◎ 張新宇，曾永清，張冠華，張 強(qiáng)，張純剛

（遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，遼寧 大連 116620）

刺梨富含維生素C，刺梨果肉中維生素C 含量約為1 500 mg/100 g，因此具有抗氧化、增強(qiáng)人體免疫力的功效[1-2]。黃芽湯出自清代黃元御先生的《四圣心源》，其組方中提到：“人參入戊土而益胃氣，走己土而助脾陽，理中第一。甘草入脾、胃兩經(jīng)，補(bǔ)益中焦脾胃，養(yǎng)育四旁。茯苓利水燥土。干姜燥濕溫中，行郁降濁，補(bǔ)益火土，消納飲食?！庇纱丝梢?，4 種藥材合用，具有養(yǎng)脾健胃的功效[3]。現(xiàn)將刺梨與黃芽湯經(jīng)冷凍干燥制備成凍干粉[4]，加以風(fēng)味劑木糖醇制成刺梨功能性沖劑。目前，市場上未發(fā)現(xiàn)相關(guān)產(chǎn)品，在此背景下開發(fā)了此產(chǎn)品，希望推向市場。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

刺梨、人參、茯苓、干姜和甘草，均為市售；β-麥芽糊精、木糖醇，均為食品級；對照品人參皂苷Rb1（批號：ST02480120），購自上海詩丹德標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)服務(wù)有限公司；乙腈、甲醇，均為色譜級，購自瑞典歐森巴克化學(xué)公司；娃哈哈純凈水，購自娃哈哈集團(tuán)有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

WGL-230B 型電熱鼓風(fēng)干燥箱（天津市泰斯特儀器有限公司）、PTHW 型調(diào)溫控溫加熱電熱套（上海予華儀器有限公司）、FA1004 型精密電子天平（天津天馬衡基儀器有限公司）、DZF6020 型真空冷凍干燥機(jī)（廣州市康恒儀器有限公司）以及Agilent 1100 高效液相色譜儀（安捷倫科技公司，包括四元泵，VWD可變波長掃描紫外檢測器，Chemstations 化學(xué)工作站）。

1.3 HPLC 法測定黃芽湯煎煮液中人參皂苷Rb1 的含量

1.3.1 色譜條件

色譜柱：ChromCore ARC18（5 μm，4.6×150 mm）；流動相：乙腈-水，按表1 梯度洗脫；檢測波長：203 nm；柱溫：室溫；流速：1.0 mL·min-1；進(jìn)樣量20 μL。

表1 梯度洗脫表

1.3.2 對照品溶液的制備

精密稱取人參皂苷Rb1對照品2.002 mg 于10 mL容量瓶中，加甲醇適量，超聲溶解，放至室溫定容，搖勻，即得人參皂苷Rb1對照品溶液。

1.3.3 供試品溶液的制備

取制備好的黃芽湯煎煮液適量，過0.22 μm 微孔濾膜2 次，作為供試品溶液。

1.4 黃芽湯煎煮工藝的優(yōu)化

將人參、干姜、茯苓和甘草粉碎后過40 目篩，以3 ∶2 ∶2 ∶2 的質(zhì)量比例混合均勻，加水回流煎煮，煎煮液過0.22 μm 微孔濾膜，作為供試品溶液進(jìn)樣，以人參皂苷Rb1浸出量為指標(biāo)[5]，以加水倍數(shù)、煎煮時(shí)間、煎煮次數(shù)作為正交試驗(yàn)的影響因素，采用3 因素3 水平正交設(shè)計(jì)表L9（33）優(yōu)化黃芽湯煎煮工藝，正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表見表2。

表2 L9（33）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表

1.5 制備黃芽湯凍干粉及刺梨凍干粉

將優(yōu)化后的煎煮工藝下制備的黃芽湯煎煮液過濾后，進(jìn)行預(yù)凍及冷凍干燥，粉碎過篩密封包裝，即得黃芽湯凍干粉。將刺梨鮮果清洗后去核去刺，壓榨成汁，低溫澄清后過濾，進(jìn)行預(yù)凍及冷凍干燥，粉碎過篩密封包裝，即得刺梨凍干粉。

1.6 基粉粒度的確定

選取沖劑基粉粒徑為80 目、100 目、150 目進(jìn)行試驗(yàn)。取1 g 沖劑基粉，倒入（60±1）℃溫開水50 mL，用玻璃棒攪拌均勻后，通過懸浮效果及感官評價(jià)選擇合適的基粉粒徑。

1.7 沖劑基粉添加比例及風(fēng)味的優(yōu)化

為加強(qiáng)沖劑的適口性，需采用最佳混合比例來添加刺梨凍干粉與黃芽湯凍干粉，以及加入木糖醇作為風(fēng)味劑配制沖劑。設(shè)定刺梨凍干粉添加量為50%、70%、80%和90%，黃芽湯凍干粉添加量則為50%、30%、20%和10%進(jìn)行感官評分，用以確定沖劑基粉添加比例；再在確定沖劑基粉添加比例后，加入20%、30%、40%比例的木糖醇，用以優(yōu)化風(fēng)味。

1.8 沖劑的感官評定

采用綜合評分的方法，組成10 人感官評價(jià)小組，根據(jù)沖調(diào)后的色澤、滋味、氣味等各項(xiàng)感官指標(biāo)，取平均值為最終得分，評分標(biāo)準(zhǔn)見表3。

表3 品質(zhì)評價(jià)計(jì)分標(biāo)準(zhǔn)表

2 結(jié)果與分析

2.1 HPLC 法測定黃芽湯煎煮液中的人參皂苷Rb1 含量結(jié)果

2.1.1 專屬性考察

分別精密吸取空白甲醇、對照品溶液、供試品溶液各20 μL，按1.3.1色譜條件進(jìn)樣測定，色譜圖見圖1～圖3，其中人參皂苷Rb1對照品出峰時(shí)間為61.174 min，供試品中人參皂苷Rb1出峰時(shí)間為61.186 min，待測指標(biāo)成分分離度均符合分析要求。

圖1 空白溶劑色譜圖

圖2 對照品色譜圖

圖3 供試品色譜圖

2.1.2 線性關(guān)系考察

將人參皂苷Rb1對照品溶液用甲醇逐級稀釋配制濃度為200.2 μg·mL-1、100.1 μg·mL-1、50.05 μg·mL-1、25.02 μg·mL-1、12.51 μg·mL-1和6.25 μg·mL-1的 系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別進(jìn)樣20 μL，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（X），以峰面積為縱坐標(biāo)（Y）進(jìn)行線性回歸，回歸方程為Y=21 530X-52 195，R2=0.999 8。結(jié)果表明人參皂苷Rb1在相應(yīng)的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2 黃芽湯正交試驗(yàn)優(yōu)化提取工藝

由表4 正交試驗(yàn)結(jié)果可知，3 個(gè)因素對人參皂苷Rb1浸出量的影響次序?yàn)镃（煎煮次數(shù)）＞A（加水倍數(shù)）＞B（煎煮時(shí)間）。根據(jù)人參皂苷Rb1浸出量的含量可知最優(yōu)提取工藝為A3B1C3，即加水倍數(shù)24 倍，煎煮時(shí)間30 min，煎煮3 次。

表4 L9（33）正交試驗(yàn)結(jié)果表

2.3 基粉粒度對沖劑穩(wěn)定性的影響

通過懸浮效果及感官評價(jià)選擇合適的基粉粒徑，結(jié)果見表5。根據(jù)感官評定結(jié)果，基粉粒徑為100 目與150 目時(shí)，基粉復(fù)溶效果均好，且口感細(xì)膩、穩(wěn)定性較好，但是150 目的基粉靜電效果較強(qiáng)，易吸附于包裝材料內(nèi)部，易使原料損失較大，考慮成本因素，故選用100 目作為基粉粒徑。

表5 感官評價(jià)結(jié)果表

2.4 沖劑基粉添加比例及風(fēng)味的優(yōu)化

由圖4、圖5 可知，刺梨凍干粉添加量為80%時(shí)，口感最佳，但經(jīng)人工品嘗后發(fā)現(xiàn)甜度偏低，因此選用添加木糖醇來進(jìn)行調(diào)味，根據(jù)感官質(zhì)量評分結(jié)果，最終選定基粉添加比例為：刺梨凍干粉80%，黃芽湯凍干粉20%；風(fēng)味劑木糖醇的添加量為基粉總量的30%。

圖4 刺梨凍干粉添加量對感官評價(jià)的影響圖

圖5 木糖醇添加量對感官評價(jià)的影響圖

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)以刺梨、人參、茯苓、甘草和干姜為原料，經(jīng)蒸煮、冷凍干燥處理，加以適當(dāng)?shù)妮o料，按比例混合而成的刺梨功能性沖劑，具有開胃健脾、補(bǔ)充維生素C 的功效。通過正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化原料的提取工藝，得到最佳提取工藝為：加水倍數(shù)24 倍，煎煮時(shí)間30 min，煎煮次數(shù)3 次。提取物冷凍干燥后粉碎過篩得沖劑基粉，通過感官評價(jià)對基粉粒徑、風(fēng)味劑添加量進(jìn)行優(yōu)化，確定該沖劑最佳配方為：沖劑基粉添加量0.5 g（粒度為100 目，80%刺梨凍干粉，20%黃芽湯凍干粉），木糖醇0.15 g（30%）。制得的功能性沖劑為淡黃色，口感細(xì)膩且香甜，該工藝簡單科學(xué)，可工業(yè)化生產(chǎn)。