□ 張登洲 李小燕 張鈺杰 李潔笠 四川省廣安市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局

1 能力驗證的概念和目的

1.1 能力驗證的概念

能力驗證是外部質(zhì)量控制的一種重要手段。是指利用實驗室間比對來確定實驗室檢測/校準(zhǔn)能力的活動。它是確保實驗室具有較高檢測水平而對其能力進(jìn)行考核、監(jiān)督和確認(rèn)的一種驗證活動。參加能力驗證計劃，可以評價實驗室出具的數(shù)據(jù)的可靠性和有效性。

1.2 能力驗證的意義

1.2.1 識別實驗室間的差異

能力驗證是保證實驗室檢測質(zhì)量的外部工具，將實驗室所得結(jié)果與真實值對比，識別與同行機(jī)構(gòu)之間的差異，從而識別實驗室結(jié)果與參考值（參照值）以及實驗室之間的差異。為自身的持續(xù)改進(jìn)和質(zhì)量管理提供信息。

1.2.2 重要的監(jiān)管手段

行政主管部門、市場監(jiān)督和管理機(jī)構(gòu)、評價機(jī)構(gòu)、客戶等可利用能力驗證結(jié)果，判斷本實驗室是否具有從事開展項目檢測的能力，監(jiān)控他們的檢測能力狀況。

1.2.3 人員培訓(xùn)的工具

通過比較實驗結(jié)果的回收率與真值之間的差異來分析檢測過程中的問題，達(dá)到培訓(xùn)技術(shù)人員的目的。

1.2.4 管理的工具

實驗室可能存在諸多風(fēng)險，如檢測結(jié)果不準(zhǔn)確，檢測過程存在安全風(fēng)險。參加能力驗證能識別各種風(fēng)險造成的質(zhì)量缺陷，是一種重要的風(fēng)險管理工具。

1.2.5 質(zhì)量改進(jìn)的工具

能力驗證是重要的質(zhì)量改進(jìn)工具。在能力驗證中，如果實驗室的結(jié)果與指定值之間存在明顯的差異，則實驗室應(yīng)該調(diào)查潛在的誤差或不滿意結(jié)果的來源，識別存在的問題并啟動糾正與預(yù)防措施。

基于能力驗證的重要性，檢測機(jī)構(gòu)應(yīng)該充分重視能力驗證工作。下面以氣相色譜法測定蔬菜水果中農(nóng)藥殘留量能力驗證為例，探索如何將能力驗證工作步驟標(biāo)準(zhǔn)化。

2 色譜法測定蔬菜水果中農(nóng)藥殘留量能力驗證標(biāo)準(zhǔn)化步驟

蔬菜水果中農(nóng)藥殘留測定技術(shù)目前以氣相色譜法和質(zhì)譜法測定為主。由于受設(shè)備限制，以氣相色譜法測定較為常見。下面以NY/T 761—2008 即《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》方法為例，介紹如何實現(xiàn)能力驗證標(biāo)準(zhǔn)化。

2.1 方法簡介及關(guān)鍵技術(shù)

NY/T 761—2008 方法能檢測54 種有機(jī)磷類農(nóng)藥，41 種有機(jī)氯和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥，10 種氨基甲酸酯類農(nóng)藥及其代謝物。

前處理流程（以有機(jī)氯類農(nóng)藥前處理為例，其他類參照標(biāo)準(zhǔn)）如下。稱取25 g 樣品，加入50 mL 乙腈高速（15 000 r/min）勻漿2 min，過濾到含5 ～7 g 氯化鈉的100 mL 具塞量筒中，振蕩1 min 后靜置30 min；分取乙腈層10 mL，80 ℃水浴氮氣蒸近干，加入2 mL 正己烷，依次5 mL 丙酮+正己烷（10+90），5 mL 正己烷預(yù)淋/弗羅里矽柱，5 mL 丙酮＋正己烷（10 ＋90）淋洗，重復(fù)一次，50 ℃水浴氮吹至小于5 mL，正己烷定容至5 mL。ECD GC 檢測。

實驗中的關(guān)鍵點：樣品必須采用溶劑多次洗滌方式進(jìn)行完全取轉(zhuǎn)移。必須采用含基質(zhì)的溶劑配制標(biāo)液。含水量多的樣品中加入的氯化鈉不少于7 g，確保水層全部在底層并與有機(jī)溶劑分離。

2.2 能力驗證標(biāo)準(zhǔn)化步驟

讀懂監(jiān)管機(jī)構(gòu)（或考核機(jī)構(gòu)）的方法作業(yè)指導(dǎo)書和標(biāo)準(zhǔn)的要求。監(jiān)管機(jī)構(gòu)一般每年會以文件的形式對能力驗證的具體要求作出安排，文件一般會提前公布，考核機(jī)構(gòu)在執(zhí)行能力驗證考核時會出具方法作業(yè)指導(dǎo)書。若無作業(yè)指導(dǎo)書，一般以要求的檢測方法標(biāo)準(zhǔn)作為評定依據(jù)。比如四川省2020年農(nóng)藥殘留量測定能力驗證作業(yè)指導(dǎo)書中明確了樣品狀況描述及結(jié)果判定依據(jù)。能力驗證的樣品本底A 樣品為茄子，B 為蘋果；發(fā)樣時為每個參與能力驗證單位提供A、B 樣品各4 個，其中平行添加樣品各3 個，空白樣品（CK）各1 個，每個樣品的稱樣量均為25.00 g。以加標(biāo)回收率作為判定指標(biāo)，回收率70%～130%為合格，回收率小于70%，大于130%為不合格。具體要求見表1。

表1 四川省2020 年農(nóng)藥殘留量測定能力相關(guān)要求

2.3 設(shè)計能力驗證模擬實驗方案并組織技術(shù)練兵

2.3.1 多濃度梯度質(zhì)控樣品的測定

能力驗證模擬實驗方案的關(guān)鍵點是多濃度梯度質(zhì)控樣品的添加回收率測算。以2020 年四川省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測能力驗證為例，本實驗室的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（甲拌磷、樂果）母液濃度為4 μg/mL，樣品為25.00 g，一般采用添加0.3、0.5、1、1.5 mL 與2 mL混合標(biāo)準(zhǔn)溶液作為質(zhì)控樣品，5 個添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的濃度分別為0.048、0.08、0.16、0.24 μg/mL 與0.32 μg/mL?；靖采w方法的檢出限及日常檢測定量限要求。該濃度梯度數(shù)據(jù)對色譜法中采用非線性擬合的方式進(jìn)行單點定量，具有良好準(zhǔn)確性和抗干擾性。在日常準(zhǔn)備工作中，按照NY/T 761—2008前處理流程完成以上5 個添加樣品和空白樣品的測定。

2.3.2 基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

所謂基質(zhì)溶劑是指稱取25.00 g樣品，嚴(yán)格按照NY/T 761—2008 前處理要求制備，最終形成的空白基質(zhì)溶液。模擬實驗特別需要注意的是標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制，必須采用基質(zhì)溶劑進(jìn)行配制，即基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液。采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的目的是降低色譜儀的基質(zhì)效應(yīng)?；|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度一般以0.1 μg/mL 和0.2 μg/mL 較好。

2.3.3 完善測定結(jié)果原始記錄

按照原始記錄要求計算每個添加樣品的結(jié)果值。

2.3.4 計算質(zhì)控樣品回收率并分析實驗問題

回收率=測定值/添加農(nóng)藥真值×100%。根據(jù)每個樣品的結(jié)果值，計算添加樣品回收率，看看回收率是否在70%～130%。如出現(xiàn)回收率不達(dá)標(biāo)問題，應(yīng)進(jìn)行系統(tǒng)性分析，排除每個環(huán)節(jié)的因素，確保良好的回收率。

2.4 做好能力驗證考核樣品實驗

2.4.1 完全轉(zhuǎn)移

上級考核機(jī)構(gòu)一般使用的是稱取好重量的樣品，并進(jìn)行了農(nóng)藥添加，即加標(biāo)。由于樣品質(zhì)量參與計算，農(nóng)藥附著在樣品上，所以對樣品的完全轉(zhuǎn)移至關(guān)重要。一般采取用50 mL 容量瓶準(zhǔn)確量取50.00 mL 乙腈，多次沖洗離心管。

2.4.2 多濃度梯度質(zhì)控樣品與考核樣品的同步驟前處理

能力驗證實驗方案的關(guān)鍵點是采用多濃度梯度質(zhì)控樣品的添加回收測定與考核樣品的同步測定。根據(jù)作業(yè)指導(dǎo)書要求，實驗室采用的甲拌磷、樂果混合標(biāo)準(zhǔn)溶液母液濃度為4 μg/mL，樣品為25.00 g，添加0.3、0.5、1 mL、1.5 mL 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液到質(zhì)控樣品中，4 個質(zhì)控樣品中甲拌磷和樂果的的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.048、0.08、0.16 mg/kg與0.24 mg/kg。有條件的可以多增加1 個或者2 個平行樣品，以監(jiān)測儀器狀態(tài)、前處理狀態(tài)。質(zhì)控樣品與考核樣品同步驟、同方法進(jìn)行前處理。

2.4.3 基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

配制兩種基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液。蘋果基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度0.1 μg/mL 和0.2 μg/mL。茄子基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度也為0.1 μg/mL 和0.2 μg/mL。條件允許可以多配一個0.05 μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)混合溶液。

2.4.4 測定結(jié)果計算

按照原始記錄要求計算每個添加樣品的結(jié)果值?？偨Y(jié)該農(nóng)藥的特性，分析考核樣品的濃度。參考質(zhì)控樣品的回收率，判斷實驗過程是否存在問題。

2.5 按照數(shù)據(jù)修約要求上報檢測結(jié)果，計算精密度

能力驗證作業(yè)指導(dǎo)書上規(guī)定了有效數(shù)據(jù)位數(shù)，一般計算過程中的數(shù)據(jù)比最終上報的平均值多一位有效數(shù)字。精密度一般采用RSD 值或者重復(fù)性限r(nóng) 計算。重復(fù)性限r(nóng) 采用線性內(nèi)插法進(jìn)行計算。

3 結(jié)論

能力驗證是實驗室外部質(zhì)量控制的重要手段和工具。主要作用是識別實驗室間的差異，是重要的監(jiān)管手段，人員培訓(xùn)工具，風(fēng)險管理工具及質(zhì)量改進(jìn)工具。以蔬菜水果等農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留實驗室能力驗證工作為探索起點，通過探索得出，采用標(biāo)準(zhǔn)化步驟有助于提高實驗室的檢測技術(shù)水平，提高實驗室質(zhì)量管理能力，有助于識別檢測環(huán)節(jié)中的問題，有助于全面落實實驗室的質(zhì)量管理和技術(shù)管理工作。