姚夢(mèng)莉，陳向華，陳朝暉*，王 海

1 安徽中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，安徽 合肥230038；2 安徽中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院，安徽 合肥230038；3 徐州市中醫(yī)院，江蘇 徐州221000

* 通信作者：陳朝暉，E-mail：czhn007@163.com

脊髓缺血再灌注損傷（spinal cord ischemic reperfusion injury，SCII）是脊髓組織經(jīng)歷一段時(shí)間缺血再次恢復(fù)血供后，脊髓組織功能結(jié)構(gòu)損傷加重，甚至脊髓神經(jīng)元發(fā)生不可逆性損傷［1］。 它是一種嚴(yán)重的繼發(fā)性損傷，是臨床上造成主動(dòng)脈瘤、脊柱骨折、骶管腫瘤等手術(shù)術(shù)后截癱的最主要原因，其發(fā)生率可達(dá)10%～40%，對(duì)患者的身心健康造成嚴(yán)重危害。SCII 與脊髓組織的原發(fā)性損傷不同，其屬于二次損傷，具有可預(yù)見(jiàn)性，因此早預(yù)防、早治療十分必要。已有研究證實(shí)，炎癥反應(yīng)是影響SCII 病理進(jìn)程的重要因素［2］，因此抑制炎癥反應(yīng)是治療SCII 的可行策略之一。 目前電針廣泛應(yīng)用于脊髓損傷的臨床治療，療效顯著，對(duì)于其在SCII 的應(yīng)用多集中于基礎(chǔ)研究［2-3］。有研究表明，電針具有減輕炎癥反應(yīng)、緩解疼痛，改善脊髓水腫、保護(hù)神經(jīng)元等功效［4］。功能性磁共振成像（functional magnetic resonance imaging，fMRI）和彌散張量纖維束成像（diffusion tensor imaging，DTI）則顯示［5-6］，電針可激活脊柱功能區(qū)，調(diào)整脊柱纖維束形態(tài)，恢復(fù)脊柱功能結(jié)構(gòu)。 本研究通過(guò)電針預(yù)處理SCII 模型兔，觀察不同時(shí)點(diǎn)白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等致炎因子和白細(xì)胞介素-1 受體拮抗劑（IL-1Rα）抗炎因子的變化，進(jìn)一步明確電針預(yù)處理SCII 的免疫機(jī)制，為臨床治療SCII 提供依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

安徽中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供成年健康SPF 級(jí)新西蘭大白兔24 只，雌雄各半，單籠飼養(yǎng)，自由飲水?dāng)z食，體質(zhì)量2.0～2.5 kg。 實(shí)驗(yàn)遵循《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理與使用指南》［7］，并通過(guò)安徽中醫(yī)藥大學(xué)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（批號(hào)：AHUCM-rabbits-2019010）。

1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑與設(shè)備

烏拉坦（武漢久安藥業(yè)有限公司）；30%過(guò)氧化氫（武漢久安藥業(yè)有限公司）；DAB 染色劑和IL-1β+bs-0812R（均購(gòu)自上海蘇懿化學(xué)試劑有限公司）；兔IL-1β 試劑盒、兔IL-6 試劑盒、兔TNF-α 試劑盒、兔IL-1Rα 試劑盒（均購(gòu)自上海三發(fā)科學(xué)儀器有限公司）；光學(xué)顯微鏡（日本奧林巴斯公司，Nikon牌）；毫針（合肥有為康設(shè)備有限公司，華佗牌1.5 寸）；酶標(biāo)儀（深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司，RT-6000）；電針儀（合肥有為康設(shè)備有限公司，SDZ-II型）。

1.3 分組及模型制備

1.3.1 實(shí)驗(yàn)分組 將24 只新西蘭大白兔按照隨機(jī)數(shù)字表法分為模型組、假手術(shù)組、電針組，每組8 只。

1.3.2 模型制備 采用Zivin 法［8］進(jìn)行造模。 術(shù)前禁食12 h。 20%的烏拉坦（6 mL／kg）耳緣靜脈注射麻醉，兔仰臥位固定，手術(shù)范圍內(nèi)備皮，常規(guī)消毒，氣管插管，保持呼吸道。 距兔劍突下約1 寸處行腹部正中切口，切口長(zhǎng)度約3～4 cm，清潔紗布包裹大網(wǎng)膜和胃腸管，推開(kāi)并暴露腹主動(dòng)脈，鈍性分離約0.5 cm，以腎上腺為標(biāo)志，靠近右腎動(dòng)脈的近心端起始部夾閉腹主動(dòng)脈，當(dāng)觸及腹主動(dòng)脈遠(yuǎn)端波動(dòng)感消失開(kāi)始計(jì)時(shí)，用血管鉗把切口進(jìn)行臨時(shí)夾閉，30 min后取出動(dòng)脈夾，確定腹主動(dòng)脈遠(yuǎn)端搏動(dòng)恢復(fù)后，無(wú)菌紗布清除腹腔滲出液，復(fù)位胃腸等器官，逐層縫合，關(guān)閉腹腔。 假手術(shù)組不夾閉腹主動(dòng)脈，其余步驟相同。 保持室內(nèi)溫度22 ℃，注意動(dòng)物保暖直至清醒，術(shù)后予以青霉素抗感染治療4 d，正常飲水?dāng)z食。

1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處理

1.4.1 模型組 造模成功后，連續(xù)4 d 給予青霉素20 萬(wàn)U／d 肌肉注射，飼料喂養(yǎng)，正常飲水、自由活動(dòng)。

1.4.2 假手術(shù)組 模型制備及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處理同模型組，但不夾閉腹主動(dòng)脈。

1.4.3 電針組 兔脊髓缺血再灌注模型誘導(dǎo)前30 min進(jìn)行電針干預(yù)治療，采用SDZ-II 型電針儀，參照《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》［9］的操作方法，針刺雙側(cè)“懸鐘”和“陽(yáng)陵泉”2 個(gè)穴位。電針參數(shù)：疏密波，10 Hz，電針強(qiáng)度要讓肢體保持輕微顫動(dòng)，治療時(shí)間為30 min［10］。

1.5 觀察指標(biāo)及方法

1.5.1 IL-1β、IL-6、TNF-α 和IL-1Rα 檢測(cè) 分別于造模前0 h 及缺血再灌注后4、8、12 h 這4 個(gè)時(shí)間點(diǎn)采集兔股靜脈血2 mL 于試管中，靜置30 min后以3 000 r／min 的速度將血液離心20 min，然后移液器取上清液，置于-20 ℃冰箱中保存待測(cè)。采用ELISA 法檢測(cè)血清 中IL-1β、IL-6、TNF-α 和IL-1Rα 的表達(dá)，檢測(cè)嚴(yán)格按照ELISA試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。

1.5.2 脊髓組織變化觀察 取血完成后采用耳緣靜脈空氣栓塞法處死兔，確定L2～5的位置，使用咬骨鉗咬斷棘突和椎板，手術(shù)刀清理脊柱周圍軟組織，手術(shù)剪剪斷附著的脊神經(jīng)根，取出L2～5段的脊髓組織后，用生理鹽水沖洗干凈，固定于10%的福爾馬林溶液中，再經(jīng)過(guò)脫鈣、脫水、透明、石蠟包埋等步驟將標(biāo)本制作成蠟塊，切片，厚度約為5 mm，行蘇木精-伊紅染色（HE 染色），光學(xué)顯微鏡下觀察脊髓組織變化并采集照片。

1.5.3 IL-1β、IL-6、TNF-α 定位及表達(dá)檢測(cè) 取上述蠟塊，切片、脫蠟，3% H2O2水孵育5 min，磷酸緩沖鹽溶液（phosphate buffer saline，PBS）沖洗干凈，滴加一抗后PBS 沖洗，接著滴加二抗室溫孵育10 min，PBS 再次沖洗，然后使用DAB 溶液讓脊髓組織顯色，經(jīng)過(guò)沖洗、復(fù)染、脫水、封片步驟，最后在光學(xué)顯微鏡下觀察并采集照片。 兔脊髓組織中IL-1β 的表達(dá)以間質(zhì)及胞漿被染成棕褐色為陽(yáng)性表達(dá)，IL-6、TNF-α 的陽(yáng)性表達(dá)則為神經(jīng)元胞漿及突起中被染成棕褐色。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

利用SPSS 23.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 計(jì)量資料服從正態(tài)分布采用（±s）表示，各組兔血清中多時(shí)點(diǎn)炎癥因子含量符合正態(tài)分布，采用重復(fù)測(cè)量方差分析，兩兩比較采用LSD-t法；各組兔脊髓組織中蛋白平均灰度值滿足獨(dú)立、正態(tài)、方差齊性，組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t法。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 3 組兔脊髓組織形態(tài)學(xué)變化

研究結(jié)果顯示，假手術(shù)組兔脊髓組織中神經(jīng)元輪廓清晰，胞體較大且圓潤(rùn)，胞漿染色均勻，胞核及核仁完整清楚，樹(shù)突、軸突完整存在，整個(gè)組織的結(jié)構(gòu)較為清楚、完整。 模型組兔脊髓組織中神經(jīng)元數(shù)目減少，細(xì)胞胞核及胞漿染色變淺，胞核固縮或消失，核膜的邊界不清晰，或者核破碎、或者核溶解甚至出現(xiàn)核仁消失，軸突出現(xiàn)擴(kuò)大或腫脹或消失等病理改變，神經(jīng)細(xì)胞的周圍存有透亮區(qū)，甚至壞死后留下空腔。 與模型組比較，電針組神經(jīng)元的數(shù)目增加，變形、壞死減少，其結(jié)構(gòu)也更為清晰，細(xì)胞胞核及胞漿染色變深，胞核及核仁輕度腫脹，萎縮減輕，神經(jīng)元的存活密度增加，整體破壞程度減輕。 見(jiàn)圖1。

圖1 3 組兔脊髓組織病理顯微結(jié)構(gòu)（HE 染色×400）Figure 1 Pathological microstructure of spinal cord tissue in three groups of rabbits （HE staining×400）

2.2 3 組兔炎癥因子表達(dá)變化

2.2.1 3 組IL-1β 含量比較 見(jiàn)表1。

2.2.2 3 組IL-6 含量比較 見(jiàn)表2。

2.2.3 3 組TNF-α 含量比較 見(jiàn)表3。

表1 3 組兔脊髓缺血再灌注損傷IL-1β 水平比較（±s） 匹克／毫升Table 1 Comparison of IL-1β level in spinal cord ischemia-reperfusion injury of rabbits in three groups （±s）pg／mL

表1 3 組兔脊髓缺血再灌注損傷IL-1β 水平比較（±s） 匹克／毫升Table 1 Comparison of IL-1β level in spinal cord ischemia-reperfusion injury of rabbits in three groups （±s）pg／mL

注：與模型組缺血前比較，1） P＜0.05；與假手術(shù)組同一時(shí)間點(diǎn)比較，2） P＜0.05；與模型組同一時(shí)間點(diǎn)比較，3） P＜0.05。Note: Compared with the model group before ischemia, 1) P＜0.05; Compared with the sham operation group at the same time,2) P＜0.05; Compared with the model group at the same time, 3) P＜0.05.

組別假手術(shù)組模型組電針組n 8 8 8缺血前24.38±1.49 24.42±2.20 24.16±1.59再灌注后4 h 23.86±1.09 42.90±1.971）2）28.36±1.002）3）8 h 25.10±1.05 66.24±1.761）2）37.97±1.352）3）12 h 24.83±1.38 67.53±2.071）2）41.03±1.592）3）

2.2.4 3 組IL-1Rα 含量比較 見(jiàn)表4。

2.3 3 組兔促炎因子定位及表達(dá)變化

假手術(shù)組無(wú)特殊陽(yáng)性表達(dá)，著色均勻。 模型組胞核著色不均或不著色，IL-1β 大量表達(dá)在細(xì)胞間質(zhì)及胞漿中，IL-6 和TNF-α 則大量表達(dá)在神經(jīng)元胞漿及突起中。 電針組間質(zhì)及胞漿中IL-1β、IL-6、TNF-α 的表達(dá)明顯減少，見(jiàn)圖2、圖3、圖4。 與假手術(shù)組同一時(shí)間點(diǎn)比較，模型組與電針組IL-1β、IL-6、TNF-α 的含量表達(dá)均明顯上升，模型組含量最高，電針組次之；與模型組同一時(shí)間點(diǎn)比較，電針組IL-1β、IL-6、TNF-α 的含量表達(dá)明顯下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見(jiàn)表5。

表2 3 組兔脊髓缺血再灌注損傷IL-6 水平比較（±s） 匹克／毫升Table 2 Comparison of IL-6 level in spinal cord ischemia-reperfusion injury of rabbits in three groups （±s）pg／mL

表2 3 組兔脊髓缺血再灌注損傷IL-6 水平比較（±s） 匹克／毫升Table 2 Comparison of IL-6 level in spinal cord ischemia-reperfusion injury of rabbits in three groups （±s）pg／mL

注：與模型組缺血前比較，1） P＜0.05；與假手術(shù)組同一時(shí)間點(diǎn)比較，2） P＜0.05；與模型組同一時(shí)間點(diǎn)比較，3） P＜0.05。Note: Compared with the model group before ischemia, 1) P＜0.05; Compared with the sham operation group at the same time,2) P＜0.05; Compared with the model group at the same time, 3) P＜0.05.

組別假手術(shù)組模型組電針組n 8 8 8缺血前123.51±4.66 119.47±5.63 120.85±3.70再灌注后4 h 121.92±2.67 174.24±6.021）2）193.74±2.522）3）8 h 125.97±3.74 205.40±4.251）2）231.91±3.272）3）12 h 127.78±1.82 252.77±3.421）2）227.24±2.252）3）

表3 3 組兔脊髓缺血再灌注損傷TNF-α 水平比較（±s） 匹克／毫升Table 3 Comparison of TNF-α level in spinal cord ischemia-reperfusion injury of rabbits in three groups （±s）pg／mL

表3 3 組兔脊髓缺血再灌注損傷TNF-α 水平比較（±s） 匹克／毫升Table 3 Comparison of TNF-α level in spinal cord ischemia-reperfusion injury of rabbits in three groups （±s）pg／mL

注：與模型組缺血前比較，1） P＜0.05；與假手術(shù)組同一時(shí)間點(diǎn)比較，2） P＜0.05；與模型組同一時(shí)間點(diǎn)比較，3） P＜0.05。Note: Compared with the model group before ischemia, 1) P＜0.05; Compared with the sham operation group at the same time,2) P＜0.05; Compared with the model group at the same time, 3) P＜0.05.

組別假手術(shù)組模型組電針組n 8 8 8缺血前173.28±3.40 170.90±6.67 172.24±5.04再灌注后4 h 176.31±4.37 438.14±5.121）2）376.95±4.572）3）8 h 174.43±3.92 479.51±4.281）2）416.88±2.832）3）12 h 176.54±4.93 447.66±8.501）2）380.78±8.862）3）

表4 3 組兔脊髓缺血再灌注損傷IL-1Rα 水平比較（±s） 匹克／毫升Table 4 Comparison of IL-1Rα level in spinal cord ischemia-reperfusion injury of rabbits in three groups （±s）pg／mL

表4 3 組兔脊髓缺血再灌注損傷IL-1Rα 水平比較（±s） 匹克／毫升Table 4 Comparison of IL-1Rα level in spinal cord ischemia-reperfusion injury of rabbits in three groups （±s）pg／mL

注：與模型組缺血前比較，1） P＜0.05；與假手術(shù)組同一時(shí)間點(diǎn)比較，2） P＜0.05；與模型組同一時(shí)間點(diǎn)比較，3） P＜0.05。Note: Compared with the model group before ischemia, 1) P＜0.05; Compared with the sham operation group at the same time,2) P＜0.05; Compared with the model group at the same time, 3) P＜0.05.

組別假手術(shù)組模型組電針組n 8 8 8缺血前97.20±2.68 98.00±3.19 97.37±4.96再灌注后4 h 99.47±3.15 131.07±2.981）2）148.46±8.152）3）8 h 98.86±2.96 136.24±4.311）2）133.75±7.832）12 h 96.15±2.17 101.13±2.87 108.05±3.222）

圖2 3 組兔脊髓組織IL-1β 陽(yáng)性表達(dá)（×200）Figure 2 Positive expression of IL-1β in spinal cord tissue of rabbits in three groups (×200)

圖3 3 組兔脊髓組織IL-6 陽(yáng)性表達(dá)（×200）Figure 3 Positive expression of IL-6 in spinal cord tissue of rabbits in three groups (×200)

圖4 3 組兔脊髓組織TNF-α 陽(yáng)性表達(dá)（×200）Figure 4 Positive expression of TNF-α in spinal cord tissue of rabbits in three groups (×200)

表5 3 組兔脊髓IL-1β、IL-6、TNF-α 陽(yáng)性AOD 值比較（±s）Table 5 Comparison of positive AOD values of IL-1β，IL-6 and TNF-α in spinal cord of rabbits in three groups （±s）

表5 3 組兔脊髓IL-1β、IL-6、TNF-α 陽(yáng)性AOD 值比較（±s）Table 5 Comparison of positive AOD values of IL-1β，IL-6 and TNF-α in spinal cord of rabbits in three groups （±s）

注：與假手術(shù)組比較，1） P＜0.05；與模型組比較，2） P＜0.05。Note: Compared with the sham operation group, 1) P＜0.05; Compared with the model group, 2) P＜0.05.

TNF-α 0.23±0.002 2 0.49±0.001 31）0.33±0.002 41）2）組別假手術(shù)組模型組電針組n 5 5 5 IL-1β 0.36±0.002 8 0.48±0.002 81）0.39±0.002 61）2）IL-6 0.35±0.003 0 0.44±0.004 11）0.39±0.002 91）2）

3 討 論

炎癥因子分為促炎因子和抑炎因子兩部分，在發(fā)生損傷的早期階段，機(jī)體會(huì)分泌適量的促炎因子建立防御機(jī)制，抵御傷害。 在各種因素的影響下，機(jī)體自身的調(diào)節(jié)功能失衡，會(huì)產(chǎn)生過(guò)量的促炎因子，引起瀑布樣炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)失控，引發(fā)全身炎癥反應(yīng)綜合征，甚至多器官功能障礙綜合征等嚴(yán)重后果，造成器官和軀體損害。 SCII 就是脊髓炎癥反應(yīng)失控的一種表現(xiàn)，在脊髓缺血再灌注過(guò)程中，免疫炎癥反應(yīng)傾向于造成脊髓損傷。

3.1 脊髓缺血再灌注損傷后TNF-α、IL-6、IL-1β及IL-1Rα 等炎癥因子表達(dá)明顯上升

ELISA 法檢測(cè)結(jié)果顯示，與假手術(shù)組比較，模型組促炎因子TNF-α、IL-6、IL-1β 與抑炎因子IL-1Rα 在再灌注4、8、12 h 均有不同程度的上升；此外，免疫組化分析結(jié)果顯示模型組促炎因子表達(dá)也明顯上升，其表達(dá)位置集中在神經(jīng)元胞漿中。 這提示促炎因子與抑炎因子均參與了脊髓炎癥反應(yīng)。 炎癥反應(yīng)發(fā)生可能會(huì)造成脊髓組織損傷， 本研究的HE 染色結(jié)果證實(shí)了這一觀點(diǎn)。 模型組兔脊髓組織光鏡下顯示脊髓組織中神經(jīng)元數(shù)量減少，細(xì)胞胞核及胞漿著色較淺，胞核固縮或消失等病理變化。 IL-1Rα 是一種天然抗炎劑，其與IL-1β 受體結(jié)合切斷IL-1β 生物活性，具有很好的抗炎作用。IL-1Rα 水平在再灌注后4 h 有明顯表達(dá)，再灌注后8 h 時(shí)達(dá)到高峰，再灌注后12 h 時(shí)呈下降趨勢(shì)；而IL-1β 在再灌注后4、8、12 h 均上升，但在再灌注后12 h 時(shí)上升幅度減小，證實(shí)IL-1Rα 對(duì)IL-1β 具有明顯抑制作用，這提示IL-1Rα 只在再灌注后8 h 內(nèi)發(fā)揮最大的保護(hù)作用，因此其抗炎作用有限。

TNF-α 作為機(jī)體內(nèi)多種細(xì)胞因子的啟動(dòng)因子，具有協(xié)同放大炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)的作用［11］。 本研究結(jié)果顯示，模型組TNF-α 的表達(dá)在再灌注后8 h 達(dá)最高峰，這與蘇權(quán)等［12］研究結(jié)果一致。 而安民等［13］實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果則顯示，脊髓組織中的TNF-α 在再灌注后6、12、24 h 均保持高水平的表達(dá)，在再灌注后12 h 時(shí)達(dá)最高峰，這種差異可能與檢測(cè)材料、觀察時(shí)間點(diǎn)不同有關(guān)。 這提示，TNF-α 在不同時(shí)間點(diǎn)脊髓炎癥反應(yīng)中均具有重要的意義。在再灌注后4、8、12 h 3 個(gè)時(shí)間點(diǎn)TNF-α 的變化規(guī)律與IL-1Rα 一致，但這種變化規(guī)律究竟是由于IL-1Rα 的影響，還是TNF-α 本身的變化規(guī)律尚不明確，需要后續(xù)進(jìn)一步研究。

IL-6 是具有促炎作用的細(xì)胞因子，在SCII 早期即有明顯表達(dá)，可以進(jìn)一步加劇炎癥反應(yīng)，損傷脊髓［14］。 本研究結(jié)果顯示，IL-6 在再灌注后4、8、12 h 3 個(gè)時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，這與TNF-α的變化趨勢(shì)不同。 這提示，IL-6 在脊髓炎癥反應(yīng)中可能發(fā)揮更重要的作用。 因此，平衡炎癥因子表達(dá)，抑制炎癥反應(yīng)是減輕脊髓缺血再灌注損傷的主要策略。

3.2 電針預(yù)處理干預(yù)有助于抑制脊髓缺血再灌注損傷后炎癥反應(yīng)

本研究結(jié)果顯示，與模型組同一時(shí)間比較，電針組IL-1β、IL-6、TNF-α 的表達(dá)均明顯改變，再灌注損傷后4、8、12 h 電針組IL-1β、TNF-α 表達(dá)均明顯降低，而IL-6 在再灌注損傷后4、8 h 表達(dá)明顯上升，12 h 表達(dá)明顯下降，這提示電針可有效抑制IL-1β、TNF-α 的表達(dá)，具有良好的抑炎作用，但對(duì)IL-6 的抑制作用不明顯；與模型組再灌注4 h 比較，電針組IL-1Rα 的表達(dá)上升，之后呈逐漸降低趨勢(shì)，這與IL-1β、TNF-α 的表達(dá)趨勢(shì)相反，這提示電針促進(jìn)IL-1Rα 的表達(dá)具有時(shí)間窗效應(yīng)。 因此，臨床上可以通過(guò)電針療法抑制炎癥反應(yīng)，有效減輕脊髓損傷后的繼發(fā)性損害，保護(hù)脊髓組織，但在治療時(shí)應(yīng)注意時(shí)間窗效應(yīng)。

HE 染色結(jié)果顯示，與模型組比較，電針組脊髓組織出現(xiàn)神經(jīng)元數(shù)量增加，細(xì)胞胞核、核仁萎縮減輕，細(xì)胞破壞程度下降等良好變化，這與唐能能等［15］的研究結(jié)果一致。 這可能與本研究充分發(fā)揮針與電的雙重作用，從而提高治療效果有關(guān)。 本研究電針參數(shù)設(shè)置如下：疏密波，頻率10 Hz，強(qiáng)度以保持肢體輕微震顫為度，時(shí)間30 min。 疏密波可以更加快速地清除自由基，促進(jìn)脊髓損傷大鼠運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)；而頻率1～100 Hz 疏密波可以有效促進(jìn)局部組織血液循環(huán)，改善神經(jīng)組織營(yíng)養(yǎng)，提高新陳代謝，促進(jìn)炎癥吸收。 這與張堯等［16-18］研究結(jié)果一致。此外，本研究采用電針針刺懸鐘穴、陽(yáng)陵泉穴，這2個(gè)穴位均分布于足少陽(yáng)膽經(jīng)，屬于八會(huì)穴，分別是筋與髓的精氣匯聚之處。 針刺這2 個(gè)穴位可以有效激發(fā)臟腑經(jīng)絡(luò)之氣，促進(jìn)氣血流通，濡養(yǎng)經(jīng)脈，從而緩解肌肉痙攣，改善肢體運(yùn)動(dòng)功能障礙［19］。這與陳向華等［20］研究結(jié)果一致。

4 小 結(jié)

本研究證實(shí)電針陽(yáng)陵泉穴、懸鐘穴干預(yù)SCII，對(duì)脊髓組織具有良好的保護(hù)作用，而這可能是通過(guò)介導(dǎo)免疫炎癥反應(yīng)發(fā)揮作用，其具體作用機(jī)制可能是在特定時(shí)間點(diǎn)電針通過(guò)上調(diào)IL-1Rα 的表達(dá)，降低TNF-α、IL-1β 及IL-6 的水平，從而發(fā)揮對(duì)脊髓組織的免疫保護(hù)作用。 這可為臨床早期開(kāi)始治療SCII 提供一定的理論依據(jù)。