焉秀章，夏文龍，夏俊偉,張海山

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 胃腸外科，吉林 長(zhǎng)春130033)

結(jié)直腸癌(CRC)是目前消化系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，近年來(lái)結(jié)直腸癌的發(fā)病率逐年上升，結(jié)直腸癌的高發(fā)病率、死亡率嚴(yán)重影響著人類的健康[1]。而與結(jié)直腸癌相關(guān)的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路有多條，如Wnt/β-catenin信號(hào)通路、TGF-β/Smads信號(hào)通路、Hedgehog信號(hào)通路等，其中Wnt 通路的異常激活是導(dǎo)致結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展的主要原因。研究顯示，在結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)及相關(guān)治療的過(guò)程中，Wnt/β-catenin信號(hào)通路的異常激活起到了重要作用，大部分結(jié)直腸癌存在Wnt/β-catenin信號(hào)通路的異常激活[2]。Wnt信號(hào)通路可分為經(jīng)典通路和非經(jīng)典通路,其中Wnt經(jīng)典通路，即Wnt/β-catenin 信號(hào)通路目前研究較為深入。本文對(duì)Wnt/β-catenin 信號(hào)通路與結(jié)直腸癌關(guān)系的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路的成員及其轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程

1.1 Wnt經(jīng)典信號(hào)通路的主要成員

Wnt經(jīng)典信號(hào)通路的主要成員包括Wnt家族分泌蛋白(Wnt)，包括腺瘤息肉病大腸桿菌蛋白(adenomatous polyposis coli,APC)、支架蛋白(Axin)、β-連環(huán)蛋白(β-catenin)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、卷曲家族跨膜受體蛋白(frizzled,Frz)、輔助受體低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5/6(low density lipoprotein receptorrelated protein 5/6,LRP5/6)、細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的松散蛋白(Dishevelled,Dsh)、酪蛋白激酶1(carsein kinase,CK1)、T細(xì)胞因子/淋巴增強(qiáng)因子(Tcellfactor/lymphoid enhance factor,TCF/LEF)家族轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子等。

1.2 Wnt經(jīng)典信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程

Wnt/β-catenin 經(jīng)典通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程為：當(dāng)細(xì)胞膜外的Wnt家族分泌蛋白作為配體與Frizzled(Fz)家族受體的氨基末端結(jié)合時(shí)，Wnt信號(hào)開(kāi)始。Frizzled(Fz)家族受體與相應(yīng)配體結(jié)合后反復(fù)跨越質(zhì)膜7次，從而形成了G蛋白偶聯(lián)受體家族(GPCR)，使得胞內(nèi)的Dsh蛋白磷酸化,并與β-catenin 降解復(fù)合體(主要由GSK-3β、Axin、APC組成)中的Axin結(jié)合并破壞其結(jié)構(gòu)。β-catenin降解復(fù)合體的功能是泛素化β-catenin蛋白并將其初步分解破壞其結(jié)構(gòu)，并將其送入胞內(nèi)溶酶體進(jìn)行進(jìn)一步消化。Wnt /β-catenin 經(jīng)典通路中β-catenin 降解復(fù)合體的破壞使細(xì)胞分解β-catenin 的能力大大下降，從而提高了細(xì)胞內(nèi)β-catenin濃度。β-catenin 在胞質(zhì)中積累達(dá)到一定濃度后轉(zhuǎn)位進(jìn)入細(xì)胞核并與T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子/淋巴樣增強(qiáng)因子(TCF/LEF)作用，誘導(dǎo)Wnt最終作用的目標(biāo)基因轉(zhuǎn)錄，誘導(dǎo)后續(xù)細(xì)胞反應(yīng)的發(fā)生，進(jìn)而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。

2 Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路與結(jié)直腸癌的關(guān)系

Wnt經(jīng)典信號(hào)通路參與了許多哺乳動(dòng)物的重要生理過(guò)程，如人類胚胎的形成、分化及增殖都與該通路的精確調(diào)控密切相關(guān)。但該通路的異常激活會(huì)導(dǎo)致腺瘤甚至結(jié)直腸癌的發(fā)生及發(fā)展。腸上皮細(xì)胞的基因突變及基因損傷可使Wnt經(jīng)典信號(hào)通路異常激活，使細(xì)胞大量增殖并形成腺瘤，當(dāng)突變逐漸積累，將導(dǎo)致腺瘤最終進(jìn)展為結(jié)直腸癌，并進(jìn)一步發(fā)生增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)。研究顯示，Wnt 通路的異常激活是導(dǎo)致結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展的主要原因且大部分的結(jié)直腸癌存在Wnt/β-catenin 信號(hào)通路的異常激活[2]。因此，在結(jié)直腸癌的發(fā)生與發(fā)展中，Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路的異常激活起到了至關(guān)重要的作用。

3 影響 Wnt 經(jīng)典通路的相關(guān)因子

3.1 APC

APC(adenomatous polyposis coli)是一種抑癌基因，定位于染色體5q21-q22,其編碼的 APC蛋白是一個(gè)可多功能抑制腫瘤的蛋白家族，它定位于結(jié)直腸黏膜上皮細(xì)胞的基膜并直接參與 Wnt 信號(hào)通路。APC蛋白幾乎在所有臟器表達(dá),但其mRNA在結(jié)腸粘膜細(xì)胞中的含量較高。APC 蛋白作為 Wnt 信號(hào)通路關(guān)鍵的效應(yīng)因子可與Axin、β-catenin結(jié)合，其主要功能是下調(diào)胞漿內(nèi)游離的β-catenin 水平，進(jìn)而抑制β-catenin進(jìn)入細(xì)胞核以及對(duì)下游基因的激活與轉(zhuǎn)錄功能。APC基因的突變會(huì)異常激活 Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路，從而促進(jìn)細(xì)胞大量增殖、分化，并誘發(fā)癌變，且APC基因是公認(rèn)與結(jié)直腸癌發(fā)生的密切相關(guān)的重要基因。臨床研究顯示，約70%的結(jié)直腸癌存在APC 基因缺失或突變[3]。當(dāng)APC基因發(fā)生突變時(shí),其蛋白中原本應(yīng)與β-catenin結(jié)合的區(qū)域發(fā)生異常,從而無(wú)法下調(diào)β-catenin的表達(dá),并使其轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核,進(jìn)而引發(fā)細(xì)胞異常增殖,最終導(dǎo)致腺瘤及結(jié)直腸癌的發(fā)生[4]。相關(guān)研究顯示，在APC突變并激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路異常傳導(dǎo)過(guò)程中，可刺激大量與增殖相關(guān)的靶蛋白基因的轉(zhuǎn)錄，例如細(xì)胞周期蛋白D1(cyclin D1)、增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和不穩(wěn)定編碼區(qū)結(jié)合蛋白(coding region determinant binding-protein,CRD-BP) 等[5]。這些靶蛋白的大量轉(zhuǎn)錄及表達(dá)將進(jìn)一步刺激結(jié)直腸腺瘤增殖，并抑制其分化成熟及凋亡，這表明APC蛋白參與了Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路并在其中扮演了重要角色，對(duì)結(jié)直腸癌的發(fā)生具有重大影響及意義。研究[6]表明USP7(去泛素化酶)可以通過(guò)介導(dǎo)β-Catenin的去配基作用來(lái)治療存在APC突變的CRC(colorectal cancer)。USP7通過(guò)在APC突變的CRC中恢復(fù)β-Catenin的泛素化從而抑制Wnt激活，進(jìn)而抑制腫瘤的生長(zhǎng)。不難看出，APC突變?cè)谝l(fā)腸道腫瘤的形成中起了關(guān)鍵作用，且對(duì)APC基因突變的研究可以發(fā)現(xiàn)潛在的結(jié)直腸癌治療靶點(diǎn)。另外，有研究顯示APC與癌細(xì)胞的異常遷移有關(guān)[7]，其具體機(jī)制為APC與其受體Asef結(jié)合并減輕了Asef的負(fù)性調(diào)節(jié)，從而導(dǎo)致人類結(jié)直腸癌中的異常細(xì)胞遷移，進(jìn)而可能導(dǎo)致癌細(xì)胞的侵襲與轉(zhuǎn)移。APC 蛋白可能是另外一個(gè)雙功能蛋白的例子(雙功能：作為信號(hào)通路和細(xì)胞遷移兩個(gè)過(guò)程關(guān)鍵的直接參與者)，即在Wnt信號(hào)通路和結(jié)直腸癌細(xì)胞遷移過(guò)程中發(fā)揮著不同的作用。然而目前并沒(méi)有APC蛋白同時(shí)參與這兩個(gè)過(guò)程的明確證據(jù)，相關(guān)問(wèn)題有待進(jìn)一步的研究。

3.2 Axin

Axin是Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路的基因之一。Axin基因編碼兩個(gè)蛋白：Axin1和Axin2蛋白，都是具有相似功能的腫瘤抑制劑。雖然Axin1廣泛表達(dá)，但Axin2僅在Wnt信號(hào)通路中表達(dá)。Axin2蛋白是一種大分子框架蛋白,包含Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路中多個(gè)重要成員的結(jié)合位點(diǎn)，在正常細(xì)胞中，Axin2蛋白是Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路的負(fù)性調(diào)節(jié)因子。但Axin2基因并不是一個(gè)抑癌基因，而是一個(gè)有力的促癌啟動(dòng)子，它可以上調(diào)Snail(轉(zhuǎn)錄抑制因子)的活性，誘導(dǎo)EMT(上皮細(xì)胞向間質(zhì)轉(zhuǎn)化)過(guò)程，從而促使CRC細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)移[8]。有研究顯示，Axin2基因的突變之一位于1989G>A等位基因，它導(dǎo)致產(chǎn)生截短形式的Axin2蛋白(trAXIN2)，trAXIN2可以抑制GSK3β，穩(wěn)定snail[9]，從而影響CRC的發(fā)生、侵襲與轉(zhuǎn)移。該研究明確了Axin基因的突變或損傷導(dǎo)致了Axin2蛋白的減少并通過(guò)Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路影響結(jié)直腸癌的發(fā)生與發(fā)展。隨著研究逐漸深入,人們開(kāi)始發(fā)現(xiàn)Axin對(duì)Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路實(shí)際上可以發(fā)揮雙重調(diào)節(jié)的作用[10]。一方面,Axin可以通過(guò)參與β-catenin 降解復(fù)合體的形成,促進(jìn)β-catenin的降解,發(fā)揮抑制Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路的作用;另一方面,Axin可以通過(guò)與LRP5/6的相互作用和加速GSK-3β進(jìn)入細(xì)胞膜促進(jìn)LRP5/6的磷酸化,開(kāi)啟Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路。在CRC的治療中，Axin也具有重要作用：NAMPT(煙酰胺磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶)可以通過(guò)增加Axin表達(dá)水平來(lái)誘導(dǎo)β-catenin 降解；這抑制了Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路和結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖與發(fā)展[11]。在結(jié)直腸癌患者中，miR-103/107 表達(dá)與 Axin2 表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，并且 miR-103/107 高和 Axin2 低表達(dá)譜的特征與患者的不良預(yù)后相關(guān)[12]。USP44(去泛素化酶)可以通過(guò) Axin1的去泛素化使 Wnt/β-catenin 通路失活，從而抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖并增強(qiáng)細(xì)胞凋亡[13]。這些新進(jìn)展說(shuō)明Axin在Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路中有著重要作用并影響CRC的診斷，預(yù)后和治療。關(guān)于Axin構(gòu)成β-catenin 降解復(fù)合體并參與一系列相關(guān)反應(yīng)的研究較為深入，其藥物及治療也是目前研究熱點(diǎn)，但Axin2的其他生理功能研究尚少。

3.3 GSK-3β

GSK3β基因位于3q13.33，其編碼的蛋白GSK-3β是一種廣泛分布于體內(nèi)各處細(xì)胞內(nèi)的絲氨酸/蘇氨酸(Ser/Thr)激酶,GSK-3β蛋白通過(guò)其對(duì)底物的磷酸化作用并調(diào)節(jié)多種細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑并參與多種病理生理過(guò)程，包括神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子信號(hào)、神經(jīng)遞質(zhì)信號(hào)、微管動(dòng)力學(xué)和Wnt信號(hào)通路等[14]。在Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中,GSK-3β的主要功能是使β-catenin的N端的Ser/Thr磷酸化進(jìn)而使β-catenin降解,從而調(diào)節(jié)β-catenin的細(xì)胞內(nèi)含量，進(jìn)而影響Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路并引發(fā)結(jié)直腸癌。另外，GSK-3β還參與β-catenin降解復(fù)合體的構(gòu)成，因此，GSK3β被認(rèn)為是通過(guò)Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路抑制癌癥發(fā)展的關(guān)鍵因素。哺乳動(dòng)物GSK3基因編碼兩個(gè)蛋白，稱為GSK3α和GSK3β，不同之處在于GSK3α中存在一個(gè)擴(kuò)大的富含甘氨酸的氨基末端。雖然GSK-3α和GSK3β似乎都在β-catenin的破壞中起作用，但大多數(shù)研究都集中在GSK3β上[14]。有研究顯示[15]，橙皮苷 (NG，Nerigoside)可以通過(guò)抑制ERK/GSK3β/β-catenin信號(hào)通路抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞的生長(zhǎng)并阻止細(xì)胞增殖和遷移，且NG與 GSK3β抑制劑聯(lián)合阻斷Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路可獲得更好的結(jié)果。另一項(xiàng)研究顯示：GSK3β抑制劑可以穩(wěn)定TRAF6(泛素連接酶)，從而促進(jìn)了 CTNNB1基因編碼的蛋白質(zhì)的分解，從而有效抑制了 EMT 過(guò)錯(cuò)和 CRC的轉(zhuǎn)移[16]。Yao等的研究顯示：PP9(甾體皂苷)通過(guò)PI3K/Akt/GSK3β信號(hào)抑制促進(jìn)CRC細(xì)胞的G2/M期阻滯和凋亡死亡[17]，這表明PP9可被視為通過(guò)GSK3β信號(hào)抑制來(lái)治療CRC的新候選藥物。GSK3β抑制劑及相關(guān)藥物通過(guò)抑制GSK3β的活性并影響結(jié)直腸癌細(xì)胞的發(fā)生、進(jìn)展成為了前沿的研究熱點(diǎn)。

3.4 miRNA

MicroRNA (miRNA)是一類由內(nèi)源基因編碼的長(zhǎng)度約為22個(gè)核苷酸的非編碼單鏈RNA分子。其調(diào)節(jié)多種致癌途徑，有研究表明[18]miRNA在結(jié)直腸癌的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮著重大的作用，也是非常有價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物。miRNA對(duì)Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路的影響是多方面的，不同的miRNA可激活或抑制Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路，從而影響腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。研究顯示，APC突變與結(jié)直腸癌患者幾種miRNA的上調(diào)有關(guān)，APC基因是人結(jié)直腸癌細(xì)胞中miR135a/b的靶基因，而miR135b的過(guò)度表達(dá)與晚期腫瘤分級(jí)和不良臨床結(jié)果相關(guān)[19]，以上研究說(shuō)明了miRNA可以影響APC進(jìn)而影響Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路。Guo等的研究顯示，miR-15b通過(guò)上調(diào)β-catenin和抑制結(jié)腸癌細(xì)胞中β-catenin 降解復(fù)合體的成分Axin2來(lái)誘導(dǎo)異常細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移且MiR-15b在結(jié)直腸癌細(xì)胞中升高，并與與患者預(yù)后不良相關(guān)[20]。miR-224是一種致癌miRNA，它可以直接靶向Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路的抑制因子，包括GSK3β和分泌型卷曲相關(guān)蛋白2 (sFRP2)，從而使β-catenin在細(xì)胞質(zhì)中積累并轉(zhuǎn)入細(xì)胞核，導(dǎo)致結(jié)直腸癌的發(fā)生與發(fā)展[21]。根據(jù)研究結(jié)果顯示 miR-144-3p 可以通過(guò)BCL6 的介導(dǎo)抑制CRC細(xì)胞中異常激活的Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路。miR-144-3p在CRC細(xì)胞的中含量的降低，與CRC患者的腫瘤進(jìn)展與分期相關(guān)[22]。以上研究表明，某些miRNA對(duì)CRC有抑制效果。不難看出，在結(jié)直腸癌的發(fā)生過(guò)程中，miRNAs影響了整個(gè)Wnt途徑，包括APC、Axin、GSK3β、Frizzled等Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路的重要成員。

4 以Wnt經(jīng)典信號(hào)通路為靶點(diǎn)的抗腫瘤治療進(jìn)展

4.1 非甾體抗炎藥物(NSAIDs)

非甾體抗炎藥對(duì)預(yù)防癌癥和腫瘤治療都有積極作用。研究表明，Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路與慢性炎癥和氧化應(yīng)激密切相關(guān)，而非甾體抗炎藥可以使細(xì)胞內(nèi)β-catenin降解并抑制Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路[23]，如阿司匹林、舒林酸、艾西舒林和塞來(lái)昔布等非甾體抗炎藥可以通過(guò)抑制細(xì)胞內(nèi)β-catenin的水平來(lái)降低β-catenin/TCF/LEF復(fù)合物的轉(zhuǎn)錄活性[24]。研究表明[25]：雙氯芬酸和塞來(lái)昔布降低了β-catenin的靶基因 Axin2、細(xì)胞周期蛋白 D1 和c-Myc的表達(dá)。此外，在雙氯芬酸和塞來(lái)昔布治療后，β-catenin的細(xì)胞質(zhì)積累和核轉(zhuǎn)位顯著減少，且雙氯芬酸和塞來(lái)昔布顯著增加了β-catenin 的磷酸化并降低了GSK3β的磷酸化。以上研究說(shuō)明了非甾體抗炎藥可以影響Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路中的重要因子β-catenin從而達(dá)到其相關(guān)抗腫瘤效果。另外，早有研究[26]顯示非甾體抗炎藥物具有一定的抗腫瘤能力并提示其可以預(yù)防結(jié)直腸腫瘤，非甾體抗炎藥對(duì)結(jié)直腸癌預(yù)防作用的途徑包括誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯及凋亡和抑制血管的生成。Bowen等人的研究顯示，NSAID(舒林酸)和rexinoid(貝沙羅汀)聯(lián)用可通過(guò)Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路預(yù)防家族性腺瘤性息肉病的腸道癌變[27]。這表明非甾體抗炎藥可有效預(yù)防CRC。另外，非甾體抗炎藥可以下調(diào)環(huán)氧化酶-2的活性，從而抑制前列腺素E2的合成，進(jìn)而抑制Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路[28]。但傳統(tǒng)非甾體抗炎藥物(如舒林酸、阿斯匹林)作為抗癌藥物時(shí)的嚴(yán)重不良反應(yīng)也不容忽視，常見(jiàn)的副作用包括：胃腸道反應(yīng)、肝腎損傷等，長(zhǎng)期應(yīng)用NSAIDs也會(huì)同時(shí)造成體重增加、水腫形成和液體潴留。因此,在Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路的治療策略上，如何應(yīng)對(duì)非甾體抗炎藥的嚴(yán)重副作用對(duì)CRC患者的影響是十分重要。

4.2 Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路中的其他負(fù)性調(diào)節(jié)因子

許多Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路中的負(fù)性調(diào)節(jié)因子也是抗結(jié)直腸腫瘤的治療靶點(diǎn)。Cha等的研究發(fā)現(xiàn)，KY1220，一種新型小分子試劑，可以附著在Axin的RGS結(jié)構(gòu)域上，這種小分子可以使β-catenin 降解復(fù)合體更加穩(wěn)定，從而導(dǎo)致GSK3β的激活和Ras(另一種參與CRC的癌基因)的磷酸化和降解。另外，KY1220還可以抑制APC突變引起的腫瘤生長(zhǎng)[29]。氯喹醛(CQD)是一種用于治療皮膚感染的局部抗菌劑，給予CQD可以抑制腫瘤生長(zhǎng)并降低Wnt靶基因c-Myc和G蛋白偶聯(lián)受體-5 (LGR5)的表達(dá)[30]。Thorvaldsen等的研究表明Tankyrase1和2(聚腺苷二磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶)通過(guò)使Axin降解來(lái)刺激Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路。另外，一些Tankyrase抑制劑如G007-LK和XAV939是昂貴的抗腫瘤藥物，可在在保留Axin的情況下阻斷Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路[31]。以上研究表明作用于Axin的負(fù)性調(diào)節(jié)因子在逐漸被開(kāi)發(fā)，但其具體療效及在臨床上的應(yīng)用尚欠缺進(jìn)一步的驗(yàn)證。鹽霉素(salinomycin，SAL)是最早發(fā)現(xiàn)的人類癌癥干細(xì)胞 (CSC)抑制劑之一，也是LRP6(低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6)的抑制劑，它可以降解抑制Wnt信號(hào)傳導(dǎo)從而抑制CRC的發(fā)生與發(fā)展[32]。鹽霉素納米晶體(SAL NCS)表現(xiàn)出顯著更高的細(xì)胞毒性，具有比游離 SAL高1.5-3 倍的Wnt抑制效果和10倍的癌癥干細(xì)胞抑制效果。此外，與游離 SAL 相比，SAL NCs 通過(guò)口服給藥在 APC 轉(zhuǎn)基因小鼠中表現(xiàn)出雙倍的抗CRC作用[33]。以上研究說(shuō)明鹽霉素是通過(guò)Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路對(duì)抗CRC的重要負(fù)性調(diào)節(jié)因子。此外，通常用于鎮(zhèn)靜及神經(jīng)相關(guān)疾病的鋰也可以通過(guò)靶向GSK3β在結(jié)直腸癌中顯示出抗癌作用[34]。近年來(lái)，多種單克隆抗體在結(jié)直腸癌治療中的作用越來(lái)越受到關(guān)注。例如，單克隆抗體vanitatumab(OMP-18R5)與FZD受體相互作用，可以抑制結(jié)直腸癌小鼠的Wnt/β-catenin信號(hào)通路[35]。另外，上文提到的miRNA如miR-520e[22]也是Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路中的負(fù)性調(diào)節(jié)因子。隨著對(duì)Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路研究的深入，更多相關(guān)靶點(diǎn)及抑制相關(guān)因子的藥物也在被不斷發(fā)現(xiàn)。

4.3 天然化合物

近期，一些天然化合物被證明可以通過(guò)影響Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路來(lái)改變結(jié)直腸癌的病理過(guò)程并有效預(yù)防、治療結(jié)直腸癌。研究顯示，維生素d3(1，25(OH)2D3)可以促進(jìn)β-catenin與維生素D受體的結(jié)合，并增加E-鈣粘蛋白的表達(dá)，從而減少可與TCF/LEF轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合的β-catenin[36],較高的血漿1，25(OH)2D3水平與降低結(jié)直腸癌風(fēng)險(xiǎn)和提高生存率相關(guān)。木黃酮(Genistein)是一種大豆來(lái)源的異黃酮和植物雌激素，它通過(guò)上調(diào)GSK3β和E-鈣粘蛋白的表達(dá)來(lái)滅活Wnt信號(hào)，在對(duì)抗異常細(xì)胞對(duì)氟嘧啶和鉑類化合物的耐藥性方面發(fā)揮作用[37]。馬錢(qián)子堿(brucine)是存在于天然植物馬錢(qián)子中的一種活性生物堿，其可以增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)APC的表達(dá)從而通過(guò)Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路顯著抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)[38]。姜黃素是一種來(lái)自于植物姜黃根莖的天然化合物，目前研究已證明其在體外對(duì)多種癌細(xì)胞具有抗增殖的作用，這源自其抑制Wnt活性的能力：姜黃素可以通過(guò)抑制Wnt-β-catenin信號(hào)通路的CDX2(caudal type homeobox-2，一種腸特異性的核轉(zhuǎn)錄因子)來(lái)減少細(xì)胞增殖和增加凋亡[39]。隨著研究的逐步深入，越來(lái)越多的天然化合物尤其是中藥提取物被發(fā)現(xiàn)可以在Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路中發(fā)揮作用，抑制其異常的激活并影響了CRC的發(fā)生與發(fā)展。因此，在結(jié)直腸癌的治療中加強(qiáng)對(duì)天然化合物的研究是一項(xiàng)有效的治療策略。

5 結(jié)語(yǔ)

結(jié)直腸癌的高發(fā)病率與高死亡率嚴(yán)重危害人類健康。結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，包括Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路在內(nèi)的不同分子通路如Notch、Hedgehog、TGF-β等重要通路所涉及的下游靶點(diǎn)基因突變?nèi)源嬖谘芯可系拿c(diǎn)。多數(shù)影響CRC的通路其機(jī)制十分復(fù)雜，如哺乳動(dòng)物的Wnt信號(hào)通路至少有15種受體、19種Wnt配體分布在7個(gè)蛋白質(zhì)家族中[40]。此外，Wnt信號(hào)通路是結(jié)直腸癌發(fā)病機(jī)制中最關(guān)鍵的過(guò)程，包括APC、Axin及GSK3β在內(nèi)的多種因子參與了這一途徑，其中每種因子的突變都可能導(dǎo)致Wnt/β-catenin經(jīng)典信號(hào)通路的異常激活。了解這些靶點(diǎn)潛在的遺傳突變對(duì)于早期診斷和開(kāi)發(fā)新的靶向藥物至關(guān)重要，也給開(kāi)發(fā)安全有效的CRC治療藥物帶來(lái)了挑戰(zhàn)。隨著研究進(jìn)一步的進(jìn)展，未來(lái)會(huì)誕生更多基于Wnt經(jīng)典信號(hào)通路的抗結(jié)直腸癌的分子靶向藥物,為結(jié)直腸腫瘤的治療提供更多的選擇。