賴兆豐

（南康區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，江西 贛州 341400）

菊酯類農(nóng)藥是廣譜性殺蟲劑，具有速效、高效、低毒、低殘留以及對作物安全等特點(diǎn)，但是菊酯類農(nóng)藥的大量使用也會導(dǎo)致農(nóng)藥殘留，對蔬菜食用者也具有危害性。

1 材料與方法

1.1 儀器與設(shè)備

氣相色譜儀選擇Agilent公司生產(chǎn)的6890N型號，固相萃取裝置選擇國內(nèi)廣州智真公司生產(chǎn)的SC-8L-150型號，旋渦振蕩器選擇國內(nèi)上海青浦瀘西公司生產(chǎn)的XW-80A型號，色譜柱選擇安捷倫公司生產(chǎn)的CP-Sil 8 CB毛細(xì)管柱，天平選擇Sartorius公司生產(chǎn)的電子分析天平（精度為0.01 g）。

1.2 試劑材料與蔬菜樣品

1.2.1 試驗(yàn)試劑

試驗(yàn)試劑為色譜級別的丙酮、農(nóng)殘級別的乙腈、農(nóng)殘級別的正乙烷、優(yōu)級純級別的無水硫酸鈉。

1.2.2 試驗(yàn)耗材

試驗(yàn)耗材包括分析純級別的氯化鈉，NH2、C18、Florisil固相萃取柱，有機(jī)相微孔濾膜（0.45 μm），注射器、量筒、燒杯等基礎(chǔ)耗材，還有HP-5、DB-17毛細(xì)管色譜柱。

1.2.3 試驗(yàn)蔬菜樣品

市場采購的黃瓜蔬菜作為試驗(yàn)樣品。

1.2.4 試驗(yàn)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品

選用農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研所監(jiān)制的聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氯菊酯、氟胺氰菊酯、溴氰菊酯6種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（100 μg/mL）。

1.3 氣相色譜檢測條件

氣化室溫度為230℃，氣相色譜儀相配套使用的電子捕捉器溫度為300℃。毛細(xì)管色譜柱起始溫度為150℃，1分鐘后按照10℃/分鐘的頻率增加至280℃溫度，持續(xù)20分鐘。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作

將聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氯菊酯、氟胺氰菊酯、溴氰菊酯6種菊酯農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品混合得到混合標(biāo)準(zhǔn)樣品，然后使用農(nóng)殘級別的正乙烷溶解，再將其定容至1 mL的進(jìn)樣瓶內(nèi)，將其稀釋配成標(biāo)準(zhǔn)儲備液待用，最后將標(biāo)準(zhǔn)儲備液放置于低溫下進(jìn)行避光保存，本試驗(yàn)直接將其置于冰箱中進(jìn)行保存，冰箱溫度調(diào)節(jié)至4℃。試驗(yàn)過程中直接取不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行氣相色譜儀測定分析，即可得到蔬菜樣品中6種菊酯農(nóng)藥殘留的回收率和精密度。

1.5 樣品處理與凈化

將市場采購的黃瓜蔬菜樣品切成小塊，使用粉碎機(jī)將蔬菜樣品徹底粉碎，稱取粉碎后的黃瓜蔬菜樣品25 g備用。使用高速組織搗碎機(jī)將備用的25 g黃瓜蔬菜樣品進(jìn)行搗碎，加入農(nóng)殘級別的乙腈50 mL后保持高速運(yùn)轉(zhuǎn)狀態(tài)3分鐘，在100 mL具塞量筒中加入6 g氯化鈉備用，將高速勻漿后的蔬菜樣品加入到裝有氯化鈉的具塞量筒中，最后對具塞量筒中的液體進(jìn)行過濾，收集其濾液后震蕩1分鐘左右，而后靜置15分鐘后觀察液體中的水相和乙腈相分層情況。

對Florisil固相萃取柱用丙酮-正已烷烷基化，使用燒杯盛取已經(jīng)溶解的黃瓜蔬菜樣品，然后用燒杯將溶解的蔬菜樣品加入到Florisil固相萃取柱中，再使用離心管接收固相萃取的洗脫液，燒杯和Florisil固相萃取柱均需要洗脫，最終使用氮吹儀在水浴狀態(tài)下將洗脫液濃縮至5 mL以下，并使用10 mL10%濃度丙酮-正已烷淋洗的無水硫酸鈉層析柱進(jìn)行洗脫，洗脫后使用正乙烷將其定容至5 mL。這樣即可對黃瓜蔬菜樣品進(jìn)行氣相色譜儀檢測，查看蔬菜樣品中6種菊酯農(nóng)藥殘留的回收率和精密度。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜柱的選擇

將6種菊酯農(nóng)藥分別按照以下濃度進(jìn)行色譜分離測試：聯(lián)苯菊酯（0.75 μg/mL）、甲氰菊酯（0.75 μg/mL）、三氟氯氰菊酯（0.75 μg/mL）、氯菊酯（0.75 μg/mL）、氟胺氰菊酯（0.5 μg/mL）、溴氰菊酯（0.5 μg/mL）。通過比較毛細(xì)色譜管柱的分離效果，可知DB-17毛細(xì)管色譜柱6種待測菊酯農(nóng)藥殘留與雜峰的分離效果比HP-5毛細(xì)管色譜柱更好，因此可以進(jìn)行分離測定。

2.2 提取溶劑選擇

蔬菜樣品中6種菊酯農(nóng)藥殘留檢測首先需要使用提取溶劑將其溶解到溶液中，但是不同的提取溶劑存在一定的差距，其提取效果相差甚遠(yuǎn)，因此本次試驗(yàn)分別對乙酸乙酯、乙腈、丙酮、正乙烷等提取溶劑進(jìn)行單一試劑和混合試劑測試，分析最佳的提取溶劑配制方案。試驗(yàn)結(jié)果表明丙酮和正乙烷混合試劑（V∶V=50∶50）對黃瓜蔬菜菊酯農(nóng)藥殘留的提取效果達(dá)到了92.5%，乙腈單一試劑對黃瓜蔬菜菊酯農(nóng)藥殘留的提取效果達(dá)到了90%，而乙酸乙酯對黃瓜蔬菜菊酯農(nóng)藥殘留的提取效果不足80%。由試驗(yàn)結(jié)果可知：乙酸乙酯不能作為提取溶劑，而選用乙腈單一試劑作為提取溶劑需要進(jìn)行多次凈化，最終的提取效果會受到一定影響，因此最佳提取溶劑應(yīng)該選擇丙酮和正乙烷混合試劑（V∶V=50∶50）。

2.3 提取方法與洗脫條件

本試驗(yàn)使用渦旋振蕩器提取蔬菜樣品中的6種菊酯農(nóng)藥殘留，提取溶劑選擇丙酮和正乙烷混合試劑（V∶V=50∶50）。因?yàn)楸疚慕?jīng)過比較超聲波振蕩萃取、高速離心機(jī)離心提取以及渦旋振蕩器提取方式后發(fā)現(xiàn)，渦旋振蕩器提取后蔬菜樣品6種菊酯農(nóng)藥殘留的回收率可以達(dá)到90%，而其他兩種提取方式最高可達(dá)80%，因此渦旋振蕩器提取方式最佳。

本試驗(yàn)分別選用10 mL、20 mL、30 mL的洗脫劑對農(nóng)藥進(jìn)行淋洗，最終發(fā)現(xiàn)洗脫劑體積為20 mL時蔬菜樣品中的6種菊酯農(nóng)藥殘留回收率都在90%以上，而其他體積下6種菊酯農(nóng)藥殘留回收率效果不如20 mL洗脫劑的效果，因此最佳洗脫條件是采用20 mL體積的洗脫劑進(jìn)行淋洗。

2.4 固相萃取柱選擇

本試驗(yàn)共選用NH2、C18、Florisil三種固相萃取柱，但是經(jīng)過凈化后比較固相萃取柱的除雜能力，發(fā)現(xiàn)NH2固相萃取柱很難將脂溶性色素完全取出、C18固相萃取柱很難將雜質(zhì)完全取出，只有Florisil固相萃取柱同時擁有較強(qiáng)的除雜和凈化能力。而且Florisil固相萃取柱的回收率可以達(dá)到95%，而NH2、C18固相萃取柱的回收率最高為90%，相比較下本試驗(yàn)選擇各方面表現(xiàn)均更為出色的Florisil固相萃取柱。

2.5 升溫速率選擇

升溫第一階段：每分鐘升高30℃。升溫第二階段：每分鐘升高20℃。6種菊酯農(nóng)藥殘留時間試驗(yàn)結(jié)果如下：聯(lián)苯菊酯（10.006分鐘）、甲氰菊酯（9.875分鐘）、三氟氯氰菊酯（11.892分鐘）、氯菊酯（14.920分鐘）、氟胺氰菊酯（25.336分鐘）、溴氰菊酯（26.531分鐘）。

2.6 回收率測定

試驗(yàn)測定回收率為：聯(lián)苯菊酯（99.5%）、甲氰菊酯（99.1%）、三氟氯氰菊酯（98.4%）、氯菊酯（99.2%）、氟胺氰菊酯（94.7%）、溴氰菊酯（92.6%）。

2.7 最小檢測濃度

試驗(yàn)測定最小檢測濃度為：聯(lián)苯菊酯（0.0004 mg/kg）、甲氰菊酯（0.0006 mg/kg）、三氟氯氰菊酯（0.0003 mg/kg）、氯菊酯（0.008 mg/kg）、氟胺氰菊酯（0.001 mg/kg）、溴氰菊酯（0.001 mg/kg）。

3 結(jié)論

綜上所述，氣相色譜法在選用合適的色譜柱、提取溶劑、提取方法、洗脫條件、固相萃取柱時可以得到相對準(zhǔn)確的回收率和精密度檢測結(jié)果。