吳成成 羅文兵 肖慧榮 謝昌營 胡麗霞 崔曼曼 張磊昌

【摘要】 目的：基于TLR4/NF-κB探討“金汁”糞菌移植（FMT）干預(yù)潰瘍性結(jié)腸炎（UC）小鼠的機制。方法：選取29只野生型雄性清潔級C57BL/10小鼠為研究對象。隨機選取7只作為對照組，其余22只大鼠采用葡聚糖酸鈉誘導(dǎo)法建立野生型小鼠UC模型。將這22只大鼠分為造模對照組（n=12）和FMT干預(yù)組（n=10），分別給予PBS液、糞菌液灌腸干預(yù)處理。另選取5只野生型雄性清潔級C57BL/10小鼠作為糞菌移植供體來源。觀察三組小鼠結(jié)腸組織TLR4、NF-κB（p65）表達水平，觀察三組小鼠結(jié)腸組織中下游細(xì)胞因子表達水平，分析TLR4、NF-κB（p65）及下游各細(xì)胞因子水平與疾病活動指數(shù)（DAI）和組織病理評分（HPS）的關(guān)系。結(jié)果：干預(yù)前，對照組DAI低于造模對照組和FMT干預(yù)組（P<0.05），造模對照組與FMT干預(yù)組DAI比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。干預(yù)后，造模對照組DAI高于對照組和FMT干預(yù)組，F(xiàn)MT干預(yù)組高于對照組（P<0.05）。FMT干預(yù)組干預(yù)后DAI低于干預(yù)前（P<0.05）。造模對照組HPS高于對照組與FMT干預(yù)組，且FMT干預(yù)組高于對照組（P<0.05）。造模對照組結(jié)腸長度短于FMT干預(yù)組與對照組，F(xiàn)MT干預(yù)組短于對照組（P<0.05）。造模對照組TLR4、NF-κB（p65）、TNF-α、IL-6、IL-1、IL-8及Tfh均高于對照組和FMT干預(yù)組，F(xiàn)MT干預(yù)組均高于對照組（P<0.05）。FMT干預(yù)組Tfr水平高于造模對照組與對照組，造模對照組高于對照組（P<0.05）;造模對照組Tfh/Tfr水平高于對照組與FMT干預(yù)組，對照組高于FMT干預(yù)組（P<0.05）。TLR4、NF-κB（p65）、TNF-α、IL-6、IL-1、IL-8、Tfh及Tfh/Tfr與DAI、HPS均呈正相關(guān)（P<0.05），Tfr與DAI、HPS均呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論：FMT可通過下調(diào)TLR4/NF-κB信號通路的表達，進而下調(diào)TNF-α、IL-6、IL-1、IL-8、Tfh及Tfh/Tfr表達水平，達到改善UC的臨床癥狀。

【關(guān)鍵詞】 TLR4/NF-κB 潰瘍性結(jié)腸炎 糞菌移植

Based on TLR4/NF-κB Analyze the Mechanism of “Jinzhi” Fecal Microbiota Transplantation in Mice with Ulcerative Colitis/WU Chengcheng， LUO Wenbing， XIAO Huirong， XIE Changying， HU Lixia， CUI Manman， ZHANG Leichang. //Medical Innovation of China， 2021， 18（31）： 00-005

[Abstract] Objective： To investigate the mechanism of “Jinzhi” fecal microbiota transplantation （FMI） in mice with ulcerative colitis （UC） based on TLR4/NF-κB. Method： A total of 29 wild-type male clean grade C57BL/10 mice were selected as the research objects. 7 rats were randomly selected as the control group， and the other 22 rats were used to establish the wild-type mouse model of UC induced by dextran sulfate sodium. The 22 rats were divided into modeling control group （n=12） and FMT intervention group （n=10）， and were treated with PBS solution and faecal bacteria solution enema， respectively. Another 5 wild-type male C57BL/10 mice were selected as the donor source of faecal bacteria transplantation. The expression levels of TLR4 and NF-κB （p65） in colon tissues of mice in the three groups were observed， and the expression levels of cytokines in the middle and downstream of colon tissues of mice in the three groups were observed， and the relationship between TLR4， NF-κB （p65）， cytokines in the downstream and disease activity index （DAI） and hihiopathological score （HPS） was analyzed. Result： Before intervention， DAI in the control group was lower than those in the modeling control group and the FMT intervention group （P<0.05）， and there was no significant difference in DAI between the modeling control group and the FMT intervention group （P>0.05）. After intervention， DAI in modeling control group was higher than those of the control group and FMT intervention group， while FMT intervention group was higher than that of the control group （P<0.05）. DAI in FMT intervention group after intervention was lower than that before intervention （P<0.05）. The HPS of the modeling control group was higher than those of the control group and the FMT intervention group， and the FMT intervention group was higher than that of the control group （P<0.05）. The colon length of the modeling control group was shorter than those of the FMT intervention group and control group， and that of the FMT intervention group was shorter than that of the control group （P<0.05）. TLR4， NF-κB （p65）， TNF-α， IL-6， IL-1， IL-8 and Tfh in modeling control group were higher than those in control group and FMT intervention group， while those in FMT intervention group were higher than those in control group （P<0.05）. The Tfr level of FMT intervention group was higher than those of the modeling control group and control group， and that of the modeling control group was higher than that of the control group （P<0.05）. The level of Tfh/Tfr in modeling control group was higher than those in control group and FMT intervention group， and that in control group was higher than that in FMT intervention group （P<0.05）. TLR4， NF-κB（p65）， TNF-α， IL-6， IL-1， IL-8， Tfh and Tfh/Tfr were positively correlated with DAI and HPS （P<0.05）， while Tfr was negatively correlated with DAI and HPS （P<0.05）. Conclusion： FMT can improve the clinical symptoms of UC by down-regulating the expression of TLR4/NF-κB signaling pathway， and then down-regulating the expression levels of TNF-α， IL-6， IL-1， IL-8， Tfh and Tfh/Tfr.

[Key words] TLR4/NF-κB Ulcerative colitis Fecal microbiota transplantation

First-authors address： Affiliated Hospital of Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine， Nanchang 330004， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.31.001

潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）是一種慢性非特異性炎癥性腸病，其病因和發(fā)病機制尚未完全明確，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為與環(huán)境、遺傳以及菌群失調(diào)等因素有關(guān)[1-2]。Toll樣受體（Toll-like receptor，TLR）是啟動炎癥反應(yīng)和免疫應(yīng)答的重要受體，TLRs介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中TLRs/NF-κB通路可調(diào)節(jié)腸黏膜中炎癥因子的表達水平，從而干預(yù)腸黏膜的炎癥反應(yīng)[3]。糞菌移植（fecal microbiota transplantation，F(xiàn)MT）是指通過健康人群的糞便提取功能菌群，再移植到患者消化道，重建腸道菌群的治療方式[4]。筆者的理論研究表明，中藥“金汁”與FMT乃源流之別，后者可視為對前者的繼承與創(chuàng)新，F(xiàn)MT乃是一種新“金汁”[5]。FMT在治療UC方面取得了一定的療效，筆者的前期動物實驗也證實了這一點[6]，但對于FMT治療炎性腸炎的具體機制仍不了解[7]。因此本文利用FMT干預(yù)對UC模型小鼠進行治療，基于TLR4/NF-κB信號通路探討FMT干預(yù)UC小鼠的作用機制，進一步為臨床利用“金汁”糞菌移植治療UC提供理論依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料 選取29只野生型雄性清潔級C57BL/10小鼠為研究對象，周齡6～8周，平均體重（21.6±2.8）g，小鼠均由江西中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物科技中心提供。

1.2 方法

1.2.1 分組與造模方法 隨機選取7只作為對照組，其余22只大鼠采用葡聚糖酸鈉誘導(dǎo)法建立野生型小鼠潰瘍性結(jié)腸炎（UC）模型。將這22只大鼠隨機分為造模對照組（n=12）和糞菌移植（FMT）干預(yù)組（n=10），分別給予PBS液、糞菌液灌腸干預(yù)處理。另選取5只野生型雄性清潔級C57BL/10小鼠作為糞菌移植供體來源。給予造模小鼠5%葡聚糖硫酸鈉蒸餾水飲用飼養(yǎng)5 d，之后改為正常飲用水飼養(yǎng)10 d;反復(fù)進行上述操作3個循環(huán)后建立小鼠慢性UC模型。

1.2.2 糞菌液制作方法 取供體小鼠新鮮糞便標(biāo)本，按7︰15（g/mL）溶于無菌PBS溶液中，分別采用2.0、1.0、0.5、0.25 mm不銹鋼篩過濾，過濾后離心機離心旋轉(zhuǎn)，6 000×g，離心15 min后取菌體，無菌PBS緩沖液沖洗3次，再重新置于25 mL PBS溶液中制成糞菌液，放置在4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 干預(yù)方法 對照組給予正常飲用水和常規(guī)飼料喂養(yǎng)，不進行其他處理。造模對照組腹腔注射4%水合氯醛（10 μL/g）麻醉，將石蠟油涂于內(nèi)徑2 mm塑料軟管上，并將軟管經(jīng)小鼠肛門插入結(jié)腸，插入約4 cm，使小鼠倒立并緩慢注射0.2 mL PBS溶液，注射完畢后拔出軟管，棉球按壓小鼠肛門，使小鼠保持倒立1 min后放回籠中。灌腸頻率2次/d，持續(xù)2周。FMT干預(yù)組小鼠給予0.2 mL糞菌液灌腸，灌腸方式同造模對照組，灌腸頻率2次/d，持續(xù)2周。

1.2.4 TLR4、NF-κB（p65）表達水平檢測方法 采用頸椎脫臼法處死三組小鼠，U形切口剖開小鼠腹部，取出全部結(jié)腸組織。選擇適量結(jié)腸組織經(jīng)10%甲醛溶液固定后石蠟切片，制作病理標(biāo)本。采用免疫組化染色分析結(jié)腸組織TLR4、NF-κB（p65）表達水平。結(jié)腸組織石蠟包埋后進行4 μm厚連續(xù)切片，采用SABC法進行免疫組織化學(xué)染色。一抗：1︰100兔抗鼠NF-κB（p65）;二抗：生物素化山羊抗鼠IgG二抗工作液，均由武漢博士的生物科技有限公司提供。免疫后每張切片隨機選取5個視野，利用400倍光鏡進行攝片，通過Image-Pro Plus 5.1圖像分析系統(tǒng)對結(jié)腸組織TLR4、NF-κB（p65）的表達情況進行定量分析。

1.2.5 細(xì)胞因子水平檢測方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）對三組小鼠細(xì)胞因子水平進行檢測，具體操作按試劑盒說明書進行操作。

1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) （1）對比三組干預(yù)前后疾病活動指數(shù)（disease activity index，DAI）。采用人類炎性腸病疾病活動指數(shù)計算小鼠DAI，包括體重變化、大便性狀、便血程度三個方面，DAI=（體重下降分?jǐn)?shù)+大便性狀分?jǐn)?shù)+便血分?jǐn)?shù)）/3[8]。（2）對比三組組織病理評分（histopathological score，HPS）及結(jié)腸長度。采用Delelman等[9]的評分方法評估小鼠HPS，包括炎癥程度、隱窩破壞、病變深度和病變范圍四個方面。（3）對比三組結(jié)腸組織TLR4、NF-κB（p65）表達水平及細(xì)胞因子表達水平。細(xì)胞因子包括腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白介素-6（interleukin-6，IL-6）、白介素-1（interleukin-1，IL-1）、白介素-8（interleukin-8，IL-8）、脾臟組織濾泡輔助性T細(xì)胞（T follicular helper，Tfh）及濾泡調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（T follicular regulatory，Tfr）水平。（4）分析TLR4、NF-κB（p65）以及各細(xì)胞因子水平與DAI與HPS的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 18.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計量資料用（x±s）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗，組內(nèi)比較采用配對t檢驗，多組間比較采用方差分析;計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗。采用Pearson進行相關(guān)性分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組干預(yù)前后DAI對比 干預(yù)前后，三組DAI比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;干預(yù)前，對照組DAI低于造模對照組和FMT干預(yù)組（P<0.05），造模對照組與FMT干預(yù)組DAI比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。干預(yù)后，造模對照組DAI高于對照組和FMT干預(yù)組，F(xiàn)MT干預(yù)組高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。FMT干預(yù)組干預(yù)后DAI低于干預(yù)前（P<0.05），對照組與造模對照組干預(yù)前后DAI比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2.2 三組HPS評分和結(jié)腸長度對比 造模對照組HPS高于對照組與FMT干預(yù)組，F(xiàn)MT干預(yù)組高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。造模對照組結(jié)腸長度短于FMT干預(yù)組與對照組，F(xiàn)MT干預(yù)組短于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.3 三組TLR4、NF-κB（p65）以及各細(xì)胞因子表達水平對比 造模對照組TLR4、NF-κB（p65）、TNF-α、IL-6、IL-1、IL-8及Tfh均高于對照組和FMT干預(yù)組，F(xiàn)MT干預(yù)組均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。FMT干預(yù)組Tfr水平高于造模對照組與對照組，造模對照組高于對照組（P<0.05）;造模對照組Tfh/Tfr水平高于對照組與FMT干預(yù)組，對照組高于FMT干預(yù)組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

2.4 TLR4、NF-κB（p65）以及各細(xì)胞因子與小鼠癥狀的關(guān)系 TLR4、NF-κB（p65）、TNF-α、IL-6、IL-1、IL-8、Tfh及Tfh/Tfr與DAI、HPS均呈正相關(guān)，Tfr與DAI、HPS均呈負(fù)相關(guān)（P<0.05），見表4。

3 討論

UC屬于炎癥性腸炎，有學(xué)者提出UC的發(fā)病機制可能為環(huán)境因素導(dǎo)致易感人群在腸道菌群失調(diào)情況下，激活了腸道免疫和非免疫系統(tǒng)，引起腸道免疫反應(yīng)，促進炎癥的發(fā)生和發(fā)展，最終形成UC[10-11]。腸道菌群是維持人體腸道免疫功能的重要角色，相對于人體來說是一種免疫機制。近年來越來越多學(xué)者轉(zhuǎn)向?qū)δc道微生態(tài)的研究[12-14]。“金汁”是我國中醫(yī)里的中藥之一，早在東晉時期《肘后備急方》中就有記載，明代的《本草綱目》中也有利用糞便治療疾病的記載[15]。糞菌移植是近年來興起的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療方法，與中醫(yī)里的“金汁”有異曲同工之妙。張佳佳等[16]研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)MT治療UC患者有效率高達90%。雖然FMT在治療UC上有著較好效果，但目前對FMT治療UC的作用機制仍未完全明確。

由于目前多數(shù)學(xué)者已經(jīng)對TLRs介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中TLRs/NF-κB通路調(diào)節(jié)腸黏膜炎癥因子的機制已經(jīng)有較多研究，已證實TLR4、NF-κB的表達可上調(diào)或下調(diào)腸黏膜炎癥因子，而UC又屬于炎癥性腸炎，炎癥因子在UC的發(fā)生發(fā)展中起到重要作用[17-18]。因此本文通過糞菌移植治療UC模型小鼠，探討基于TLR4、NF-κB信號通路，F(xiàn)MT治療UC的作用機制。本文采用DAI、HPS來體現(xiàn)不同UC小鼠的癥狀程度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對照組由于未建立UC模型，相對于造模對照組和FMT干預(yù)組，DAI、HPS均較低;FMT干預(yù)組經(jīng)過FMT干預(yù)，DAI、HPS明顯降低，低于造模對照組;而造模對照組建立UC模型后，僅進行PBS緩沖液灌腸，并無治療作用，因此DAI、HPS最高。結(jié)果提示對照組未發(fā)生UC，F(xiàn)MT干預(yù)組小鼠UC病情有所緩解，而造模對照組小鼠未得到治療，UC病情嚴(yán)重。在對比三組小鼠結(jié)腸長度時發(fā)現(xiàn)，對照組最長，造模對照組最短，這是由于FMT干預(yù)組經(jīng)過FMT治療，結(jié)腸腸黏膜得到修復(fù)改善，而造模對照組未治療，結(jié)腸腸黏膜損傷嚴(yán)重，長度明顯縮短。本研究發(fā)現(xiàn)，造模對照組TLR4、NF-κB（p65）以及上述下游細(xì)胞因子表達水平最高，F(xiàn)MT干預(yù)組其次，對照組最低。結(jié)果顯示，F(xiàn)MT干預(yù)組經(jīng)過FMT干預(yù)能明顯降低TLR4、NF-κB（p65）和各細(xì)胞因子表達水平。在Di等[19]研究結(jié)果顯示，經(jīng)過FMT干預(yù)的小鼠炎癥因子水平明顯低于未干預(yù)的小鼠，結(jié)果表明FMT能一定程度上抑制炎癥因子的合成和釋放，降低炎癥反應(yīng)。本文研究結(jié)果與其結(jié)果一致。通過最終對比TLR4、NF-κB（p65）和各因子表達水平與三組小鼠的癥狀時發(fā)現(xiàn)，隨著小鼠UC程度越嚴(yán)重，TLR4、NF-κB（p65）和各因子表達水平越高，結(jié)果提示TLR4、NF-κB（p65）、TNF-α、IL-6、IL-1以及IL-8表達水平與UC癥狀呈明顯正相關(guān)。這表明TLR4、NF-κB（p65）、TNF-α、IL-6、IL-1以及IL-8參與了UC的發(fā)生和發(fā)展，TLR4、NF-κB（p65）、TNF-α、IL-6、IL-1以及IL-8表達水平提高，導(dǎo)致UC更嚴(yán)重。而經(jīng)過FMT干預(yù)，能有效下調(diào)TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1以及IL-8的表達水平，這表明FMT是通過控制TLR4、NF-κB（p65）信號通路，來下調(diào)TNF-α、IL-6、IL-1以及IL-8的表達水平，從而減輕腸道炎癥反應(yīng)，緩解UC癥狀。

Tfh和Tfr是CD4+T淋巴細(xì)胞的新亞型，主要由淋巴濾泡細(xì)胞分化而成，對平衡機體免疫力具有重要作用。研究顯示，自身免疫性疾病與Tfh/Tfr比例失衡具有重要關(guān)系[20]。在本文結(jié)果中發(fā)現(xiàn)，造模對照組Tfh和Tfh/Tfr均明顯高于對照組和FMT干預(yù)組（P<0.05），表明兩者可能參與了UC的發(fā)病過程。Tfh具有幫助B細(xì)胞發(fā)育的功效，能提高抗原親和力，維持長期體液免疫應(yīng)答。Tfr是從調(diào)節(jié)性T細(xì)胞分化而來，具有趨化受體CXCR5的作用，抑制B細(xì)胞的分化和成熟，生成抗體等。結(jié)果顯示，造模對照組的Tfh和Tfr水平均高于對照組（P<0.05），且Tfh升高更明顯，因此Tfh/Tfr明顯升高?？梢娫炷φ战M發(fā)生了抗原抗體免疫反應(yīng)，Tfh和Tfr均被刺激分化，以Tfh升高為主，進一步促進免疫應(yīng)答。FMT干預(yù)組Tfh及Tfh/Tfr水平較造模對照組有明顯降低（P<0.05），表明接受糞菌移植后，小鼠上述指標(biāo)有明顯下降，而Tfr水平升高，可見Tfh具有促進炎癥因子的作用，而Tfr是UC的保護因子。

綜上所述，糞菌移植可通過控制TLR4、NF-κB信號通路的表達，下調(diào)TNF-α、IL-6、IL-1、IL-8、Tfh及Tfh/Tfr表達水平，達到改善UC的臨床癥狀。

參考文獻

[1]王鄭君.糞菌移植在炎癥性腸病中的研究進展[J].醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報，2019，32（8）：891-896.

[2]孫中美，李軍祥，趙興杰，等.清腸溫中方聯(lián)合糞菌移植對DSS誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎大鼠腸黏膜的保護作用及其機制研究[J].中國中醫(yī)急癥，2019，28（7）：1221-1225.

[3]劉鑫，閔敏，劉巖，等.糞菌移植治療潰瘍性結(jié)腸炎的臨床進展[J].中國醫(yī)刊，2017，52（1）：23-26.

[4]郭悅承，黃春蘭，陸穎影，等.糞菌移植治療現(xiàn)狀及其在炎癥性腸病中的應(yīng)用[J].國際消化病雜志，2018，38（5）：294-296，305.

[5]劉朋，胡曉陽，李帥，等.中藥金汁與糞菌移植的異同及臨床運用[J].江西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2018，3（5）：109-112.

[6]張磊昌，鐘世彪，肖慧榮，等.糞菌移植對潰瘍性結(jié)腸炎小鼠的干預(yù)效果分析[J].結(jié)直腸肛門外科，2017，23（6）：683-687.

[7] Ali A A，Abd Al Haleem E N，Khaleel S A，et al.Protective effect of cardamonin against acetic acid-induced ulcerative colitis in rats[J].Pharmacol Rep，2017，69（2）：268-275.

[8]林麗萍，王承黨.糞菌移植對潰瘍性結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸黏膜Th1/Th2細(xì)胞及其細(xì)胞因子表達的影響[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志，2017，29（12）：1365-1372.

[9] Dieleman L A，Palmen M J，Akol H，et al.Chronic experimental colitis induced by dextran sulphate sodium （DSS） is characterized by Th1 and Th2 cytokines[J].Clin Exp Immunol，1998，114（3）：385-391.

[10]胡慶，呂沐瀚，鄧明明，等.糞菌移植及聯(lián)合果膠治療對DSS誘導(dǎo)結(jié)腸炎小鼠的影響[J].西南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2017，40（6）：577-582.

[11] Alatab S，Sepanlou S，Ikuta K S，et al.The global，regional，and national burden of inflammatory bowel disease in 195 countries and territories，1990-2017：a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2017[J].Lancet Gastroenterol Hepatol，2020，5（1）：17-30.

[12]張夢輝，王宏剛，王寒，等.腸道炎癥負(fù)擔(dān)程度評分對潰瘍性結(jié)腸炎炎癥負(fù)擔(dān)評價的研究[J].中國醫(yī)學(xué)裝備，2020，17（1）：122-125.

[13]倪小冬，李幼生，張永良，等.PEC途徑行糞菌移植加腸內(nèi)營養(yǎng)治療復(fù)發(fā)性潰瘍性結(jié)腸炎[J].腸外與腸內(nèi)營養(yǎng)，2015，22（1）：29-33，38.

[14]秦謙，龔豪，楊洋，等.糞菌移植通過改善腸黏膜屏障功能治療硫酸葡聚糖誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2017，39（12）：1231-1238.

[15]祝青青，靖大道.糞菌移植療法在炎癥性腸病中的研究現(xiàn)狀[J].國際消化病雜志，2016，36（4）：224-226，230.

[16]張佳佳，王曉紅，王冰心，等.糞菌移植治療潰瘍性結(jié)腸炎的療效及其相關(guān)因素分析[J].胃腸病學(xué)，2019，24（3）：153-159.

[17]姬盼盼，周中銀，李櫆，等.糞菌移植在小鼠實驗性結(jié)腸炎中的療效研究[J].醫(yī)學(xué)研究雜志，2016，45（2）：54-58.

[18]卿蕊，向晴可，肖非，等.肺炎克雷伯菌黏附素FimH蛋白通過TLR4/NF-κB途徑誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞分泌炎癥因子[J].免疫學(xué)雜志，2020，36（3）：208-212，218.

[19] Di Sabatino A，Santilli F，Guerci M，et al.Oxidative stress and thromboxane-dependent platelet activation in inflammatory bowel disease：effects of anti-TNF-αtreatment[J].Thromb Haemost，2016，116（3）：486-495.

[20] LIU G，YU L，F(xiàn)ANG J，et al.Methionine restriction on oxidative stress and immune response in dss-induced colitis mice[J].Oncotarget，2017，8（27）：44511-44520.

（收稿日期：2021-02-18） （本文編輯：田婧）