張正敏 蘆春蓮 李 尚 曹洪戰(zhàn) 趙玉萍 李 佳
(河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,保定071001)
隨著動(dòng)物飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)朝著精準(zhǔn)化、動(dòng)態(tài)化改進(jìn),動(dòng)物各個(gè)生理階段需要不同飼糧配方,為了達(dá)到這個(gè)目的需要精確了解動(dòng)物機(jī)體的生物節(jié)律。地球上大部分動(dòng)物的生理節(jié)律分為2個(gè)部分:一部分是活動(dòng)期,另一部分是睡眠期?;顒?dòng)期間主要以活動(dòng)和采食為主,睡眠期間主要以睡眠和禁食為主,活動(dòng)/采食和睡覺(jué)/禁食運(yùn)行24 h形成晝夜節(jié)律[1-2]。哺乳動(dòng)物機(jī)體的體溫、血壓、激素、機(jī)體氧化等都隨著白天和黑夜的交替而發(fā)生變化,呈現(xiàn)出特有的晝夜節(jié)律[3]。生物節(jié)律影響機(jī)體能量代謝,即1 d采食相同能量,營(yíng)養(yǎng)代謝受采食時(shí)間的影響[4]。Gao等[5]早、晚采用不同鈣量交替飼喂母豬,研究表明每天攝入相同鈣量,與對(duì)照組相比,早高晚低組母豬血清總甘油三酯(TG)和臍帶血高密度脂蛋白(HDL)含量顯著提高。動(dòng)物機(jī)體的消化代謝是一個(gè)十分復(fù)雜的動(dòng)態(tài)變化過(guò)程。研究表明,小鼠夜晚是活動(dòng)期,夜晚開(kāi)始活動(dòng)時(shí),體內(nèi)糖原儲(chǔ)備較少對(duì)碳水化合物的需求增加,早晨活動(dòng)期結(jié)束后,對(duì)蛋白質(zhì)和碳水化合物的攝取多于脂肪,生物節(jié)律在睡眠期時(shí)營(yíng)養(yǎng)需求偏向于脂肪的攝取,進(jìn)入活動(dòng)期偏向于對(duì)糖原的攝取[6-7]。
精準(zhǔn)飼喂需要精確了解動(dòng)物機(jī)體的生物節(jié)律,在適宜的飼糧營(yíng)養(yǎng)條件下,一定程度上可以提高飼料轉(zhuǎn)化率、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、提高畜牧生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)效益。目前,國(guó)外關(guān)于生物節(jié)律對(duì)飼糧營(yíng)養(yǎng)水平的影響在小鼠中研究較為廣泛,關(guān)于生物節(jié)律影響飼糧營(yíng)養(yǎng)水平在豬上的研究相對(duì)較少。因此,本試驗(yàn)擬通過(guò)不同能量和蛋白質(zhì)水平飼糧交替飼喂,研究其對(duì)妊娠母豬繁殖性能、血漿激素含量及抗氧化指標(biāo)的影響,旨在為動(dòng)態(tài)飼喂模式對(duì)妊娠母豬繁殖性能的研究積累資料,為精準(zhǔn)飼喂提供可靠參考數(shù)據(jù)。
試驗(yàn)豬來(lái)自中國(guó)內(nèi)蒙古自治區(qū)某種豬場(chǎng)。選取2胎、體重相近的加系大白母豬48頭,隨機(jī)分為3組,每組16個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)1頭母豬,單欄飼養(yǎng)。豬場(chǎng)采用全進(jìn)全出式管理模式。母豬采用人工輸精,配種2次,完成配種30 d后轉(zhuǎn)入妊娠舍。妊娠第105天轉(zhuǎn)入分娩舍。每天05:30、14:30分別飼喂1次,對(duì)照組和試驗(yàn)組每日攝取的能量和蛋白質(zhì)水平盡量一致,自由飲水,消毒、衛(wèi)生防疫和日常管理按照試驗(yàn)豬場(chǎng)日常規(guī)范進(jìn)行操作。
飼糧參照NRC(2012)豬營(yíng)養(yǎng)需要與《豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 65—2004)配制。整個(gè)妊娠期分為2個(gè)階段:妊娠前期(0~90 d)、妊娠后期(91 d至產(chǎn)仔),共配制6種試驗(yàn)飼糧。妊娠前期試驗(yàn)飼糧:低能量低蛋白質(zhì)水平飼糧(12.54 MJ/kg、15.55%)、中能量中蛋白質(zhì)水平飼糧(13.27 MJ/kg、16.47%)、高能量高蛋白質(zhì)水平飼糧(13.44 MJ/kg、17.86%);妊娠后期試驗(yàn)飼糧:低能量低蛋白質(zhì)水平飼糧(12.73 MJ/kg、15.96%)、中能量中蛋白質(zhì)水平飼糧(13.27 MJ/kg、16.47%)、高能量高蛋白質(zhì)水平飼糧(13.84 MJ/kg、18.13%)。基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平分別見(jiàn)表1和表2。
表1 妊娠前期基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
續(xù)表1項(xiàng)目Items飼糧 Diets低能量低蛋白質(zhì) Low energyand low protein中能量中蛋白質(zhì)Medium energy and medium protein高能量高蛋白質(zhì)High energy and high protein營(yíng)養(yǎng)水平 Nutrient levels2)消化能 DE/(MJ/kg)12.5413.2713.44粗蛋白質(zhì) CP15.5516.4717.86賴氨酸 Lys0.981.001.01蛋氨酸 Met0.300.310.32蘇氨酸 Thr0.690.740.80鈣 Ca0.860.910.93總磷 TP0.570.520.51
表2 妊娠后期基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
對(duì)照組早上飼喂中能量中蛋白質(zhì)水平飼糧,下午飼喂中能量中蛋白質(zhì)水平飼糧;試驗(yàn)Ⅰ組早上飼喂低能量低蛋白質(zhì)水平飼糧,下午飼喂高能量高蛋白質(zhì)水平飼糧;試驗(yàn)Ⅱ組早上飼喂高能量高蛋白質(zhì)水平飼糧,下午飼喂低能量低蛋白質(zhì)水平飼糧。妊娠前期中能量中蛋白質(zhì)水平飼糧每次飼喂1.125 kg,低能量低蛋白質(zhì)水平飼糧每次飼喂1.150 kg,高能量高蛋白質(zhì)水平飼糧每次飼喂1.140 kg;妊娠后期中能量中蛋白質(zhì)水平飼糧每次飼喂1.805 kg,低能量低蛋白質(zhì)水平飼糧每次飼喂1.800 kg,高能量高蛋白質(zhì)水平飼糧每次飼喂1.800 kg。試驗(yàn)期114 d。
1.4.1 生長(zhǎng)性能和繁殖性能
記錄試驗(yàn)?zāi)肛i妊娠0、25、35、90、105 d的體重,計(jì)算平均日增重,同時(shí)使用運(yùn)高背膘儀(Rencourage,Lean-meter)測(cè)定背膘厚,每頭測(cè)3次取平均值,測(cè)定部位為最后1根肋骨向上距離背中線6.5 cm(P2),待儀器讀數(shù)穩(wěn)定后記錄;母豬分娩當(dāng)天記錄總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、健仔數(shù)(>1 kg);產(chǎn)后4 h內(nèi)記錄初生窩重、初生個(gè)體重。
1.4.2 血漿激素含量和抗氧化指標(biāo)
早晨飼喂前采血,于妊娠35、80和105 d,每組選取6頭母豬進(jìn)行前腔靜脈采血各2管,分裝于放有抗凝劑的乙二胺四乙酸(EDTA)離心管和肝素鈉離心管中,室溫靜置1 h,在3 000 r/min條件下離心10 min,分離上清液,-20 ℃條件下保存,待檢測(cè)妊娠35、80和105 d的血漿指標(biāo)??寡趸笜?biāo)測(cè)定所用試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所,瘦素(LEP)和胰島素樣生長(zhǎng)因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)含量測(cè)定所用試劑盒購(gòu)自上海酶聯(lián)生物科技有限公司。
利用Excel 2007對(duì)所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步整理,應(yīng)用SPSS 21.0軟件分別進(jìn)行單因素方差分析及Duncan氏法多重比較檢驗(yàn),數(shù)據(jù)均采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示,以P<0.05為差異顯著判斷標(biāo)準(zhǔn),P<0.01為差異極顯著判斷標(biāo)準(zhǔn)。
如表3所示,試驗(yàn)組與對(duì)照組之間背膘厚無(wú)顯著差異(P>0.05);與試驗(yàn)Ⅰ組相比,對(duì)照組妊娠36~90 d平均日增重降低,差異極顯著(P<0.01),試驗(yàn)Ⅱ組也顯著降低(P<0.05)。
表3 不同能量和蛋白質(zhì)水平飼糧交替飼喂對(duì)妊娠母豬生長(zhǎng)性能的影響
如表4所示,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)Ⅰ組總產(chǎn)仔數(shù)提高14.79%(P>0.05),試驗(yàn)Ⅱ組提高4.73%(P>0.05),試驗(yàn)Ⅰ組總產(chǎn)仔數(shù)高于試驗(yàn)Ⅱ組9.68%(P>0.05);試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅱ組產(chǎn)活仔數(shù)較對(duì)照組分別提高了9.48%和4.74%(P>0.05)。各組間健仔數(shù)、初生窩重、初生個(gè)體均重?zé)o顯著差異
(P>0.05)。
表4 不同能量和蛋白質(zhì)水平飼糧交替飼喂對(duì)妊娠母豬繁殖性能的影響
如表5所示,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)Ⅰ組妊娠80 d的血漿LEP含量顯著升高(P<0.05);試驗(yàn)組妊娠105 d的血漿IGF-Ⅰ含量極顯著低于對(duì)照組(P<0.01)。
表5 不同能量和蛋白質(zhì)水平飼糧交替飼喂對(duì)妊娠母豬血漿激素含量的影響
如表6所示,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)Ⅰ組妊娠35 d血漿CAT活性顯著升高(P<0.05),試驗(yàn)Ⅰ組妊娠80 d血漿CAT活性極顯著升高(P<0.01),且試驗(yàn)Ⅰ組較試驗(yàn)Ⅱ組顯著升高(P<0.05);與對(duì)照組相比,試驗(yàn)Ⅱ組妊娠80 d血漿MDA含量極顯著降低(P<0.01),試驗(yàn)Ⅰ組妊娠35 d血漿MDA含量極顯著高于試驗(yàn)Ⅱ組(P<0.01)。
研究表明,晝夜節(jié)律在調(diào)節(jié)代謝、維持能量平衡和體重方面起著重要作用,且腸道微生物對(duì)機(jī)體消化代謝與生物鐘之間相互作用、相互影響[8-9]。在本試驗(yàn)中,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)Ⅰ組妊娠36~90 d的平均日增重顯著提高,一方面因?yàn)樨i腸道微生物菌群呈現(xiàn)生物節(jié)律性的消化和吸收,刺激腸道的消化和吸收,影響代謝平衡[10-11];另一方面因?yàn)樨i早、中、晚對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)需求不同,使機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收有差異,腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收也呈現(xiàn)生物節(jié)律,碳水化合物和蛋白質(zhì)在小腸水解,水解產(chǎn)物通過(guò)內(nèi)膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白吸收,而這些轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的基因表達(dá)受生物鐘基因調(diào)控,葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLUT2)、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5(GLUT5)在夜間顯示峰值的表達(dá)[12-13]。在機(jī)體脂肪消化代謝的生物節(jié)律調(diào)控下,試驗(yàn)Ⅰ組早上低能量低蛋白質(zhì)水平飼糧,下午高能量高蛋白質(zhì)水平飼糧更符合機(jī)體脂肪和蛋白質(zhì)的沉積。本試驗(yàn)動(dòng)態(tài)飼喂模式較常規(guī)飼喂模式效果更優(yōu),可能是統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)的飼糧會(huì)造成營(yíng)養(yǎng)吸收利用不充分,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之間的相互轉(zhuǎn)化而造成的蛋白質(zhì)和能量物質(zhì)的額外消耗增加,使機(jī)體能量、蛋白質(zhì)、脂肪儲(chǔ)存減少[14-15]。在本試驗(yàn)中,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅱ組的健仔數(shù)分別提高1.06、0.94頭;且試驗(yàn)Ⅰ組總產(chǎn)仔數(shù)高于對(duì)照組,產(chǎn)活仔數(shù)高于對(duì)照組1.38頭。這說(shuō)明在改善母豬繁殖性能方面,試驗(yàn)Ⅰ組效果相對(duì)更好。這可能是因?yàn)樯锕?jié)律調(diào)節(jié)IGF-Ⅰ和LEP的分泌,刺激母豬胎盤發(fā)育,為胎兒生長(zhǎng)提供了優(yōu)良場(chǎng)所[16],試驗(yàn)組妊娠母豬在動(dòng)態(tài)飼喂下對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收增加,胎盤對(duì)母體攝取升高,胎兒獲取的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充足,健仔數(shù)升高[17]。研究發(fā)現(xiàn),生物鐘基因(CLOCK)突變導(dǎo)致小鼠在正常光照下比正常野生小鼠生育能力略有下降,生物節(jié)律對(duì)調(diào)節(jié)生育能力有重要作用[18]。
表6 不同能量和蛋白質(zhì)水平飼糧交替飼喂對(duì)妊娠母豬血漿抗氧化指標(biāo)的影響
激素分泌的日常節(jié)律受晝夜節(jié)律系統(tǒng)控制,受下丘腦視交叉上核(SCN)的主時(shí)鐘以及大腦和周圍器官的許多輔助時(shí)鐘調(diào)節(jié),下丘腦調(diào)控了激素的釋放[19]。IGF-Ⅰ是機(jī)體調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)、卵母細(xì)胞成熟、胚胎發(fā)育的重要因子[20]。LEP作為一種多效激素,參與機(jī)體繁殖性能、維持機(jī)體免疫系統(tǒng)的動(dòng)態(tài)平衡[21-22]。IGF-Ⅰ與生物鐘之間互作,IGF-Ⅰ可以重置肝臟生物鐘;LEP受晝夜節(jié)律的調(diào)控,夜間分泌比白天多[23]。在本試驗(yàn)中,試驗(yàn)組妊娠105 d的血漿IGF-Ⅰ含量低于對(duì)照組。試驗(yàn)Ⅰ組妊娠80 d的血漿LEP含量高于對(duì)照組。推測(cè)原因可能是IGF-Ⅰ重置肝臟生物鐘,肝臟生物鐘調(diào)節(jié)了胰島素分泌,增加了糖原的去路,機(jī)體通過(guò)糖原轉(zhuǎn)化為脂質(zhì)儲(chǔ)存起來(lái),試驗(yàn)組體重增加。試驗(yàn)Ⅰ組妊娠80 d的血漿LEP含量高于對(duì)照組,這說(shuō)明動(dòng)態(tài)飼喂受生物節(jié)律的調(diào)節(jié),LEP夜間分泌高于白天。此外,由于1 d中各時(shí)間段營(yíng)養(yǎng)變化也會(huì)在一定程度上影響外周節(jié)律的表達(dá),進(jìn)而通過(guò)時(shí)鐘系統(tǒng)影響機(jī)體激素的分泌,具體原因還有待進(jìn)一步研究。
在本試驗(yàn)中,試驗(yàn)Ⅰ組妊娠35和80 d的血漿CAT含量顯著高于對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅱ組,試驗(yàn)Ⅱ組妊娠35和80 d的血漿MDA含量均低于試驗(yàn)Ⅰ組,推測(cè)可能是交替飼喂模式影響了妊娠母豬抗氧化能力,一方面是因?yàn)闄C(jī)體產(chǎn)生的抗氧化劑和酶的表達(dá)可以通過(guò)晝夜節(jié)律調(diào)控[24-25],已知由活性氧(ROS)和抗氧化劑產(chǎn)生的氧化還原狀態(tài)擾動(dòng)會(huì)影響許多基因的表達(dá)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,琥珀酸氧化輔因子(NAD)、琥珀酸還原輔因子(NADP)都調(diào)節(jié)視交叉上核(SCN)中的時(shí)鐘基因活性,并被其誘導(dǎo)[26];另一方面可能是因?yàn)樵囼?yàn)Ⅱ組采血前1天下午飼喂低能量低蛋白質(zhì)水平飼糧,機(jī)體脂質(zhì)發(fā)生過(guò)氧化反應(yīng)較少,血漿MDA含量隨之降低,CAT活性升高,減輕ROS物質(zhì)對(duì)機(jī)體細(xì)胞的損傷[27]。研究發(fā)現(xiàn),小鼠在連續(xù)黑暗環(huán)境下,氧化應(yīng)激低于對(duì)照組,晝夜節(jié)律刺激氧化應(yīng)激[28]。
本試驗(yàn)結(jié)果表明,不同能量和蛋白質(zhì)水平飼糧交替飼喂可以有效提高妊娠母豬的生長(zhǎng)及繁殖性能,影響部分血液生理生化指標(biāo)的水平,且早上飼喂低能量低蛋白質(zhì)水平飼糧、下午飼喂高能量高蛋白質(zhì)水平飼糧的模式相對(duì)更優(yōu)。