李果，張馳，黃銘，胡衛(wèi)紅

（華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北 武漢430030）

尿路感染（urinary tract infection,UTI）是尿道內(nèi)大量微生物繁殖而引起尿頻、尿急、尿痛、發(fā)熱、腎區(qū)不適等癥狀的一種臨床綜合癥,不及時(shí)治療常會(huì)導(dǎo)致慢性感染。它的檢測(cè)“金標(biāo)準(zhǔn)”是尿液培養(yǎng)，但從尿液標(biāo)本的留取到獲得細(xì)菌培養(yǎng)的報(bào)告，需要3～4d時(shí)間,不能及時(shí)的對(duì)臨床診斷提供參考意見。本研究運(yùn)用UF-1000i檢測(cè)細(xì)菌數(shù)與中段尿細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果的比較,旨在找到一個(gè)靈敏度與特異度均佳的菌值區(qū)間,為臨床早期診斷尿路感染提供更準(zhǔn)確的信息。

1 材料和方法

1.1 一般材料265份來自我院的疑似UTI的患者尿樣（被懷疑的條件：第一次尿沉渣檢查WBC≥20/μl，細(xì)菌計(jì)數(shù)≥1000/μl），其中男性5名，女性260名，年齡18～80歲，留取中段尿，女性均要求清潔外陰后留取標(biāo)本,按照無菌操作原則將患者的標(biāo)本留于無菌杯中并送檢。

1.2 試劑與儀器SYSMEX公司生產(chǎn)的UF-1000i自動(dòng)尿液分析儀及配套試劑和質(zhì)控品、Cled培養(yǎng)基。

1.3 標(biāo)本采集 按照無菌操作原則，留取清潔中段尿于無菌杯中送檢,留取標(biāo)本前女性均要求清潔外陰。

1.4 UF-1000i細(xì)菌計(jì)數(shù) 通過UF-1000i自動(dòng)尿液分析儀對(duì)標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌定量計(jì)數(shù),所有標(biāo)本在3h內(nèi)完成檢測(cè)。

1.5 細(xì)菌培養(yǎng) 充分混勻標(biāo)本后，用一次性定量接種環(huán)取標(biāo)本中的尿液10μl,采用3區(qū)劃線法劃到XLD選擇性培養(yǎng)基中,置于37℃孵育24h，通過檢驗(yàn)人員對(duì)細(xì)菌形態(tài)、菌落狀況、生化反應(yīng)進(jìn)行菌種鑒定，無細(xì)菌生長(zhǎng)的標(biāo)本延遲培養(yǎng)24h。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,應(yīng)用ROC曲線確定男性和女性細(xì)菌計(jì)數(shù)的cut-off值。運(yùn)用卡方χ2檢驗(yàn)判斷兩種方法之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果 臨床上泌尿系統(tǒng)感染診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”是中段尿培養(yǎng)，革蘭氏陽性菌（G+）以菌落計(jì)數(shù)≥104CFU/ml為陽性，而革蘭氏陰性菌（G-）以計(jì)數(shù)≥105CFU/ml為陽性。如果標(biāo)本的培養(yǎng)結(jié)果有三種以上的細(xì)菌,則判定為雜菌污染，標(biāo)本不合格，則剔除該數(shù)據(jù)。培養(yǎng)結(jié)果顯示，陽性結(jié)果有64例，陽性率為29.4%（G+菌24例，G-菌有40例），陰性結(jié)果為154例,檢出三種以上細(xì)菌的標(biāo)本47例，則被剔除。

2.2 UF-1000i自動(dòng)尿液分析儀細(xì)菌計(jì)數(shù)結(jié)果對(duì)尿路感染的診斷評(píng)價(jià) 將上述218份標(biāo)本用UF-1000自動(dòng)尿液分析儀檢測(cè)細(xì)菌計(jì)數(shù)和白細(xì)胞計(jì)數(shù)。將尿細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，與UF-1000i分析儀檢測(cè)的白細(xì)胞計(jì)數(shù)繪制ROC曲線,其下面積為0.712，見圖1，利用約登指數(shù)最大值來確定白細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)尿路感染診斷的cut-off值為30.56 cell/μl。采用相同方式，細(xì)菌計(jì)數(shù)的ROC曲線下的面積為0.849，見圖2，得到細(xì)菌量的cut-off值為細(xì)菌量≥710.43/μl。在WBC≥30.56/μl和細(xì)菌量≥710.43/μl，對(duì)218份標(biāo)本進(jìn)行評(píng)價(jià)，與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果,見表1,其對(duì)尿路感染的診斷性能，見表2。

圖1 儀器WBC計(jì)數(shù)與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果的比較

圖2 儀器細(xì)菌計(jì)數(shù)與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果的比較

表1 儀器WBC與細(xì)菌計(jì)數(shù)雙陽與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果的比較

3 討論

目前，診斷尿路感染必須依據(jù)對(duì)中段尿的細(xì)菌定量培養(yǎng)的結(jié)果。然而，一份尿液標(biāo)本從采集到獲取報(bào)告需要3d的時(shí)間，另外，被懷疑為尿路感染并被送檢細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本有很大部分培養(yǎng)結(jié)果陰性，給病人帶來不必要的經(jīng)濟(jì)損失和資源浪費(fèi)。有研究顯示[1-4],UF-1000i尿液分析儀對(duì)尿路細(xì)菌性感染疾病的診斷有一定臨床意義。本研究以細(xì)菌定量培養(yǎng)結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn),另外應(yīng)用UF-1000i尿液分析儀對(duì)中段尿標(biāo)本進(jìn)行了細(xì)菌定量計(jì)數(shù)，以期找到一個(gè)靈敏度與特異性度均佳的細(xì)菌值區(qū)間，能夠快速的篩查陰性結(jié)果。

表2 WBC與細(xì)菌計(jì)數(shù)的臨界值評(píng)價(jià)

本研究采用UF-1000i自動(dòng)尿液分析儀對(duì)218份中段尿進(jìn)行了細(xì)菌計(jì)數(shù),并與公認(rèn)的診斷尿路感染（UTI）的金標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行了比較，細(xì)菌培養(yǎng)陽性結(jié)果為真菌時(shí)，未納入此次研究。細(xì)菌培養(yǎng)是確診UTI的可靠并且普遍的方法,但費(fèi)時(shí)且費(fèi)用較高，因此如何早期預(yù)見并篩查出UTI，是臨床期待實(shí)驗(yàn)室急需解決的問題[5]。UF-1000i采用半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞/核酸熒光染色計(jì)數(shù)、細(xì)胞和細(xì)菌計(jì)數(shù)雙檢測(cè)通道、特異性核酸熒光染色，能準(zhǔn)確快速地對(duì)尿液中紅、白細(xì)胞以及細(xì)菌進(jìn)行定量分析[6],已成為大多數(shù)醫(yī)院進(jìn)行尿液分析的檢測(cè)手段。本研究運(yùn)用UF-1000i尿液分析儀對(duì)中段尿進(jìn)行檢測(cè)，選擇了與尿路感染關(guān)系緊密、與炎癥產(chǎn)生密切相關(guān)的參數(shù)（細(xì)菌計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)）進(jìn)行了對(duì)比分析，并與診斷尿路感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”細(xì)菌培養(yǎng)進(jìn)行了比較，共檢出64份陽性標(biāo)本，其中大腸埃希菌有24例，占很大一部分，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[7]，其次為變形桿菌8例、葡萄球菌5例和糞腸球菌2例和其他菌種。

UF-1000i對(duì)WBC計(jì)數(shù)、細(xì)菌計(jì)數(shù)的檢測(cè)值與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果呈正相關(guān)關(guān)系。通過ROC曲線分析，結(jié)合特異性和靈敏度兩者之和最大原則，計(jì)算出WBC計(jì)數(shù)的cut-off值為30.56個(gè)/μl,細(xì)菌計(jì)數(shù)的cut-off值為710.43個(gè)/μl（P<0.05）。所以當(dāng)WBC計(jì)數(shù)和細(xì)菌計(jì)數(shù)為雙陽性時(shí)，UF-1000i診斷尿路感染的真陽性率為42.9%，其不能夠準(zhǔn)確篩選陽性標(biāo)本，而其真陰性率為91%，因此能夠準(zhǔn)確的篩選陰性標(biāo)本。

本研究中假陽性有52例，發(fā)生率較高，這可能與尿液成分復(fù)雜，干擾因素較多有關(guān)，如儀器攜帶污染過高[8-10]；儀器對(duì)染色后的活菌和死菌均能不加區(qū)別的計(jì)數(shù)[11]，而培養(yǎng)只針對(duì)活菌；尿中過多的結(jié)晶超過了儀器的鑒別能力,其將部分非晶型結(jié)晶誤認(rèn)為細(xì)菌；患者在培養(yǎng)前服用了抗生素；患者使用了非潔凈容器留取尿標(biāo)本等。假陰性有11例,經(jīng)鏡檢有7例為細(xì)菌體積增大或聚集成團(tuán),可能被儀器誤認(rèn)為其他顆粒,有4例鏡下見細(xì)菌體積微小且數(shù)量少，可能為尿液儲(chǔ)留時(shí)間過短，導(dǎo)致菌群數(shù)量不足，未達(dá)到儀器檢出限。

綜上所述,本次實(shí)驗(yàn)雖未找到可靠的篩查陽性標(biāo)本的證據(jù)，但卻發(fā)現(xiàn)當(dāng)細(xì)菌計(jì)數(shù)與WBC計(jì)數(shù)均為陰性時(shí)，能夠快速的篩查陰性標(biāo)本。對(duì)于癥狀較為明顯的患者和疑似為陽性的標(biāo)本,就算細(xì)菌計(jì)數(shù)與WBC計(jì)數(shù)沒有達(dá)到閾值，也應(yīng)結(jié)合其他指標(biāo)如亞硝酸鹽，尿白細(xì)胞酯酶[12-14]等綜合判斷，必要時(shí)做尿培養(yǎng)，UF-1000i尿液分析儀主要用于尿路感染的篩查，不能替代尿培養(yǎng)，尿培養(yǎng)仍是診斷尿路感染的金標(biāo)準(zhǔn)。