謝永廣，張進，王懷昕，羅華輝，魏朝宇，鐘光躍，陳敦學

（1.貴州大學動物科學學院/貴州大學漁業(yè)資源與環(huán)境研究中心，貴州 貴陽 550025；2.清遠市現(xiàn)代棘胸蛙良種研究中心，廣東 清遠 513000；3.遵義市農科院，貴州 遵義 563100；4.四川省內江市農業(yè)科學院，四川 內江 642000）

棘胸蛙（Quasipaa spinosa）又名石蛙、棘蛙，是一種重要的兩棲類經濟動物。蝌蚪期是其生長周期中的重要階段，研究蝌蚪期的生長對提高棘胸蛙的養(yǎng)殖產出具有重要意義。營養(yǎng)組成是蝌蚪成活率的限制因子，同時也影響蝌蚪變態(tài)和幼蛙成活率[1]；投喂頻率是影響水產動物生長速度的重要因子，不合理的投喂頻率會降低水產動物的生長速度或者降低飼料利用率，進而造成養(yǎng)殖成本上升與養(yǎng)殖環(huán)境惡化[2]。改進飼料配方和投喂頻率，是實現(xiàn)棘胸蛙養(yǎng)殖“節(jié)本增效”的有效手段。

飼料中蛋白營養(yǎng)水平會顯著影響蛙類的生長，飼料中添加動物性蛋白飼料會促進蛙類生長和提高變態(tài)存活率[3-6]。王鵬倞發(fā)現(xiàn)棘胸蛙蝌蚪飼料中，蛋白質種類多，蛋白比例相對平衡，會促進蝌蚪對蛋白的吸收，使其具有較快的生長速度[7]。肖調義等認為動物性飼料能加速蝌蚪發(fā)育，植物性飼料則能延緩蝌蚪的變態(tài)，因此在不同的階段需要使用不同的飼料，以確保蝌蚪養(yǎng)殖效益[8]。關于飼料投喂頻率對水產動物影響的研究已經有較多報道[9-11]，例如卵形鯧鲹的生長率就與飼料投飼頻率呈正相關，并在投飼頻率達到3 次/d 時達到最佳生長效率[12]，點籃子魚隨著投喂頻率由1 次增加到4 次時，其特定增長率也顯著增加[13]。不同的養(yǎng)殖品種有不同的最佳投飼頻率，該研究將結合投飼頻率和飼料營養(yǎng)水平對棘胸蛙蝌蚪生長的影響，摸索出適合養(yǎng)殖蝌蚪的飼喂模式和符合蝌蚪營養(yǎng)水平的飼料，從而解決了棘胸蛙蝌蚪飼養(yǎng)關鍵基礎瓶頸，對棘胸蛙的推廣養(yǎng)殖具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 試驗動物來源與養(yǎng)殖設施

試驗所需棘胸蛙來自英德市盈信農業(yè)有限公司生態(tài)石蛙養(yǎng)殖基地，選取3 齡以上，體質量220 g左右的棘胸蛙作為試驗親本，進行抱對產卵，將蛙卵集中孵化后，選取個體大小一致（平均6～9 mm）的蝌蚪（8 100 尾）進行分組試驗。蝌蚪落池3 d 后開始攝食。試驗所用養(yǎng)殖池為3 m×3 m×1 m 的水泥池，池子底部呈“鍋底型”且中間開孔布置紗布網，用于池底排污。養(yǎng)殖池采用射水式進行增氧，確保水體溶解氧≥5.0 mg/L，遮光率60%，池內水深固定在15 cm，放置60 cm×60 cm 的瓷片一塊，供蝌蚪躲藏。

1.2 試驗設計與飼料配比

將試驗所用8 100 尾蝌蚪隨機分為A、B、C 3組，每組3 個平行池，每池900 尾，水溫22 ℃，按照每天兩次（8：00 和19：00）進行投喂（蝌蚪體質量的5%進行投喂），各種飼料配比與營養(yǎng)成分詳見表1。

表1 飼料主要營養(yǎng)成分與營養(yǎng)水平

1.3 試驗投喂方式設置

選取A 組飼料配方進行投喂頻率試驗，設置不同的投喂頻率，分別為每日投喂2 次、3 次、4 次、5次，標記為D、E、F、G 組，該4 組按照“四定原則”進行投喂，日投喂量為蝌蚪體質量的5%。

1.4 蝌蚪生長發(fā)育測量

利用人工孵化的同一批棘胸蛙蝌蚪在養(yǎng)殖基地水泥池中飼養(yǎng)，每隔10 d 隨機撈取池中30 尾測量相關數(shù)據(jù)。用游標卡尺記錄蝌蚪的全長（自吻端至尾端的長度），長度精確到0.01 cm，利用分析天平測定蝌蚪的體質量，精確到0.01 g。試驗期間每天記錄攝食與死亡情況。體質量采用電子天平進行稱重，對測量結果利用SPSS16.0 軟件進行統(tǒng)計分析。

2 結果與分析

2.1 不同飼料對棘胸蛙蝌蚪規(guī)格的影響

A、B、C 3 種飼料營養(yǎng)配方對棘胸蛙蝌蚪體長與體質量的影響見表2。其中A 組飼料（自配，總蛋白含量39%）具有最好的生長速率，70 d 時，體長（7.80±0.19）cm 與體質量（1.92±0.12）g 顯著高于B組（總蛋白含量47%）和C 組（購買商品飼料，總蛋白含量48%），說明在蝌蚪生長過程中，并非蛋白含量越高越好，更加需要氨基酸及微量元素平衡，同時A 組飼料中添加了蟲酵蛋白（13.8%）和黃粉蟲砂（2%）可能對蝌蚪生長具有重要意義。

表2 不同飼料配方對棘胸蛙蝌蚪苗種規(guī)格的影響

2.2 不同飼料對蝌蚪變態(tài)成活率的影響

A、B、C 3 種飼料對飼喂的棘胸蛙蝌蚪變態(tài)成活率也有明顯影響，結果見表3。其中A 組變態(tài)成活率最高，100 d 時達到95%的變態(tài)成活率，顯著高于B 組和C 組，同時A 組在飼養(yǎng)70 d 時，出現(xiàn)較為規(guī)整的變態(tài)率（90%），便于養(yǎng)殖管理與后續(xù)幼蛙分池，因此我們認為A 組配合飼料具有最好的養(yǎng)殖效果。

表3 不同飼料配方飼養(yǎng)蝌蚪變態(tài)率統(tǒng)計

2.3 不同投喂頻率對蝌蚪生長的影響

根據(jù)前期結果，作者選用A 組飼料進行投喂頻率試驗，試驗結果見表4，投喂2 次/d、3 次/d、4 次/d、5 次/d 蝌蚪體質量增長差異不具統(tǒng)計學意義，其中投喂4 次/d 和5 次/d 蝌蚪體質量略有增加，且70 d 變態(tài)率也有提高，但是綜合考慮投入成本，建議以投喂2 次/d 為最優(yōu)，可以達到最大投入產出比。

在20—30 d 階段，蝌蚪體長增長相對較慢，30 d 后體長增長明顯加快，直到開始長出后腿為止。有研究報道，蝌蚪在生長過程中有生長停滯的現(xiàn)象，認為是蝌蚪在儲藏能量，為變態(tài)作準備。該試驗也發(fā)現(xiàn)類似的現(xiàn)象，即在20—30 d 階段，蝌蚪的體長增長幾乎停滯或者生長緩慢，然而體質量增長并沒有減慢（見圖1），說明在該階段蝌蚪主要是體質量增長。

表4 不同投喂頻率下，棘胸蛙蝌蚪體長體質量增長情況

2.4 棘胸蛙蝌蚪生長曲線

以A 組飼料為標準飼料，以投喂頻率為2 次/d，每隔10 d 每個池隨機選取30 尾蝌蚪，測量體長和體質量。構建棘胸蛙蝌蚪的生長曲線，見圖2，得到體質量（Y）與體長（X）的關系滿足：Y=0.0054 X0.3131（R2=0.97），通過該關系式可知蝌蚪的生長屬于等速生長。利用該關系式可以用來預測和檢驗人工養(yǎng)殖棘胸蛙蝌蚪的生長。例如蝌蚪營養(yǎng)不良，測量數(shù)據(jù)會偏離預測值。

3 討論

3.1 不同營養(yǎng)水平對棘胸蛙蝌蚪生長的影響

在規(guī)?；B(yǎng)殖生產中，為了促進蝌蚪苗的快速生長發(fā)育，就必須保證飼料當中蛋白質的適宜含量。不少研究認為蝌蚪飼料中，蛋白含量高，會促進生長[15-16]，李新紅等[4]研究不同營養(yǎng)結構的飼料對中國林蛙生長發(fā)育的影響，認為動物性飼料比例大，蛋白含量高，蝌蚪發(fā)育會加快，完成變態(tài)所需時間短，而在植物性飼料中添加一定的動物性飼料，會使蝌蚪變態(tài)后的幼蛙個體較大, 體質健壯。肖調義等[8]在研究棘胸蛙蝌蚪的變態(tài)發(fā)育過程中，也認為動物性餌料能加速蝌蚪的變態(tài)發(fā)育, 植物性餌料則能延緩蝌蚪的變態(tài)[17-18]。然而并不是動物性蛋白含量越高越好[19]，一方面需要考慮養(yǎng)殖經濟效益，另一方面蝌蚪的生長速度及代謝機能也是有限的，倘若蛋白水平太高，不但不能促進機體的生長發(fā)育，反而影響機體的正常代謝，飼養(yǎng)效率降低，嚴重時甚至導致動物中毒，再加上飼料原料成本較高，致使整個養(yǎng)殖生產經濟效益降低。在該試驗中，A 組飼料蛋白含量（39%）和動物蛋白比例（60%）均低于B組，其70 d 時生長性能（體長、體質量）均顯著高于B 組，且變態(tài)成活率也高于B 組和C 組，且變態(tài)更加規(guī)整，便于管理，因此我們認為棘胸蛙蝌蚪生長不僅僅與蛋白含量（動物蛋白比例）相關，更大程度上取決于氨基酸以及微量元素的平衡。

3.2 不同投喂頻率對棘胸蛙蝌蚪生長的影響

在水產動物的人工養(yǎng)殖過程中，確定適宜的投喂頻率對于提高養(yǎng)殖品種的生長速度、存活率[20]以及減少飼料浪費，提高養(yǎng)殖個體規(guī)格規(guī)整度[21]具有重要意義。然而最適的投喂頻率因養(yǎng)殖品種差異而不同。Andrews 等[22]發(fā)現(xiàn)每天投喂2 次，斑點叉尾的生長率和飼料轉化率最好。Eglal 和Gunther[23]發(fā)現(xiàn)鏡鯉最適飼喂頻率為4～6 次/d。目前主要有兩種理論：一是隨著投飼頻率增加，水產動物飼料轉化效率與蛋白保留率均上升；二是水產動物生長率主要受攝食率的影響。謝全森等[24]研究泥鰍投喂頻率時，發(fā)現(xiàn)投喂頻率從2 次/d 到4 次/d，泥鰍的增重率顯著提高，從4 次/d 到6 次/d，泥鰍的增重率有所提高但沒有特別大的差異。周歧存研究南美白對蝦時，提高投喂頻率，對蝦的生長反而出現(xiàn)下降的勢頭。姜建湖等[25]研究青魚幼魚投喂頻率從1 次/d到3 次/d 時，青魚生長率顯著增加，進一步提高投喂頻率，生長差異不具統(tǒng)計學意義，因此確定青魚最適投喂頻率是3 次/d。在該研究中，隨著投喂頻率從2 次/d 增加到5 次/d，生長率和變態(tài)成活率有所提高，但是沒有統(tǒng)計學意義差異，考慮飼料和人工成本，我們推薦2 次/d 為最佳投喂頻率。