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        WT1基因在成人初診急性髓系白血病不同預(yù)后分層中的表達(dá)特點

        2021-01-02 18:53:12邵晶璇謝國然陳宏
        中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志 2021年9期
        關(guān)鍵詞:意義差異水平

        邵晶璇 謝國然 陳宏

        WT1 基因是1990年發(fā)現(xiàn)于兒童腎母細(xì)胞瘤的相關(guān)基因[1],WT1 基因在大多數(shù)白血病中也有表達(dá),其既是抑癌基因,同時又具有類癌基因樣活性,是與造血細(xì)胞增殖和凋亡相關(guān)的基因,在血液系統(tǒng)惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用,尤其是在急性髓系白血?。ˋcute myeloid leukemia,AML)中被認(rèn)為是白血病基因。目前AML 已進(jìn)入分層治療階段,根據(jù)細(xì)胞遺傳學(xué)及基因突變、融合基因等分子生物學(xué)標(biāo)志,將AML 分為低、中、高危三層,針對不同危險分層精準(zhǔn)化治療是取得AML 治療效果的關(guān)鍵。目前國內(nèi)外關(guān)于WT1 基因的表達(dá)與AML 患者治療反應(yīng)的關(guān)系仍有爭議[2,3]。本研究旨在通過分析WT1 基因表達(dá)水平在AML 不同亞型、不同預(yù)后分層中的情況,探討WT1 基因是否可以作為協(xié)助判斷危險分層的指標(biāo)之一,及WT1表達(dá)水平是否對化療效果有影響。

        1 材料與方法

        1.1 臨床資料選取2016年2月~2021年4月我院收治的初診成人AML 患者(除M3 亞型)80 例。入選病例中男44 例,女36 例,中位年齡53 歲。按FAB 分型,其中M1 5 例,M2 30 例,M4 9 例,M5 36例;按NCCN 指南AML 預(yù)后危險分層標(biāo)準(zhǔn),分為低、中、高危三組,其中低危組13 例,中危組40 例,高危組27 例。

        1.2 治療方案初診誘導(dǎo)緩解化療方案主要選擇DA(柔紅霉素、阿糖胞苷)、HA(高三尖杉酯堿、阿糖胞苷)和TA(吡柔比星、阿糖胞苷)其中之一,高齡患者選用CAG(阿糖胞苷、阿柔比星、粒細(xì)胞刺激因子)。完全緩解后采用中大劑量阿糖胞苷鞏固化療3 個療程,中、高危組有移植條件的,行異基因造血干細(xì)胞移植。

        1.3 觀察指標(biāo)接受1~2 個療程誘導(dǎo)化療后開始評估CR 率,AML 患者分型標(biāo)準(zhǔn)、化療療效標(biāo)準(zhǔn)的判定參照文獻(xiàn)[4]。AML 患者預(yù)后分組的標(biāo)準(zhǔn)參考美國 NCCN 指南。

        1.4 WT1 檢測檢測利用Taqman 探針熒光定量PCR 方法檢測樣本中WT1 基因的表達(dá)水平,以ABL1 作為內(nèi)參,用WT1/ABL1 方法計算相對表達(dá)量,WT1 的相對表達(dá)水平以百分?jǐn)?shù)來表示,≤50%為低表達(dá);>50%為高表達(dá)。

        1.5 統(tǒng)計學(xué)方法采用 SPSS 26.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,計量資料兩組間比較用t檢驗,多組間比較用ANOVA 方差分析,計數(shù)資料的比較采用χ2檢驗。P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 AML 初診時各亞型間WT1 表達(dá)情況AML初診時各亞型間WT1 表達(dá)水平:M1 為0.27±0.06,M2為0.39±0.12,M4為1.00±0.33,M5為0.17±0.05。M4 中WT1 的表達(dá)水平最高,M5 中最低,四種亞型間WT1 表達(dá)水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=1.237,P=0.096)。

        2.2 AML 初診時不同危險分層間WT1 表達(dá)情況低危組WT1 表達(dá)水平為0.29±0.07,中危組為0.36±0.13,高危組為0.78±0.25。低危組WT1 表達(dá)水平最低,高危組最高。低、中危兩組WT1 表達(dá)水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.848,P=0.070),中、高危兩組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=8.303,P=0.000),低、高危兩組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=8.995,P=0.000)。

        2.3 化療前WT1 高、低表達(dá)對誘導(dǎo)緩解化療的影響化療前WT1 低表達(dá)15 例,誘導(dǎo)緩解化療后CR 12例,NR 3 例;高表達(dá)65 例,誘導(dǎo)緩解化療后CR 51例,NR 14 例。兩組CR 率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.017,P=0.896)。

        3 討論

        WT1 基因在人體造血發(fā)育過程中起重要作用,正常人可少量表達(dá)WT1 基因,但僅在早期造血祖細(xì)胞中表達(dá),成熟細(xì)胞中不表達(dá)。WT1 基因可以調(diào)節(jié)造血干細(xì)胞的數(shù)量、生長分化及生存,是雙向轉(zhuǎn)錄因子,能抑制幼稚細(xì)胞的分化,同時也具有癌基因的特性[5]。目前有研究表明,在惡性造血系統(tǒng)疾病中,WT1 基因均異常高表達(dá),在AML 中表達(dá)最明顯,相比其他類型惡性血液腫瘤有較重要的臨床意義[3]。因此近些年來,國內(nèi)外對WT1 在AML 中的意義開展大量研究,但結(jié)論不盡相同。有學(xué)者認(rèn)為,WT1 基因不能作為AML 特異性分子學(xué)標(biāo)志,但大部分學(xué)者認(rèn)為,WT1 基因可作為AML 治療反應(yīng)、臨床預(yù)后的監(jiān)測指標(biāo),特別是在異基因造血干細(xì)胞移植患者中,可作為獨立預(yù)后不良因素[6~10]。本研究旨在通過觀察WT1 基因在AML 患者各亞型及各預(yù)后分組中表達(dá)是否有差異,進(jìn)一步明確WT1 基因在AML 中的作用。

        本研究結(jié)果顯示,各亞型間WT1 表達(dá)水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義,說明WT1 表達(dá)水平在各亞型中無特異性,與既往研究結(jié)果一致[11,12]。但目前也有較多研究認(rèn)為AML 各亞型間WT1 表達(dá)水平有差異[13,14]。研究結(jié)果的不一致,考慮可能與樣本量不同有關(guān),具體原因還有待進(jìn)一步深入研究。

        隨著基因技術(shù)的發(fā)展,目前證實了很多與AML預(yù)后相關(guān)的融合基因、突變基因,它們影響著AML的治療效果及預(yù)后,NCCN 指南根據(jù)基因等檢查結(jié)果,將AML 患者在治療前分為低、中、高危三層,不同預(yù)后分層的治療方案有所不同。本研究通過觀察不同預(yù)后分層中AML 患者WT1 基因表達(dá)水平情況,比較各組間是否有差異,明確WT1 基因是否可以作為協(xié)助判斷預(yù)后分層的指標(biāo)之一。結(jié)果顯示低、中危兩組WT1 基因表達(dá)水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),中、高危兩組WT1 表達(dá)水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),低、高危兩組WT1表達(dá)水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),這與鄭玉婷等[12]研究結(jié)果一致。說明WT1 基因有可能成為協(xié)助判斷AML 患者危險分層的指標(biāo)之一,WT1基因高表達(dá)可能為AML 預(yù)后不良的因素。

        本研究進(jìn)一步通過初診時WT1 基因表達(dá)水平的高低將入選AML 患者分為WT1 高表達(dá)及低表達(dá)組,觀察不同表達(dá)水平的化療CR 率情況,旨在觀察WT1 的表達(dá)水平是否對化療CR 率有影響。結(jié)果顯示,WT1 高表達(dá)的CR 率與低表達(dá)的CR 率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),說明初診時WT1 表達(dá)水平對CR 率無明顯影響,不能成為影響CR 的因素,但結(jié)合本研究WT1 基因在低危組表達(dá)水平偏低,考慮治療前WT1 基因表達(dá)高低可能對CR 率無影響,但有可能對于遠(yuǎn)期OS、EFS 等有影響,目前國內(nèi)外關(guān)于這一點的研究也是結(jié)論不一致[12,15,16],仍需進(jìn)一步擴(kuò)大病例數(shù)進(jìn)行驗證。

        綜上所述,初診時WT1 表達(dá)水平在各亞型間無特異性,WT1 基因有可能成為協(xié)助判斷AML 患者危險分層的指標(biāo)之一,WT1 基因高表達(dá)可能是AML 預(yù)后不良的因素,初診時WT1 表達(dá)水平對CR率無明顯影響。由于本研究病例數(shù)有限,以上結(jié)論仍需進(jìn)一步擴(kuò)大病例數(shù),延長觀察時間加以證實和完善。

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