錢(qián)金林，李 青，蘇紅丹，李林秋，嚴(yán)麗霞

組織切片出現(xiàn)刀痕是病理技術(shù)工作中經(jīng)常遇到的問(wèn)題，產(chǎn)生刀痕原因有組織、刀片及石蠟等因素，其中用于包埋的石蠟中有雜質(zhì)是刀痕產(chǎn)生的主要原因，去除包埋石蠟中的雜質(zhì)是減少石蠟切片刀痕的重要方法之一。通常去除石蠟中雜質(zhì)的方法是將石蠟靜置烤箱10 h以上，棄除下面含有雜質(zhì)的沉淀石蠟后能獲得較為純凈的石蠟[1]。但該方法不能去除懸浮在石蠟中的比重較輕的其它雜質(zhì)，且有燙傷操作者和引發(fā)火災(zāi)的危險(xiǎn)。本科室通過(guò)反復(fù)實(shí)踐摸索，總結(jié)出一種高效便捷、安全有效的石蠟過(guò)濾方法，提高了組織切片質(zhì)量，杜絕安全隱患，現(xiàn)將該方法介紹如下僅供參考。

1 材料與方法

1.1 材料Leica HistoCore Arcadia H型石蠟包埋機(jī)，華靈高效切片石蠟(熔點(diǎn)58～60 ℃)，大小12 cm×9 cm×8 cm的不銹鋼油炸藍(lán)3個(gè)，大張方形濾紙，回形針。

1.2 方法(1)沿不銹鋼油炸籃上口切除手柄。(2)將大張濾紙裁剪為30 cm×26 cm，按不銹鋼油炸籃的尺寸折疊成一面開(kāi)口的長(zhǎng)方體，用回形針將其固定，將疊好的濾紙放入不銹鋼油炸籃中，即成為不銹鋼過(guò)濾籃(圖1)。(3)將過(guò)濾籃放入石蠟包埋機(jī)蠟缸中，使其位置盡量遠(yuǎn)離蠟缸中間的出蠟口(圖2)。(4)將石蠟加入過(guò)濾籃中，蓋上包埋機(jī)蠟缸蓋即可過(guò)濾(圖3)。

圖1 將合適尺寸的濾紙折疊放入切除手柄的不銹鋼油炸藍(lán)，形成不銹鋼過(guò)濾籃 圖2 過(guò)濾籃放入包埋機(jī)蠟缸中，盡量遠(yuǎn)離中間的石蠟出口 圖3 石蠟加入過(guò)濾籃中 圖4 過(guò)濾籃中可見(jiàn)大量絮狀雜質(zhì)

2 結(jié)果

2.1 石蠟清潔度本組采用該方法過(guò)濾切片石蠟，使石蠟清潔度大大增高(圖4)。

2.2 切片刀痕本組采用該方法使包埋切片組織刀痕明顯減少，提高了切片質(zhì)量，同時(shí)也降低了安全隱患。

3 討論

組織切片出現(xiàn)刀痕是常規(guī)制片中經(jīng)常出現(xiàn)的問(wèn)題，不僅影響切片質(zhì)量，而且有時(shí)會(huì)影響診斷。組織切片刀痕的產(chǎn)生主要原因：(1)組織本身的因素，組織內(nèi)含有較堅(jiān)硬的物質(zhì)，如闌尾、腸壁等含有糞石的組織；或組織內(nèi)含有異物而取材時(shí)未能充分沖洗，如膽囊、肝臟等含有結(jié)石的組織，即使取材時(shí)充分流水沖洗，也不能去除組織內(nèi)的細(xì)小結(jié)石。(2)標(biāo)本容器的因素，臨床固定標(biāo)本時(shí)使用的標(biāo)本袋或者瓶子不干凈，會(huì)使異物黏附于標(biāo)本中，尤其是一些較小的活檢標(biāo)本不便流水沖洗，異物難以去除。(3)包埋石蠟的因素，懸浮于包埋石蠟中的雜質(zhì)是產(chǎn)生刀痕的主要因素，石蠟中的雜質(zhì)也使刀片的使用期限大大降低[2]。

為了減少刀痕的產(chǎn)生，除了取材時(shí)認(rèn)真沖洗標(biāo)本及選用干凈的標(biāo)本容器外，應(yīng)對(duì)包埋石蠟進(jìn)行過(guò)濾以提高其清潔度。傳統(tǒng)包埋前對(duì)石蠟進(jìn)行處理的方法有兩種：(1)將石蠟熔化后在65 ℃的烤箱中靜置10 h，讓石蠟中的雜質(zhì)沉淀后, 棄去下面含雜質(zhì)的石蠟，重復(fù)3次，即可獲得較為純凈的石蠟[1]。但此操作需重復(fù)3次甚至多次，過(guò)程較為繁瑣。由于石蠟是易燃品，如在烤箱內(nèi)過(guò)濾中發(fā)生遺漏，易引發(fā)火災(zāi)，同時(shí)操作者也容易造成燙傷。該方法使用過(guò)程繁瑣且存在較大安全隱患，不符合現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量安全管理的要求，在日常工作中應(yīng)謹(jǐn)慎使用該方法。(2)使用電磁爐將石蠟熔化后沉淀，再倒入包埋機(jī)蠟缸。該方法只能沉淀一些顆粒大、密度大的雜質(zhì)，不能去除懸浮于石蠟中的雜質(zhì)，且電磁爐在加熱熔蠟的過(guò)程中不能控制熔蠟的溫度，有引發(fā)火災(zāi)、燙傷操作者和損壞包埋機(jī)的風(fēng)險(xiǎn)。為了規(guī)避以上兩種傳統(tǒng)石蠟過(guò)濾方法的缺點(diǎn)，本科室通過(guò)實(shí)踐摸索出應(yīng)用過(guò)濾籃在包埋機(jī)缸中邊過(guò)濾、邊包埋的方法。Leica HistoCore Arcadia H型石蠟包埋機(jī)的蠟缸中管道出口高于底部約0.5 cm，可以沉淀石蠟中高密度的雜質(zhì)，但不能去除懸浮于石蠟中的絮狀雜質(zhì)。該包埋機(jī)蠟缸的溫度設(shè)置為50～75 ℃，蠟缸大小為40 cm×12 cm×9 cm，最大容量為4 L，蠟缸中可以放下3～4個(gè)大小為12 cm×9 cm×8 cm的不銹鋼過(guò)濾籃(使用多個(gè)過(guò)濾籃可以增大過(guò)濾面積)。在放置過(guò)濾籃時(shí)應(yīng)盡量遠(yuǎn)離出蠟口以保證出蠟通暢，即使標(biāo)本量大、包埋速度快的情況下也可以做到邊過(guò)濾、邊包埋。該方法使用固體石蠟直接加入包埋機(jī)蠟缸中的過(guò)濾籃中，避免包埋機(jī)被高溫熔化的石蠟損壞，杜絕火災(zāi)，避免操作者被燙傷等安全風(fēng)險(xiǎn)，且能有效地過(guò)濾石蠟中的雜質(zhì)，提高了切片質(zhì)量，值得推廣應(yīng)用。