崔婧
要想保障食品檢驗(yàn)結(jié)果更加精確,就需要運(yùn)用各種檢測(cè)技術(shù)。在眾多檢測(cè)技術(shù)中屬于新型病毒檢測(cè)技術(shù)的就是核酸探針及PCR技術(shù),能夠有效鑒別食品中的病菌,對(duì)于公共衛(wèi)生安全的維護(hù)具有重大作用。
一、核酸探針和PCR技術(shù)原理
1.核酸探針。核酸探針?biāo)鶎俜懂牉榉肿由飳W(xué),該技術(shù)利用的原理是以生物核苷酸堿基互補(bǔ)為主,通過相應(yīng)基因探針的使用,進(jìn)而和需測(cè)定靶序列之間形成互補(bǔ)關(guān)系,之后對(duì)目標(biāo)靶序列存在與否進(jìn)行檢測(cè)。核酸雜交環(huán)節(jié)是核酸探針技術(shù)重點(diǎn)所在,以特異堿基配對(duì)為依據(jù),針對(duì)其過程進(jìn)行研究,加之將標(biāo)記的特殊核酸片段進(jìn)行分離處理,能使檢測(cè)特定核酸探針的制作得以良好實(shí)現(xiàn)。該技術(shù)目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用于食品安全檢驗(yàn)方面。
2.PCR技術(shù)。使體外所存特定雙鏈DNA得以有效擴(kuò)增是PCR技術(shù)原理所在,所以該技術(shù)又有體外基因擴(kuò)增法之稱。應(yīng)用該技術(shù)時(shí),首先在高溫條件下DNA雙鏈會(huì)產(chǎn)生解鏈現(xiàn)象,進(jìn)而使單鏈形成,之后將兩段人工合成且能夠和雙鏈DNA兩端序列互補(bǔ)的核苷酸片段加入其中,最終通過以上程序的重復(fù),即可保障DNA片段擴(kuò)增及DNA大量增加,在此基礎(chǔ)上通過電泳等技術(shù)的利用,對(duì)DNA進(jìn)行檢測(cè),即可達(dá)到食品安全檢驗(yàn)的目的。
二、核酸探針在食品檢驗(yàn)中的應(yīng)用及效果
1.放射性標(biāo)記探針技術(shù)。該技術(shù)的主要作用物是放射性同位素,3H、32P、35S為目前廣泛應(yīng)用的同位素。該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是有較高的靈敏度,缺點(diǎn)是涉及放射性污染,會(huì)傷害人體。所以雖然此技術(shù)具有良好的檢測(cè)效果,但是因其使用過程具有較大危害性,廣泛推廣難以實(shí)現(xiàn)。
2.非放射性標(biāo)記探針技術(shù)。食品檢驗(yàn)中應(yīng)用該技術(shù)時(shí),主要標(biāo)記物是地高辛或生物素,而這兩種標(biāo)記物所屬范疇為半抗原。使用生物素標(biāo)記物時(shí),并不會(huì)給人體造成較大傷害,但是其使用環(huán)境需要以無光為主,主要原因在于光照會(huì)影響生物素,具體是受紫外線影響會(huì)有分解現(xiàn)象出現(xiàn)。而使用地高辛標(biāo)記物時(shí),具有較高的靈敏度,并且也不會(huì)嚴(yán)重傷害人體,同時(shí)與生物素標(biāo)記物相比,地高辛具有較高的特異性,所以得到了廣泛應(yīng)用。
三、PCR技術(shù)在食品檢驗(yàn)中的應(yīng)用及效果
1.檢測(cè)單核增生李斯特氏菌。針對(duì)食品中該病菌進(jìn)行檢測(cè),以往通常是以分離鑒定技術(shù)為主,但耗時(shí)較長(zhǎng),難以保障及時(shí)的檢測(cè)。而PCR技術(shù)能使檢測(cè)效率大幅度提升,該技術(shù)能擴(kuò)增食品中李斯特氏菌溶液的基因,確保檢測(cè)快速完成,而待測(cè)樣本上可被檢出的細(xì)菌高達(dá)5-50個(gè),應(yīng)用效果十分顯著。
2.檢測(cè)黃金色葡萄球菌。當(dāng)人們食用含有金黃色葡萄球菌的食物后就會(huì)引發(fā)食物中毒,并因此產(chǎn)生毒體休克綜合征。PCR技術(shù)具有特異性及靈敏性等優(yōu)勢(shì),能夠?qū)瘘S色葡萄酒菌進(jìn)行快速檢驗(yàn),避免食物中毒現(xiàn)象的發(fā)生。
3.檢測(cè)沙門氏菌。應(yīng)用PCR技術(shù)檢測(cè)食品中的沙門氏菌,是通過基因特異性序列的克隆,之后將引物設(shè)定,從而將食品中的沙門氏菌快速檢驗(yàn)并標(biāo)記出來,該技術(shù)在檢測(cè)食品中沙門氏菌時(shí)有高達(dá)100%的精確率。
食品安全問題十分重要,從目前社會(huì)實(shí)際情況來看,時(shí)常會(huì)發(fā)生一些食品安全事件,在一定程度上危害了人們的生活及安全。而導(dǎo)致這些事件發(fā)生的主要根源之一就是微生物,受微生物中致病菌因素影響,不僅會(huì)引發(fā)疾病,嚴(yán)重情況下還會(huì)導(dǎo)致死亡。所以,在食品檢驗(yàn)過程中必須要針對(duì)食品中所含致病菌進(jìn)行檢測(cè),而核酸探針及PCR技術(shù)就是檢測(cè)致病菌的好方法。