南京市高淳人民醫(yī)院（211300）孫穎

血液中乙肝標(biāo)志物的種類(lèi)較多，其中表面抗原（HBsAg)是最主要的，HBsAg陽(yáng)性是確診乙型肝炎的基本條件。由于人類(lèi)個(gè)體差異及感染時(shí)間長(zhǎng)短等因素，人體內(nèi)HBsAg含量存在高低差異，我國(guó)低濃度的 HBsAg人群在乙肝患者中，占有一定的比例，約占陽(yáng)性的23%，因此，不能輕視這部分人群，如未及時(shí)檢出，乙肝病毒可能會(huì)通過(guò)輸血、手術(shù)等途徑擴(kuò)散開(kāi)來(lái)，造成疾病的傳播，低濃度HBsAg患者的發(fā)現(xiàn)對(duì)臨床選擇正確治療手段甚至醫(yī)生自我保護(hù)有重大意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集我院2016年6月～12月HBsAg 定量結(jié)果為臨界值(0.05 IU/ml≤HBsAg≤2IU/m1)的樣本共30份。

1.2 試劑與方法

1.2.1 儀器試劑 美國(guó)雅培的ARCHITECT IR2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析儀，原裝配套HBsAg試劑及確認(rèn)試劑，按保養(yǎng)手冊(cè)進(jìn)行儀器的保養(yǎng)及維護(hù)，每日檢測(cè)質(zhì)控，使用安圖專(zhuān)用發(fā)光定量質(zhì)控品。

1.2.2 測(cè)定方法 采用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測(cè)技術(shù)測(cè)定HBsAg，當(dāng)出現(xiàn)結(jié)果0.05～2IU/ml時(shí)，將標(biāo)本用最大離心力重新離心10min以上，再次測(cè)定HBsAg，如結(jié)果<0.05IU/ml，則報(bào)告HBsAg陰性；如檢測(cè)結(jié)果仍落在0.05～2之間，則進(jìn)行HBsAg抗體中和確認(rèn)試驗(yàn)，HBsAg確認(rèn)試驗(yàn)是利用CMIA技術(shù)，同時(shí)測(cè)定中和及未中和標(biāo)本的HBsAg的S/CO值，如果未中和標(biāo)本信號(hào)S/CO≥0.70，且中和標(biāo)本的RLU與未中和標(biāo)本相比減少了>50%時(shí)，即可確認(rèn)HBsAg陽(yáng)性。

2 結(jié)果

3 0 例H B s A g 定量檢測(cè)初次結(jié)果為0.06～1.43，平均0.55，均為臨界結(jié)果，標(biāo)本經(jīng)重新離心10min以上，再次檢測(cè)HBsAg，結(jié)果為0.07～1.87，平均0.54，用抗體中和確認(rèn)試驗(yàn)進(jìn)行HBsAg確認(rèn)，按照判斷標(biāo)準(zhǔn)中和率下降>50%為確認(rèn)試驗(yàn)陽(yáng)性，30例標(biāo)本中有28例符合標(biāo)準(zhǔn)，HBsAg確認(rèn)為陽(yáng)性，2例未確認(rèn)，確認(rèn)試驗(yàn)陽(yáng)率高達(dá)93%。

3 討論

乙肝是我國(guó)最常見(jiàn)的肝臟疾病，臨床常常應(yīng)用抗原抗體特異性結(jié)合原理的方法來(lái)測(cè)定HBsAg及相關(guān)抗體，其檢測(cè)結(jié)果是診斷乙肝的基礎(chǔ)。由于檢測(cè)方法的靈敏度各有差異，導(dǎo)致一些低濃度HBsAg不能被檢測(cè)出，尤其是臨界值。據(jù)研究[1]低濃度HBsAg的出現(xiàn)原因較復(fù)雜，可能是以下3個(gè)方面：①患者處于乙肝感染的隱匿期、急性乙肝恢復(fù)期、感染后自身痊愈的后期攜帶者，此時(shí)病毒是低水平復(fù)制，并且可能存在血清學(xué)轉(zhuǎn)換，出現(xiàn)抗體[2]。②病毒的變異會(huì)使HBsAg的抗原性發(fā)生改變，導(dǎo)致靈敏度不夠，結(jié)果表現(xiàn)為弱陽(yáng)性，體內(nèi)的HBsAg含量實(shí)際很高。③因機(jī)體的免疫系統(tǒng)對(duì)病毒的應(yīng)答反應(yīng)表現(xiàn)為免疫耐受，導(dǎo)致表面抗原水平表達(dá)較低。

日常工作中，本院每月檢測(cè)的近2000例HBsAg約有3～5例為低濃度，約占總數(shù)的1%～2%，比例雖不高，日積月累，將是一份大數(shù)據(jù)，怎樣準(zhǔn)確報(bào)告，避免引起糾紛，是我們必須面對(duì)的問(wèn)題，按照檢驗(yàn)操作規(guī)程，當(dāng)結(jié)果存在疑問(wèn)時(shí)，應(yīng)該進(jìn)行抗體中和確認(rèn)試驗(yàn)或HBV-DNA檢測(cè)以驗(yàn)證結(jié)果的可靠性。但是，由于進(jìn)口試劑成本以及標(biāo)本數(shù)量不能滿(mǎn)足日常檢測(cè)的需要，HBsAg確認(rèn)試驗(yàn)未能開(kāi)展，我們與試劑廠家聯(lián)系，最終予以檢測(cè)。

本次研究結(jié)果顯示，30例標(biāo)本大多數(shù)能被特異性抗體吸附，證明患者體內(nèi)確實(shí)存在病毒抗原，HBsAg陽(yáng)性為真實(shí)結(jié)果；2例不能進(jìn)行確認(rèn)者，具體原因不能查明，有研究[3]提出可能是因?yàn)檠须y以消失的物質(zhì)的干擾以及抗體中和試驗(yàn)的本身敏感性對(duì)檢測(cè)的干擾，在HBsAg濃度很低時(shí)，會(huì)導(dǎo)致中和試驗(yàn)呈假陰性。同時(shí)，雅培試劑說(shuō)明書(shū)上也特別提出：因?yàn)樵缙诟腥净蛟缙诨謴?fù)，非特異性結(jié)合可能掩蓋樣品中低濃度的HBsAg，導(dǎo)致假陰性，對(duì)此，我們建議對(duì)HBsAg定量結(jié)果為陽(yáng)性而確認(rèn)試驗(yàn)陰性者，應(yīng)建立跟蹤隨訪記錄，掌握HBsAg在病情變化中的改變。

隨著時(shí)代的發(fā)展，人們法律意識(shí)日益增強(qiáng)，CMIA法檢測(cè)HBsAg結(jié)果為弱陽(yáng)性的標(biāo)本，換一種靈敏度不及CMIA的方法來(lái)檢測(cè)，很可能會(huì)出現(xiàn)陰性結(jié)果，這種時(shí)陰時(shí)陽(yáng)的結(jié)果容易引起醫(yī)患糾紛，必須引起足夠的重視。所以本次研究建議在條件允許的情況下，特別是當(dāng)HBsAg為低濃度值(<2IU/ml)時(shí)，應(yīng)進(jìn)行HBsAg抗體中和確認(rèn)試驗(yàn)，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，避免差錯(cuò)的發(fā)生。