陳海霞,程靜,趙華
(南京醫(yī)科大學(xué)附屬無錫婦幼保健院病理科,江蘇 無錫 214002)
非特殊型浸潤性導(dǎo)管癌(invasive ductal carcinoma,not otherwise specified,IDC-NOS)是乳腺癌最主要的組織類型,其異質(zhì)性較高,進(jìn)一步對其分型及探索個(gè)性化治療方案具有重要意義。乳腺癌分子分型的基因檢測條件要求較高,難以普及,2011年St.Gallen會(huì)議達(dá)成共識(shí)[1],以免疫組化指標(biāo)對乳腺癌進(jìn)行近似的分子分型,根據(jù)ER、PR、HER-2、KI67 表達(dá)的不同將乳腺癌分為4 種亞型:①管腔A 型,ER 和(或)PR 陽性,HER-2 陰性、KI67 低表達(dá);②管腔B 型,ER+和(或)PR 陽性,HER-2 陰性,KI67 高表達(dá);ER+和(或)PR+,HER2+;③HER-2 過表達(dá)型,HER-2 陽性,ER 和PR 均為陰性;④三陰性乳腺癌,ER、PR、HER-2均為陰性。其中管腔A型預(yù)后較好,但有研究顯示,PR低表達(dá)較PR高表達(dá)的乳腺癌復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)更高,因此,St.Gallen 共識(shí)在2013[2]進(jìn)一步更新了分型方法,以PR≥20%為截點(diǎn),使部分管腔A 型病例歸類為管腔B型,且該類患者將重新規(guī)劃治療方案,加入化療或進(jìn)一步基因檢測。
雄激素受體(androgen,AR)作為類固醇受體家族,在乳腺癌中的作用受到廣泛關(guān)注,尤其在缺乏目標(biāo)蛋白(ER 或Her2)的三陰性乳腺癌中能否作為潛在的治療靶點(diǎn),也逐漸成為研究熱點(diǎn),但目前對AR的認(rèn)識(shí)遠(yuǎn)不如ER、PR充分。本研究擬對339例乳腺IDC-NOS采用上述方法對其進(jìn)行分子分型,以FISH方法檢測HER-2結(jié)果不明確的病例,旨在探討AR與乳腺癌臨床病理因子及分子分型的關(guān)系及意義,現(xiàn)報(bào)道如下。
1.1 臨床資料 選取2015年1月至2017年1月于南京醫(yī)科大學(xué)附屬無錫婦幼保健院行手術(shù)治療的339例乳腺癌患者作為研究對象,患者均經(jīng)免疫組化,必要時(shí)加以FISH檢測。所有患者均進(jìn)行改良根治手術(shù),術(shù)前未行放療、化療?;颊呔鶠榕裕挲g27~84歲,中位年齡53歲。收集患者臨床病理資料并進(jìn)行隨訪。本研究已通過醫(yī)院倫理委員會(huì)的審核批準(zhǔn)。
1.2 方法 所有標(biāo)本均經(jīng)10%中性福爾馬林固定,石蠟包埋,3 μm 切片,常規(guī)SP 法免疫組化染色。AR 單克隆抗體購自北京中杉公司,其余試劑均購自福州邁新公司。實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。
1.3 觀察指標(biāo) ER、PR、AR定位于細(xì)胞核,陽性為腫瘤細(xì)胞核陽性細(xì)胞數(shù)≥1%,KI67≥20%為高表達(dá),HER-2判斷標(biāo)準(zhǔn)按照《乳腺癌HER2檢測指南(2014版)》,對于HER-2不明確者,加以FISH檢測明確有無擴(kuò)增。分子分型采用2013年St.Gallen共識(shí),管腔A型:ER、PR均為陽性(PR>20%),HER-2陰性,KI67低表達(dá)。管腔B型:①ER和HER-2均為陽性,PR與ki67為任意值;②ER陽性,HER-2陰性,至少存在下面任意1個(gè)條件:PR陰性或低表達(dá)(<20%);ki67高表達(dá);HER-2過表達(dá)型:HER-2陽性,ER和PR均為陰性。三陰性乳腺癌:ER、PR、HER-2均為陰性。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)數(shù)資料用[n(%)]表示,比較采用χ2檢驗(yàn),相關(guān)性分析采用Spearman等級相關(guān)分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 乳腺IDC-NOS分子分型 管腔A型、管腔B型、HER-2過表達(dá)型、三陰性乳腺癌分別為75例(22.1%)、168例(49.6%)、43例(12.7%)、53例(15.6%)。
2.2 AR表達(dá)與乳腺IDC-NOS臨床病理參數(shù)的關(guān)系 AR在乳腺IDC-NOS廣泛表達(dá),339例中陽性303例,陽性率為89.4%。AR在組織學(xué)分級比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,組織學(xué)級別Ⅰ~Ⅱ級的AR陽性率為95%,而Ⅲ級AR陽性率為83%,AR陽性率隨著組織學(xué)級別的增高而降低;AR在年齡、絕經(jīng)與否、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管侵犯、臨床分期、腫瘤大小等比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見表1。
2.3 AR表達(dá)與免疫組化指標(biāo)及分子分型的關(guān)系 AR與ER、PR 呈正相關(guān)性(r=0.378、0.295,P<0.001),ER 陽性組AR 陽性率為96.7%,ER 陰性組AR 陽性率為70.8%,AR 與HER-2、KI67均無相關(guān)性,見表2。
AR 在管腔A 型、管腔B 型、HER-2 過表達(dá)型、三陰性乳腺癌的陽性率分別為97.3%、96.4%、88.4%、56.6%,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。AR在HER-2過表達(dá)型、管腔A型、管腔B型表達(dá)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,在三陰性乳腺癌陽性率較其他3型明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
表1 AR與臨床病理參數(shù)的關(guān)系比較(n=339)Table 1 Comparison of AR and clinicopathological parameters(n=339)
表2 AR表達(dá)與免疫組化指標(biāo)及分子分型的關(guān)系比較(n=339)Table 2 Relationship between AR expression and immunohistochemical markers and molecular typing(n=339)
乳腺癌是女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤,且異質(zhì)性大,在腫瘤進(jìn)展過程中有多種調(diào)節(jié)因子、信號通路相互作用,因此,需全面深入的研究,進(jìn)一步對其分型探索合理的聯(lián)合靶向治療方案。國內(nèi)目前絕大部分研究仍采用2011 年St.Gallen共識(shí)的分型方法,只有極少數(shù)研究采用了2013 版的分型方法。國內(nèi)有大樣本統(tǒng)計(jì)以2011年St.Gallen共識(shí)方法,即不考慮PR20%截點(diǎn),對3 586例乳腺癌進(jìn)行分類,管腔A型、管腔B型、HER-2過表達(dá)型、三陰性乳腺癌分別占比54.5%、16.6%、13.9%、14.9%[3]。本研究采用2013年St.Gallen共識(shí)方法分型,上述4型占比分別為22.1%、49.6%、12.7%、15.6%,且HER-2 過表達(dá)型和三陰性乳腺癌比例基本一致,但管腔A 型比例明顯下降,而管腔B型明顯增多。大多數(shù)St.Gallen專家組成員認(rèn)為管腔B型患者必須接受化療,并建議對其進(jìn)行多基因檢測,以提高化療敏感性,避免患者接受不必要的過度治療。
乳腺癌是一種與激素有關(guān)的腫瘤,AR 信號在乳腺癌中發(fā)揮重要作用。然而,但AR在乳腺癌的預(yù)后作用爭議較大,有顯示預(yù)后較好,有顯示預(yù)后不佳,還有顯示無預(yù)后意義。本研究結(jié)果顯示,AR在乳腺癌廣泛表達(dá),總陽性率為89.4%,并與類固醇激素呈正相關(guān),ER陽性組、陰性組AR陽性率分別為96.7%、70.8%,與文獻(xiàn)[4]報(bào)道結(jié)果相似。本研究結(jié)果還顯示AR 陽性率還與組織學(xué)分級相關(guān),隨著組織學(xué)級別的增高而降低,說明在腫瘤侵襲性增強(qiáng)時(shí)AR 表達(dá)量下調(diào)。AR 的作用可能取決于癌細(xì)胞的類型和其他伴隨的類固醇激素受體的存在,準(zhǔn)確了解AR 在乳癌中的作用機(jī)制仍是具有挑戰(zhàn)性的難題。AR在ER陽性的乳腺癌中既可刺激也可抑制細(xì)胞增殖,還可促進(jìn)轉(zhuǎn)移或增加耐藥性,這些相反的作用可能依賴于大量與AR相互作用的蛋白質(zhì)。有研究表明,AR在ER陽性的乳腺癌可競爭性結(jié)合雌激素反應(yīng)元件,降低雌激素的增殖作用,從而誘導(dǎo)抗增殖作用;相反,ER 也可與雄激素反應(yīng)元件結(jié)合,從而取得相反的效果[5]。還有研究表明,AR 與乳腺癌的耐藥性有關(guān),在幾份耐他莫昔芬乳腺癌標(biāo)本中,發(fā)現(xiàn)ERmRNA 含量較低,ARmRNA 水平較高,用抗雄激素Casodex 治療可改善療效,表明AR 信號直接參與作用[6]。AR 還與ER 陽性的乳腺癌芳香化酶抑制劑(AI)的耐藥有關(guān)[7]。在ER和PR陰性的乳腺癌,AR 可能對細(xì)胞生長有抑制作用。在三陰性乳腺癌中,AR 可能通過EGFR、PDGR 和PI3K/AKT 信號通路參與癌變過程[8]。在HER-2 陽性腫瘤中,AR 可激活Wnt/βcatenin通路,引起HER-3上調(diào),從而在乳腺癌的發(fā)生中發(fā)揮一定作用;通過HER-2/HER-3 異源二聚體,AR 可引起PI3K/AKT 通路的激活,并可能通過MYC 誘導(dǎo)細(xì)胞增殖[8]。表明將AR作為乳腺癌的聯(lián)合治療靶點(diǎn),具有潛在的可開發(fā)性。
鑒于AR會(huì)引發(fā)較多不良反應(yīng)[9],近年來,試驗(yàn)治療ER陽性的晚期乳腺癌考慮使用不良反應(yīng)較小的選擇性AR調(diào)解因子(enobosarm GTx-024,SARMS)[10],目前已用于ER陽性的乳腺癌的Ⅱ期臨床試驗(yàn)中。對晚期BC(耐他莫昔芬的乳癌和三陰性乳腺癌)使用AR拮抗劑,如第一代和第二代AR拮抗劑比卡魯胺和氮雜拉塔胺[6,11],均已用于臨床試驗(yàn)[12]。其他治療三陰性乳腺癌的方法是基于CYP17A1抑制劑的使用,如醋酸abiraterone 和seviteronel,這些抑制劑降低雄激素的產(chǎn)生,目前也正在臨床試驗(yàn)中[13]。
綜上所述,乳腺癌是一種高度異質(zhì)性疾病,需對其精準(zhǔn)分子分型,探索合理的聯(lián)合靶向治療方案。本研究顯示,AR在管腔A型、管腔B型及HER-2過表達(dá)型廣泛表達(dá),陽性率高達(dá)88.4%~97.3%,在三陰性乳腺癌的陽性率為56.6%,在AR陽性的乳腺癌尤其是缺乏治療靶點(diǎn)的三陰性乳腺癌,AR 有望成為有效的聯(lián)合治療靶點(diǎn)。