安麗,閆娟,張杰,拓明祥,田青,楊紅麗
延安市人民醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科,陜西 延安 716000
慢性鼻竇炎伴有鼻息肉是臨床鼻科常見(jiàn)慢性炎癥性疾病,患病率逐年遞增且趨于低齡化,已成為影響人類生活質(zhì)量的全球性健康問(wèn)題[1]。藥物或手術(shù)治療是臨床治療慢性鼻竇炎伴有鼻息肉的常用方法,但有20%的患者治療后效果不佳且在短時(shí)間內(nèi)復(fù)發(fā),導(dǎo)致病情遷延不愈[2]。盡管臨床對(duì)慢性鼻竇炎伴有鼻息肉進(jìn)行了大量研究,但至今對(duì)其發(fā)病機(jī)制仍尚未明確。有學(xué)者認(rèn)為環(huán)境、微生物、遺傳或免疫應(yīng)答缺陷等因素與慢性鼻竇炎伴有鼻息肉的發(fā)生有關(guān)[3]。研究指出,免疫反應(yīng)參與了慢性鼻竇炎伴鼻息肉的發(fā)生及發(fā)展,但關(guān)于其炎性反應(yīng)對(duì)慢性鼻竇炎伴有鼻息肉的發(fā)病作用及對(duì)病情進(jìn)展的影響仍有諸多不明[4]。調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞(Tregs)為自身免疫反應(yīng)的T 細(xì)胞亞群,被認(rèn)為是慢性鼻竇炎伴有鼻息肉的危險(xiǎn)因素[5]。維生素D屬于固醇類脂溶性維生素,屬人體免疫調(diào)節(jié)因子,血清25(OH)D 是其主要表現(xiàn)形式,并間接對(duì)Tregs 生產(chǎn)影響,調(diào)節(jié)慢性鼻竇炎伴有鼻息肉的發(fā)生及發(fā)展[6]。對(duì)此,本研究主要分析了慢性鼻竇炎伴有鼻息肉患者的血清25(OH)D、Tregs及相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)水平與病情變化的關(guān)系,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下:
1.1 一般資料 選擇2018 年11 月至2019 年12月延安市人民醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科收治的80 例慢性鼻頭炎伴鼻息肉患者作為觀察組,同期選擇不伴有鼻息肉慢性鼻竇炎患者80 例作為觀察組1。納入標(biāo)準(zhǔn):①符合《耳鼻咽喉·頭頸外科疾病診療指南》[7]中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn);②病程>12 周,且未合并其他免疫性疾病。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并糖尿病、高血壓等慢性疾?。虎诟?、腎、心功能?chē)?yán)重障礙或合并惡性腫瘤者;③合并哮喘、變異性鼻炎等變態(tài)反應(yīng)性疾??;④近1個(gè)月內(nèi)有接受激素、抗生素治療;⑤合并嚴(yán)重心腦血管疾病者;⑥既往有代謝紊亂疾病史;⑦阿司匹林耐受不良者。觀察組中男性 48 例,女性 32 例;年齡 18~65 歲,平均(41.65±7.52)歲;體質(zhì)量42~70 kg,平均(55.13±3.68)kg。觀察組1中男性47例,女性33例;年齡18~65歲,平均(41.50±7.43)歲;體質(zhì)量42~70 kg,平均(54.98±3.70)kg。另選取健康體檢者80 例作為對(duì)照組,其中男性41例,女性 39 例;年齡 18~64 歲,平均(41.99±7.31)歲;體質(zhì)量42~69 kg,平均(54.88±3.69)kg。三組受檢者性別、年齡和體質(zhì)量比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn),所有入組者均知曉本研究并簽署知情同意書(shū)。
1.2 方法 (1)采集三組受檢者空腹外周靜脈血10 mL,常溫靜置10 min 后,給予患者離心處理(3 000 r/min,離心半徑5 cm)15 min,分離上清液保存于-45℃的冰箱中待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附法(生產(chǎn)廠家:武漢興華生物科技有限公司)檢測(cè)血清中25(OH)D、白細(xì)胞介素-10(IL-10)、白細(xì)胞介素-35(IL-35)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β (TGF-β)、腫瘤壞死因子-α (TNF-α)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)水平;取出殘留液體加入稀釋緩沖并充分搖勻,離心棄上層清液,采用Foxp3流式細(xì)胞儀(生產(chǎn)廠家:美國(guó)eBioscience公司)檢測(cè)Tregs水平。25(OH)D評(píng)價(jià)方法:依據(jù)《臨床內(nèi)分泌學(xué)與新陳代謝》[8]進(jìn)行評(píng)定,以25(OH)D<20 ng/mL 定義為維生素 D 缺乏。(2)鼻竇CT檢查:參考點(diǎn)與硬腭垂直,前者為鼻骨,后者至蝶竇后壁,層厚2 mm,間距5 mm,窗技術(shù)2 000/200 Hu。(3)鼻竇CT評(píng)分:依據(jù)左側(cè)、右側(cè),分析每側(cè)分上頜竇、額竇、蝶竇、前、后組篩竇,每側(cè)12分,總分0~24分。
1.3 觀察指標(biāo) 比較三組受檢者的血清25(OH)D、Tregs、TGF-β、IL-35、IL-10、TNF-α、IL-1β水平,并分析上述指標(biāo)與疾病的相關(guān)性。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,多組均數(shù)比較采用方差分析,兩兩比較采用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),相關(guān)性采用Pearson 相關(guān)分析,均以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 三組受檢者的25(OH)D、Tregs 及相關(guān)因子比較 觀察組患者的25(OH)D、Tregs、TGF-β、IL-35、IL-10明顯低于觀察組1和對(duì)照組,而TNF-α、IL-1β水平則明顯高于觀察組1 和對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表1。
表1 三組受檢者25(OH)D及Tregs及相關(guān)因子比較()
表1 三組受檢者25(OH)D及Tregs及相關(guān)因子比較()
注:與對(duì)照組比較,aP<0.05;與觀察組1比較,bP<0.05。
組別觀察組觀察組1對(duì)照組F值P值例數(shù)80 80 80 25(OH)D(ng/mL)14.23±3.12ab 17.15±2.14a 21.56±3.24 131.721 0.001 IL-1β(ng/mL)6.13±1.12ab 4.23±0.65a 3.12±0.37 306.591 0.001 TGF-β(ng/mL)78.12±5.13ab 84.12±6.11a 89.13±6.11 72.220 0.001 IL-35(ng/mL)55.12±3.12ab 59.18±4.52a 62.10±6.23 42.761 0.001 IL-10(ng/mL)15.32±3.18ab 18.12±4.18a 20.13±4.25 30.682 0.001 TNF-α(ng/mL)21.46±5.12ab 18.31±3.66a 14.12±2.99 67.031 0.001 Tregs(%)5.31±1.12ab 6.58±1.74a 7.85±1.51 58.992 0.000 1
2.2 觀察組不同血清25(OH)D 水平患者的外周血Tregs、細(xì)胞因子比較 血清25(OH)D<20 ng/mL 患者的Tregs、TGF-β、IL-35、IL-10 水平明顯低于血清25(OH)D≥20 ng/mL 患者,而IL-1β、TNF-α則明顯高于血清25(OH)D≥20 ng/mL 患者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表2。
表2 觀察組不同血清25(OH)D水平患者的外周血Tregs、細(xì)胞因子比較()
表2 觀察組不同血清25(OH)D水平患者的外周血Tregs、細(xì)胞因子比較()
血清25(OH)D<20 ng/mL≥20 ng/mL t值P值例數(shù)60 20 Tregs(%)4.52±0.78 5.62±0.98 7.855<0.05 IL-1β(ng/mL)6.12±1.52 4.13±1.12 9.569<0.05 TGF-β(ng/mL)65.13±5.11 78.13±6.23 14.430<0.05 IL-35(ng/mL)52.13±7.02 57.51±6.55 5.011<0.05 IL-10(ng/mL)12.52±2.16 16.79±2.52 11.264<0.05 TNF-α(ng/mL)23.12±3.18 15.56±2.11 17.718<0.05
2.3 三組受檢者的鼻竇CT評(píng)分和鼻內(nèi)鏡評(píng)分比較 觀察組患者的鼻竇CT 評(píng)分、鼻內(nèi)鏡評(píng)分明顯高于觀察組1 和對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表3。
表3 三組受檢者鼻竇CT評(píng)分和鼻內(nèi)鏡評(píng)分比較(,分)
表3 三組受檢者鼻竇CT評(píng)分和鼻內(nèi)鏡評(píng)分比較(,分)
注:與對(duì)照組比較,aP<0.05;與觀察組1比較,bP<0.05。
組別鼻內(nèi)鏡評(píng)分例數(shù) 鼻竇CT評(píng)分觀察組觀察組l對(duì)照組F值P值6.18±1.21ab 4.28±0.78a 2.01±0.35 480.971 0.001 80 80 80 7.85±1.25ab 5.10±0.87a 2.57±0.52 646.261 0.001
2.4 相關(guān)性分析 Pearson 相關(guān)性分析顯示,血清25(OH)D與鼻內(nèi)鏡評(píng)分、CT評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(r值分別為0.457、0.408,P值<0.05),Tregs與鼻內(nèi)鏡評(píng)分、CT評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(r值分別為0.371、0.529,P值<0.05)。
慢性鼻竇炎伴有鼻息肉具有較高的發(fā)病率、復(fù)發(fā)率,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量,且直到目前為止臨床尚未闡明其具體發(fā)病原因[9]。相關(guān)資料表明,炎性反應(yīng)相關(guān)的細(xì)胞因子貫穿慢性鼻竇炎伴鼻息肉疾病的發(fā)生的整個(gè)過(guò)程,但是對(duì)于各個(gè)因子之間相相互作用的具體情況及關(guān)系尚不明確[10]。因此,相關(guān)細(xì)胞因子在慢性鼻竇炎伴有鼻息肉的病理生理學(xué)機(jī)制中日益獲得臨床重視。
Tregs是一種具有免疫調(diào)節(jié)作用的細(xì)胞因子,其免疫調(diào)節(jié)主要是通過(guò)表達(dá)的特異性轉(zhuǎn)錄因子、細(xì)胞接觸及分泌IL-10、TGF-β細(xì)胞來(lái)體現(xiàn)[11]。資料表明,自然Tregs分泌具有抗炎作用,如IL-35、TGF-β等,TGF-β主要是通過(guò)趨化并募集單核細(xì)胞發(fā)揮抗炎及抑制免疫功能的作用[12]。IL-10具有降低炎性因子合成的作用,其主要是通過(guò)抑制細(xì)胞增殖而發(fā)揮作用,如TNF-α、IL-1β等,進(jìn)而延緩病情進(jìn)展[13]。研究發(fā)現(xiàn),在慢性鼻竇炎伴有鼻息肉患者中,其鼻息肉組織可能存在局部免疫激活現(xiàn)象,當(dāng)鼻黏膜受到刺激時(shí)(如微生物病原菌或炎性因子),Tregs 表達(dá)水平會(huì)快速減少,從而導(dǎo)致IL-35、TGF-β及IL-10 的表達(dá)水平在短時(shí)間內(nèi)快速下降,從而刺激T 細(xì)胞增殖、活化,增加局部免疫炎癥反應(yīng)[14-15]。一旦機(jī)體組織內(nèi)的抗炎反應(yīng)處于弱炎癥反應(yīng)狀態(tài)時(shí),可誘導(dǎo)免疫炎癥反應(yīng)處于惡性循環(huán)狀態(tài),從而誘導(dǎo)慢性鼻竇炎伴有鼻息肉發(fā)生。因此認(rèn)為T(mén)regs表達(dá)水平下降可導(dǎo)致炎癥反應(yīng)持續(xù),是誘導(dǎo)慢性鼻竇炎伴有鼻息肉發(fā)生的危險(xiǎn)因素之一。
維生素屬于人體組織中主要且重要的營(yíng)養(yǎng)元素之一,不僅對(duì)免疫系統(tǒng)及Tregs 具有調(diào)節(jié)作用,同時(shí)對(duì)天然免疫、獲得性免疫均具有調(diào)節(jié)作用[16]。資料表明,維生素D 在人體中的存在方式以維生素D2、維生素D3體現(xiàn),而維生素D3經(jīng)肝臟被羥化,從而形成25(OH)D,即維生素D的主要表現(xiàn)形式,被認(rèn)為是評(píng)估人體維生素營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的敏感性指標(biāo)[17]。研究顯示,大多數(shù)慢性鼻竇炎伴有鼻息肉患者均存在25(OH)D 缺乏現(xiàn)象,因此認(rèn)為25(OH)D與慢性鼻竇炎伴有鼻息肉的發(fā)生具有密切關(guān)系[18]。研究表明,慢性鼻竇炎伴有鼻息肉患者的血清25(OH)D 表達(dá)水平明顯低于健康對(duì)照組,且隨著病情加重,患者的血清25(OH)D 表達(dá)水平則隨之降低[19]。本研究表明,慢性鼻竇炎伴有鼻息肉患者的血清 25(OH)D、Tregs、TGF-β、IL-35、IL-10表達(dá)水平明顯低于慢性鼻竇炎不伴有鼻息肉患者及健康體檢者,而TNF-α、IL-1β水平高于慢性鼻竇炎不伴有鼻息肉患者及健康體檢者。由此可見(jiàn),血清25(OH)D、Tregs、TGF-β、IL-35、IL-10、TNF-α、IL-1β均參與了慢性鼻竇炎伴鼻息肉的發(fā)生及發(fā)展,臨床應(yīng)密切監(jiān)測(cè)其表達(dá)水平。
CT評(píng)分、鼻內(nèi)鏡評(píng)分是目前國(guó)內(nèi)用于評(píng)估慢性鼻竇炎伴有鼻息肉嗅覺(jué)功能的有效方法,且二者具有較好的操作性及可重復(fù)性。本結(jié)果表明慢性鼻竇炎伴有鼻息肉患者鼻竇CT評(píng)分、鼻內(nèi)鏡評(píng)分均高于慢性鼻竇炎不伴有鼻息肉和健康對(duì)照者;慢性鼻竇炎伴有鼻息肉患者的血清25(OH)D水平、Tregs與CT評(píng)分、鼻內(nèi)鏡評(píng)分相關(guān),可反映鼻息肉病變嚴(yán)重程度;血清25(OH)D、Tregs、與鼻內(nèi)鏡評(píng)分、CT評(píng)分呈負(fù)相關(guān)。但本研究所選取的樣本量較少,且為對(duì)照試驗(yàn),并未對(duì)研究因素施加人為干預(yù),對(duì)于結(jié)果的論證強(qiáng)度較薄弱。
綜上所述,慢性鼻竇炎伴有鼻息肉患者的血清25(OH)D、Tregs、TGF-β、IL-35、IL-10 水平明顯升高,而IL-1β、TNF-α顯著降低,其含量變化與患者是否合并鼻息肉相關(guān),可為診斷慢性鼻竇炎伴有鼻息肉提供指導(dǎo)。