張海濤，李云龍，陳永亮，顧開朗，高 峰

（徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇徐州 221006）

魚粉是一種優(yōu)質(zhì)蛋白源，目前被廣泛應(yīng)用在水產(chǎn)動(dòng)物餌料中，但隨著我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)模的迅速擴(kuò)大，全價(jià)配合飼料的全面推廣，魚粉需求量大大增加，同時(shí)全球漁業(yè)資源有限，魚粉的價(jià)格一直居高不下，造成水產(chǎn)動(dòng)物飼料的成本增加（周歧存等，2005）。為此，尋求一種優(yōu)質(zhì)、價(jià)廉且供應(yīng)量大的魚粉替代蛋白源成為突破水產(chǎn)養(yǎng)殖成本瓶頸的關(guān)鍵（張海濤等，2017）。

泥鰍的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富，有藥用價(jià)值和保健價(jià)值。因其肉質(zhì)細(xì)嫩、味道鮮美、高蛋白低脂肪等特點(diǎn)，廣泛受到中國(guó)、日本、韓國(guó)等東南亞國(guó)家消費(fèi)者的青睞（王澤等，2020）。本文以泥鰍為研究對(duì)象，在基礎(chǔ)飼料中以新型蠅蛆蛋白飼料替代不同比例的魚粉，分析這一變化對(duì)泥鰍生長(zhǎng)性能和非特異性免疫力的影響，從而科學(xué)評(píng)估新型蠅蛆蛋白飼料替代魚粉的可行性。

1 試驗(yàn)材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料 將810尾泥鰍幼魚于實(shí)驗(yàn)室水族箱內(nèi)飼喂2周，后隨機(jī)分為6組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)45尾，試驗(yàn)時(shí)間50 d。試驗(yàn)使用的新型蠅蛆蛋白飼料為徐州水產(chǎn)工程技術(shù)研究中心提供，用新型蠅蛆蛋白飼料等蛋白質(zhì)替代基礎(chǔ)飼料中20%、40%、60%、80%和100%的魚粉，配制6種等氮等能試驗(yàn)飼料（Ⅰ組～Ⅴ組），其中Ⅵ為對(duì)照組。各組基礎(chǔ)飼料配方及化學(xué)成分見表l。

1.2 樣品采集與測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束后停喂24 h，分別稱量各組泥鰍的終末體重，統(tǒng)計(jì)泥鰍的尾數(shù)，計(jì)算平均終末體重、增重率、特定生長(zhǎng)率、飼料系數(shù)、成活率等指標(biāo)。取各組織樣品：取泥鰍血，離心后吸出血清待測(cè)；取血后再取出泥鰍的內(nèi)臟，并分離出肝胰臟；取泥鰍背部肌肉，測(cè)其常規(guī)成分含量。將肝胰臟和血清放入-80℃超低溫冰箱中，待測(cè)超氧化物歧化酶（Superoxide ismutase，SOD）、過(guò) 氧 化 氫 酶（Catalase，CAT）、溶 菌 酶（Lysozyme，LZM）活性及丙二醛（Malonaldehyde，MDA）含量；肌肉中蛋白質(zhì)、脂肪、灰分和水分含量分別按GB/T 5009.5-2016食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定方法、GB/T 5009.6-2016食品中粗脂肪的測(cè)定方法、GB/T 5009.4-2016食品中灰分的測(cè)定方法和GB/T 5009.3-2016食品中水分的測(cè)定方法測(cè)定。

表1 基礎(chǔ)飼料配方及化學(xué)成分

1.3 統(tǒng)計(jì)分析 增重率、特定生長(zhǎng)率、餌料系數(shù)、存活率計(jì)算公式如下：

增重率/%=（終末體重-初始體重）/初體重×100；

特定生長(zhǎng)率/（%/d）=（ln終末體重-ln初始體重）/試驗(yàn)天數(shù)×100；

飼料系數(shù)=投飼總量/（終末體重+死亡體重-初始體重）；

存活率/%=終末尾數(shù)/初始尾數(shù)×100。

肝胰臟和血清中SOD、CAT和LZM活性及MDA含量測(cè)定均采用南京建成生物有限公司生產(chǎn)的試劑盒，操作步驟按試劑盒中的說(shuō)明書進(jìn)行。數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，采用SPSS 17.0 for Windows對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行單因子方差分析（ANOVA），采用 Tukey進(jìn)行多重比較（Tukey HSD test），P＜0.05表示差異顯著。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 新型蠅蛆蛋白飼料對(duì)泥鰍生長(zhǎng)性能的影響 由表2可知，各試驗(yàn)組終末重隨新型蠅蛆蛋白飼料的增加先上升后下降，其中Ⅲ組最高，為（4.44±0.02）g，顯著高于其他各組（P＜ 0.05），Ⅱ組和Ⅲ組無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。Ⅱ組和Ⅲ組泥鰍的WGR和SGR無(wú)顯著性差異（P＞0.05），但顯著高于其他各處理組（P＜0.05），Ⅰ組、Ⅳ組、Ⅴ組和對(duì)照組之間差異不顯著（P＞0.05）。各組FC的順序?yàn)棰蠼M＞Ⅱ組＞Ⅳ組＞Ⅰ組＞Ⅴ組＞Ⅵ組，但各處理之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。各組飼料SR在79.70%～97.04%，各替代組均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。

2.2 新型蠅蛆蛋白飼料對(duì)泥鰍肌肉成分的影響由表3可知，新型蠅蛆蛋白飼料替代不同比例魚粉后對(duì)泥鰍肌肉的粗蛋白和灰分均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。隨新型蠅蛆蛋白飼料替代魚粉比例的升高，泥鰍肌肉中粗脂肪和水分有先升高后降低的趨勢(shì)，但各處理組間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

表2 新型蠅蛆蛋白飼料替代魚粉對(duì)泥鰍生長(zhǎng)性能的影響

2.3 新型蠅蛆蛋白飼料對(duì)泥鰍免疫性能的影響由表4可知，泥鰍血清中SOD、CAT和LZM活性均隨著飼料中魚粉替代量的增加呈先上升后下降的趨勢(shì)，均在Ⅲ組（60%替代組）最高，分別為112.32 U/mL、8.13 U/mL、3.27μg/mL，Ⅱ組（40%替代組）和Ⅲ組（60%替代組）之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），但60%替代組均顯著高于其他各組（P＜0.05）；泥鰍血清中SOD、CAT和LZM活性均在Ⅵ組達(dá)最低值，分別為72.83 U/mL、7.45 U/mL、2.69 μg/mL。泥鰍血清中 MDA 含量的順序是Ⅵ組＞Ⅴ組＞Ⅳ組＞Ⅰ組＞Ⅱ組＞Ⅲ組，60%替代組最低，為10.89 nmol/mL，40%替代組和60%替代組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），但顯著低于其他各處理組（P＜0.05），且對(duì)照組顯著高于其他各組（P＜0.05）。

由表5可知，隨著新型蠅蛆蛋白飼料替代魚粉比例的增加，泥鰍肝胰臟中SOD和CAT活性先上升后降低，均在Ⅲ組最高，分別為152.61 U/mL、12.47 U/mL，Ⅱ組和Ⅲ組之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05），但Ⅲ組均顯著高于其他各組（P＜0.05），且對(duì)照組顯著低于其他替代組（P＜0.05）。泥鰍肝胰臟中MDA含量隨飼料中魚粉替代量的增加呈先下降后上升的趨勢(shì)，Ⅲ組最低，為12.41 nmol/mL，Ⅱ組和Ⅲ組之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05），但Ⅲ組顯著低于其他各組（P＜0.05），且對(duì)照組顯著高于其他各組（P ＜ 0.05）。

表3 新型蠅蛆蛋白飼料替代魚粉對(duì)泥鰍肌肉成分的影響 %，鮮重

表4 新型蠅蛆蛋白飼料替代魚粉對(duì)泥鰍血清中抗氧化指標(biāo)的影響

表5 新型蠅蛆蛋白飼料替代魚粉對(duì)泥鰍肝胰臟中抗氧化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 新型蠅蛆蛋白飼料替代魚粉對(duì)泥鰍生長(zhǎng)性能的影響 通過(guò)上述數(shù)據(jù)分析，新型蠅蛆蛋白飼料替代不同比例的魚粉后對(duì)泥鰍生長(zhǎng)性能有促進(jìn)作用。隨著新型蠅蛆蛋白飼料替代魚粉的比例增加，泥鰍生長(zhǎng)性能呈先上升后平穩(wěn)的趨勢(shì)；在本試驗(yàn)條件下，以WGR、SGR為評(píng)價(jià)指標(biāo)，新型蠅蛆蛋白飼料替代魚粉的最適宜比例為40%～60%，但本試驗(yàn)中即使全部替代魚粉組也未對(duì)泥鰍的生長(zhǎng)和飼料適口性產(chǎn)生負(fù)面影響。這可能是因?yàn)?，新型蠅蛆蛋白飼料是蠅蛆和益生菌共生發(fā)酵的蛋白原料，無(wú)抗?fàn)I養(yǎng)因子，蠅蛆本身的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值得以保留，且接近魚粉的各項(xiàng)營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)。

在本試驗(yàn)中，各處理組泥鰍的存活率均比較高，但分析數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，新型蠅蛆蛋白飼料按不同比例替代魚粉后提高了泥鰍的存活率。原因可能是新型蠅蛆蛋白飼料具有調(diào)節(jié)免疫機(jī)能的生命活性物質(zhì)（如抗菌肽、凝集素等），這些活性物質(zhì)提高了泥鰍機(jī)體的免疫力，從而提高了泥鰍的存活率，與喬永剛等（2012）利用蠅蛆蛋白提高黃鱔存活率的研究結(jié)果一致。

3.2 新型蠅蛆蛋白飼料替代魚粉對(duì)泥鰍肌肉成分的影響 本試驗(yàn)結(jié)果表明，新型蠅蛆蛋白飼料替代不同比例魚粉后對(duì)泥鰍肌肉的粗蛋白質(zhì)、灰分、水分和粗脂肪均無(wú)顯著影響。這在一定程度表明新型蠅蛆蛋白飼料替代魚粉后對(duì)泥鰍并無(wú)不良影響，可以在泥鰍生長(zhǎng)中放心使用。

在本試驗(yàn)中，隨著新型蠅蛆蛋白飼料替代魚粉比例的升高，泥鰍肌肉中水分有先升高后降低的趨勢(shì)，但各處理組間無(wú)限制差異（P＞0.05）。有研究表明，飼料蛋白源和飼料利用率會(huì)影響魚體水分含量（Yi等，2008）。出現(xiàn)本試驗(yàn)結(jié)果的原因可能是飼料利用率影響了泥鰍對(duì)飼料中水分的利用，這與本試驗(yàn)飼料系數(shù)結(jié)果一致，但還需進(jìn)一步研究具體機(jī)制。

在本試驗(yàn)中，隨著新型蠅蛆蛋白飼料替代魚粉比例的升高，泥鰍肌肉粗脂肪含量先升高后逐漸降低，但各試驗(yàn)組并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異?？赡茉蚴嵌嗖伙柡椭舅幔≒UFA）在新型蠅蛆蛋白飼料中含量不高，影響了泥鰍魚體粗脂肪的含量，同時(shí)飼料蛋白質(zhì)和脂肪含量及氨基酸均衡程度都會(huì)影響魚體中脂肪及脂肪酸的代謝。

3.3 新型蠅蛆蛋白飼料替代魚粉對(duì)泥鰍免疫性能的影響 本研究發(fā)現(xiàn)，隨著飼料中新型蠅蛆蛋白飼料替代魚粉的比例增加，泥鰍各組織中LZM、CAT和SOD活性呈先升高后降低的趨勢(shì)，而MDA含量則呈先降低后升高的趨勢(shì)；在本試驗(yàn)條件下，以抗氧化能力為評(píng)價(jià)指標(biāo)，替代魚粉的適宜比例為40%～60%。原因可能與新型蠅蛆蛋白飼料含有的蠅蛆殼聚糖、蠅蛆肽、凝集素等生命活性物質(zhì)提高了泥鰍免疫性能有關(guān)。

4 結(jié)論

綜上所述，新型蠅蛆蛋白飼料替代泥鰍飼料中的部分魚粉能有效提高泥鰍的生長(zhǎng)和免疫性能，是一種質(zhì)優(yōu)價(jià)廉的新型復(fù)合蠅蛆蛋白源。在本試驗(yàn)條件下，結(jié)合生長(zhǎng)性能、免疫力和飼料成本等評(píng)價(jià)指標(biāo)得出，泥鰍配合飼料中新型蠅蛆蛋白飼料替代魚粉的比例為60%最佳。