(jìn)入母體內(nèi)的胎兒紅細(xì)胞數(shù)量相對(duì)較少，胎兒紅細(xì)胞被致敏的程度小及胎兒本身代償能力相對(duì)較強(qiáng)也有一定的相關(guān)性。