王燁，王強(qiáng)，孔令彩，張然樓，孟凡全

（山東省臨沂市中醫(yī)醫(yī)院，山東 臨沂）

0 引言

尿路上皮癌是發(fā)生在泌尿系統(tǒng)尿路上皮的一種惡性腫瘤，分為上尿路上皮癌和下尿路上皮癌，其中又以下尿路上皮癌特別是膀胱尿路上皮癌最常見，約占90%，其余尿路部位較為少見，僅占5%。其在泌尿系統(tǒng)腫瘤患者中具有較高的發(fā)病率，對該病進(jìn)行準(zhǔn)確的診斷有助于患者的盡早治療，對于提高腫瘤的治療效果，改善患者生活質(zhì)量，延長生存期具有一定的積極意義。隨著DNA定量分析技術(shù)的深入研究，該項(xiàng)技術(shù)用于評估患者是否存在惡性腫瘤具有廣闊的前景，且具有標(biāo)本采集方便、安全、無創(chuàng)等優(yōu)勢，有助于對患者的病情進(jìn)行評估。對于臨床工作人員而言，該診斷方式具有靈敏性、準(zhǔn)確性高的特點(diǎn)[1]。本項(xiàng)研究以90例患者為研究對象，對比分析細(xì)胞DNA定量分析技術(shù)與液基細(xì)胞學(xué)檢查（TCT）對膀胱尿路上皮癌診斷的應(yīng)用價(jià)值，詳細(xì)情況如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集我院2018年1月至2019年1月收治的90例膀胱尿路上皮癌患者作為研究對象，男性54例，女性36例，男女比1.5:1，年齡28～86歲，平均（59.31±6.40）歲，均給予細(xì)胞DNA定量分析與TCT檢查，且患者最終均進(jìn)行膀胱內(nèi)鏡活檢，經(jīng)病理檢查確診。所有患者均知情同意本次研究，且經(jīng)我院倫理有關(guān)部門批準(zhǔn)。

1.2 方法

標(biāo)本采集：取患者清晨首次中段尿液200 mL，將標(biāo)本放置于離心管之中，進(jìn)行離心處理，2000 r/min，時(shí)間為10 min，取部分沉淀細(xì)胞，使用沉降式液基染色機(jī)（北京鑫諾美迪基因檢測技術(shù)有限公司提供）制作1張薄層細(xì)胞片，進(jìn)行巴氏染色；另取部分細(xì)胞使用涂片離心機(jī)用于制成薄層細(xì)胞片，進(jìn)行DNA染色程序（Feulgen染色法）。

TCT診斷：巴氏染色（廣州市達(dá)誠醫(yī)療技術(shù)有限公司）片由我科經(jīng)驗(yàn)豐富主治職稱以上醫(yī)師三人分別復(fù)診，依據(jù)巴氏染色分級，診斷結(jié)果可分為4級：Ⅰ級，未見腫瘤細(xì)胞；Ⅱ級，可見少數(shù)異型細(xì)胞；Ⅲ級，可見可疑癌細(xì)胞；Ⅳ級，可見癌細(xì)胞。最終Ⅰ級與Ⅱ級定為陰性診斷，Ⅲ級與Ⅳ級定為陽性診斷。

細(xì)胞DNA定量分析：對DNA染色的薄層細(xì)胞片，采用全自動細(xì)胞圖像分析系統(tǒng)[麥克奧迪（廈門）醫(yī)療診斷系統(tǒng)有限公司]對DNA染色片進(jìn)行處理，通過測定細(xì)胞核中染色質(zhì)的IOD值對細(xì)胞染色質(zhì)含量進(jìn)行判定，并使用DNA指數(shù)表示。結(jié)果可分為3種：（1）DNA指數(shù)為2，表示以正常2倍體細(xì)胞為主，未見異倍體細(xì)胞；（2）具有DNA指數(shù)高于2.5或小于2的細(xì)胞，且被檢測出細(xì)胞數(shù)量高于細(xì)胞總數(shù)10%；（3）出現(xiàn)大量DNA指數(shù)超過2.5的細(xì)胞或檢測到異倍體細(xì)胞峰。第一種為陰性，第二、三種判定為陽性。

病理診斷：對TCT及細(xì)胞DNA定量分析技術(shù)檢查結(jié)果為陽性的病人要進(jìn)一步進(jìn)行膀胱內(nèi)鏡活檢，并且對于檢查結(jié)果為陰性的，但仍然存在臨床癥狀的病人同樣要進(jìn)行膀胱內(nèi)鏡活檢，活檢標(biāo)本經(jīng)常規(guī)病理處理（日本櫻花自動脫水機(jī)），石蠟包埋切片，HE染色，活檢病理切片經(jīng)我科經(jīng)驗(yàn)豐富主治職稱以上醫(yī)師三人分別復(fù)診。依據(jù)尿路上皮癌WHO/ISUP分類系統(tǒng)進(jìn)行分級[2]，依據(jù)乳頭及固有層浸潤的組織學(xué)模式進(jìn)行浸潤判斷[3]。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察兩組檢查方式診斷準(zhǔn)確率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

將數(shù)據(jù)納入SPSS 18.0軟件中分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ ±s）表示，計(jì)數(shù)資料用率（%）表示，采用t和χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

經(jīng)膀胱鏡活檢病理檢查90例尿路上皮癌患者，依據(jù)WHO/ISUP分類系統(tǒng)其中69例為低級別（77%），21例為高級別（23%）。依據(jù)乳頭及固有層浸潤的組織學(xué)模式非浸潤性病變71例（79%），浸潤性病變19例（21%）。此90例患者尿液分別經(jīng)細(xì)胞DNA定量分析與液基細(xì)胞學(xué)檢查，其中細(xì)胞DNA定量分析檢出率為98.9%，液基細(xì)胞學(xué)檢查檢出率為80.0%，兩種檢查方式對比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），詳見表1。

表1 兩種檢查方式準(zhǔn)確率對比（n, %）

3 討論

泌尿系統(tǒng)尿路上皮癌在臨床中較為常見，在腎盂、輸尿管、膀胱以及前列腺等部位均可能發(fā)生。對尿路上皮癌診斷的方式較多，常見的有影像學(xué)檢查、膀胱鏡檢查、尿液分析以及尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查等[4]，其中內(nèi)鏡下活檢病理檢查是公認(rèn)的診斷此種疾病的金標(biāo)準(zhǔn)，但內(nèi)鏡檢查屬于介入性檢查方式，患者較痛苦。而影像學(xué)檢查雖能夠?qū)δ[瘤進(jìn)行分級評估，但所用造影劑對于患者的腎功能存在影響，且無法對原位癌進(jìn)行檢測，使用范圍受到限制[5]。尿脫落細(xì)胞學(xué)的方法，又受到腫瘤的大小、分期、個體差異及腫瘤侵襲能力等客觀因素的影響，尿液中脫落腫瘤細(xì)胞多少存在較大差異，且形態(tài)缺乏典型性等，雖可輔以免疫細(xì)胞化學(xué)的方法，但其敏感性較低，極容易出現(xiàn)誤診的情況[6-7]。

據(jù)研究表明，當(dāng)機(jī)體細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，其細(xì)胞核中的DNA含量顯著升高，且DNA含量變化能夠直接反應(yīng)細(xì)胞的增殖能力[8]。DNA含量較高的腫瘤，在分化、轉(zhuǎn)移以及復(fù)發(fā)等方面具有顯著的惡性生物學(xué)行為。DNA含量以及倍體的變化能夠有效的反應(yīng)細(xì)胞的增殖狀態(tài)，異多倍體屬于判斷惡性腫瘤的主要指標(biāo)之一。細(xì)胞DNA定量分析正是基于以上理論進(jìn)行的技術(shù)開發(fā)。對尿脫落細(xì)胞DNA含量進(jìn)行檢測能夠作為診斷尿路上皮癌的依據(jù)。研究證明，該檢查方式在口腔癌、宮頸癌、肺癌等方面均具有較高的診斷價(jià)值。

本研究中，細(xì)胞DNA定量分析的診斷準(zhǔn)確率顯著高于TCT，組間數(shù)據(jù)對比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示對膀胱尿路上皮癌患者給予細(xì)胞DNA定量分析能夠取得理想的結(jié)果，在一定程度上防止誤診、漏診，實(shí)現(xiàn)了檢測的自動化、標(biāo)準(zhǔn)化、高效率。對于無血尿等表現(xiàn)的患者，可先進(jìn)行TCT檢查，對于可疑者再給予細(xì)胞DNA定量分析檢查，避免誤漏診情況的發(fā)生。

綜上所述，細(xì)胞DNA定量分析在診斷膀胱尿路上皮癌方面具有準(zhǔn)確、安全、無創(chuàng)、高效等優(yōu)點(diǎn)，能夠?qū)ΤＲ?guī)細(xì)胞學(xué)診斷方式的不足之處進(jìn)行彌補(bǔ)，具有較高的敏感性，可有效減少臨床誤診和漏診，使患者盡早確診，盡早治療，應(yīng)用價(jià)值高，值得在臨床推廣使用。