周雯倩 朱亞非

EB 病毒（Epstein-Barr virus，EBV）是一種嗜人類淋巴細(xì)胞的皰疹病毒。在人群中感染非常普遍［1］，兒童首次感染EB 病毒后，大多數(shù)無臨床癥狀或僅表現(xiàn)為輕度咽炎和上呼吸道感染，但仍有部分兒童會出現(xiàn)傳染性單核細(xì)胞增多癥的典型表現(xiàn)，甚至導(dǎo)致嚴(yán)重癥狀，如脾破裂、上呼吸道梗阻、噬血細(xì)胞性淋巴組織細(xì)胞增生癥（HLH）、腦膜腦炎、心肌炎等嚴(yán)重并發(fā)癥而危及生命［2］。EBV 主要通過唾液接觸傳播，初始感染階段病毒大量復(fù)制，促使一些促炎癥細(xì)胞因子、生長因子和細(xì)胞信號分子產(chǎn)生，導(dǎo)致病毒傳播和原發(fā)感染的建立［3］。EBV 原發(fā)性感染后，在B 細(xì)胞中建立潛伏感染，使感染者終生攜帶病毒。在少數(shù)情況下，EBV 可感染T 淋巴細(xì)胞或NK 細(xì)胞，導(dǎo)致持續(xù)活動性感染，引起EBV 相關(guān)的增殖性疾病。當(dāng)人體免疫力低下時，EB 病毒在B 細(xì)胞內(nèi)被激活并大量增殖，且在人群中廣泛傳播。因此，宿主的免疫系統(tǒng)對EB 病毒的調(diào)控與人類多種疾病和腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。機(jī)體控制EBV感染主要依靠固有免疫及特異性免疫，有研究發(fā)現(xiàn)EBV 感染引起的不同臨床表現(xiàn)可能與Toll 樣受體（Toll-like receptors，TLRs）這類參與固有免疫的蛋白質(zhì)分子及人體固有免疫與特異性免疫協(xié)同作用產(chǎn)生的多種細(xì)胞因子的基因多態(tài)性有關(guān)，本文就對EBV 感染的宿主免疫反應(yīng)中常見的TLRs、白細(xì)胞介素-1（IL-1）、干擾素γ（IFN-γ）、轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、IL-6、IL-10 等細(xì)胞因子及基因多態(tài)性與EBV 感染關(guān)系的研究進(jìn)行綜述。

1 TLRs

先天免疫系統(tǒng)是細(xì)胞抵御病毒的第一道防線。與其他皰疹病毒一樣，EBV 感染的結(jié)果易受先天免疫反應(yīng)的影響［7］。TLRs 是重要的模式識別受體（Pattern Recognition Receptors，PRRs），一類相對保守的跨膜蛋白，參與構(gòu)成人體抵御病原入侵的第一道屏障，能識別病毒的雙鏈RNA，并將識別信號傳遞至核，從而指導(dǎo)有關(guān)細(xì)胞因子的合成，使宿主免疫系統(tǒng)識別入侵病原體并經(jīng)常把它們清除出去，成為連接固有免疫及特異性免疫的橋梁。在人類B 細(xì)胞表面有高水平的TLR-1、6、7、9、10 受體表達(dá)，它們在TLRs 配體刺激下可促進(jìn)多種促炎細(xì)胞因子（如 IL1α、IL1β、IL-6、IL-8和 TNFα 等）產(chǎn)生，在控制EBV 感染的過程中發(fā)揮著重要的作用。TLRs 由于編碼基因突變產(chǎn)生基因多態(tài)性可導(dǎo)致其自身轉(zhuǎn)錄和翻譯調(diào)節(jié)異常，可能影響對感染的易感性，甚至改變慢性炎癥性疾病和癌癥的發(fā)病風(fēng)險。研究顯示［8］，EBV陽性重癥肌無力患者的胸腺中TLR7 和TLR9 mRNA 水平顯著升高。Valente RM 等［9］研究表明，TLR7 激活刺激EBV感染細(xì)胞中EBV LMP1 的表達(dá)，從而發(fā)揮抗病毒作用。一項(xiàng)針對口腔鱗狀細(xì)胞癌的研究中顯示［10］：TLR9（-1486T/C）基因型與EBV 感染之間可能存在相互作用，增加癌癥/癌前風(fēng)險。TLR4（+ 896A/G）的G 等位基因發(fā)生癌前病變的風(fēng)險也高4.5 倍，說明TLR9（-1486T/C）和TLR4（+ 896A/G）的遺傳多態(tài)性可能影響EBV 的共同感染，并在疾病的發(fā)展中起重要作用。

2 IL-1

IL-1 又稱為“淋巴細(xì)胞刺激因子”，主要包括IL-1β、IL-1α 及IL-1 受體拮抗劑3 個成員，這三種蛋白質(zhì)依次由IL-1β、IL-1α 和IL-lRN 三個基因編碼，所有這三個基因都是多態(tài)的。研究［7］分析了EB 病毒血清陰性和血清陽性人群中IL-1 復(fù)合物基因的基因型，結(jié)果顯示，在EB 病毒血清陰性的人群中IL-1RA 等位基因2/IL-1β-511 等位基因2 的攜帶率減少，該基因的攜帶者在體外具有更高的產(chǎn)生IL-1β和IL-1RA 的能力，且攜帶IL-1β-511T 或IL-1RN 等位基因2 具有高分泌IL-1β 的能力，炎癥反應(yīng)持續(xù)時間長，炎癥反應(yīng)嚴(yán)重，即IL-1β-511CT/TT 和/或IL-1RN 等位基因2 基因型可能不利于對抗EB 病毒感染。Hatta 等［8］分別對30 例傳染性單核細(xì)胞增多癥（IM）患者、28 例EBV 相關(guān)噬血細(xì)胞性淋巴組織細(xì)胞增生癥（EBV-HLH）患者、31 例慢性EB 病毒感染（CAEBV）患者及81 例EBV 血清陽性健康對照組進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，IM 患者的IL-1α-889 C 等位基因頻率低于對照組。另一研究顯示［14］IL-1β+3953C/T 基因型在EB 病毒 DNA 陽性胃癌中的頻率顯著增加，此種基因型個體可產(chǎn)生更多的IL-1β，即IL-1β+3953T 基因型的血清IL-1β 水平較高，即該基因型也不利于對抗EBV 感染。

3 IFN-γ

IFN-γ 起初被稱為“巨噬細(xì)胞活化因子”，是調(diào)節(jié)病毒和細(xì)胞內(nèi)病原體的有效天然免疫應(yīng)答所必需的。人IFN-γ的基因位于染色體12q24.1。其具有四個外顯子和三個插入序列，在這些區(qū)域中，特定的DNA 序列可能具有不同的效果，一些增強(qiáng)，另一些則抑制基因激活。細(xì)胞因子基因表達(dá)可能只需要一些位點(diǎn)，而其他位點(diǎn)可能調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的產(chǎn)生。2005 年的一項(xiàng)研究［10］采用嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠模型進(jìn)行試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)IFN-γ 的+874 A/A 基因型在快速出現(xiàn)淋巴增殖性疾?。↙ymphoproliferative disorders，LPD）的小鼠外周血白細(xì)胞中的頻率明顯升高，即IFN-γ +874 處A等位基因與LPD 的產(chǎn)生有顯著關(guān)聯(lián)。其他研究［11］也提到IFN-γ+874 處的A/A、T/A 和T/T 基因型分別對應(yīng)低、中、高體外IFN-γ 的產(chǎn)生，即人IFN-γ 基因+874 處的T 等位基因與高產(chǎn)量有關(guān)。Lee 等［12］分別對低EBV 載量、高EBV載量/無PTLD 和活檢證實(shí)的PTLD 三組患者進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，移植后淋巴增殖性疾病（Post-transplant lymphoproliferative disorders，PTLD）患者中IFN-γ 基因大多數(shù)為低分泌IFN-γ 的基因型（A/A），而高EBV 載量/無PTLD 患者的IFN-γ 基因大多為中/高分泌IFN-γ 的基因型，這可能表明IFN-γ 是控制EBV 感染和PTLD 發(fā)展的關(guān)鍵因素，IFN-γ 低生產(chǎn)者似乎在EBV 監(jiān)測中效果較差。

4 TGF-β1

TGF-β1 是一種普遍存在的多功能細(xì)胞因子，可控制許多細(xì)胞類型的增殖、分化和激活，可抑制多種T 細(xì)胞和抗原呈遞細(xì)胞（APC）功能，許多病毒感染期間TGF-β1 增加。TGF-β1 與EBV 的激活、復(fù)制與轉(zhuǎn)化增強(qiáng)有關(guān)，在EBV 介導(dǎo)的癌癥中起重要作用。編碼TGF-β1 的人基因位于染色體19q13 上，該細(xì)胞因子的8 個基因多態(tài)位點(diǎn)已由He 等人鑒定。研究［8，13］發(fā)現(xiàn)TGF-β1 基因密碼子10 的C 等位基因與高水平的TGF-β1mRNA 及其蛋白質(zhì)相關(guān)。Hsu 等［14］也提到TGF-β1（密碼子25）GG 基因型與該蛋白的表達(dá)增加有關(guān)。Hatta 等［8］的研究同時也發(fā)現(xiàn)，3 個患病組患者TGF-β1 密碼子10 的C 等位基因頻率顯著高于對照組，由此推測，TGF-β1 密碼子10（+869）處的多態(tài)性（C 等位基因）抑制了對EBV 的免疫反應(yīng)。

5 TNF-α

腫瘤壞死因子（Tumor necrosis factor，TNF）是一種重要的促炎細(xì)胞因子，包括TNF-α 和TNF-β，參與許多重要細(xì)胞過程的調(diào)節(jié)以及炎癥，先天性和適應(yīng)性免疫應(yīng)答中起作用，并且還涉及多種人類疾病。調(diào)節(jié)區(qū)DNA 序列變異的存在可能干擾TNF 基因的轉(zhuǎn)錄，影響TNF 的循環(huán)水平，從而增加對人類疾病的易感性。有研究認(rèn)為TNF 在疾病的急性期升高，隨著病情的好轉(zhuǎn)下降［15］。編碼TNF-α 基因位于主要組織相容性復(fù)合物的III 類區(qū)域6 號染色體的HLA-B和HLA-DR 基因之間。Elahi 等［16］已經(jīng)在TNF-α 啟動子內(nèi)的相對于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)的位置鑒定了10 種TNF-α 多態(tài)性。研究發(fā)現(xiàn)［17］，TNF2（TNF-α-308A）等位基因比普通等位基因更強(qiáng)大的轉(zhuǎn)錄激活因子，其與高TNF-α 生產(chǎn)相關(guān)。Wu 等［18］研究發(fā)現(xiàn)EBV 陽性的胃癌患者中TNF-α 基因中高生產(chǎn)者等位基因（-308A）的頻率顯著升高，故而可以總結(jié)TNF-α-308A 等位基因可能不利于對抗EBV 感染。

6 IL-6

IL-6 初名為“B 細(xì)胞刺激因子-2（BSF-2）”，參與調(diào)節(jié)多種細(xì)胞類型的增殖、分化和活性，以及參與神經(jīng)/內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)的動態(tài)平衡，尤其是在急性反應(yīng)、促炎/抗炎途徑的平衡和應(yīng)激反應(yīng)及造血中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。人IL-6 基因位于7 號染色體（7p21）的短臂上，作為EBV 感染的B細(xì)胞的生長因子，導(dǎo)致免疫球蛋白產(chǎn)生增加和B 細(xì)胞永生化，也已顯示出在EBV 永生化的B 細(xì)胞中高表達(dá)，從而促進(jìn)腫瘤生長。在IL-6 啟動子區(qū)存在四個不同的SNP 位點(diǎn)。Cliff等［19］對EBV 相關(guān)Burkitt 淋巴瘤（eBL）進(jìn)行研究后發(fā)現(xiàn)，IL-6 啟動子位置-174G/C 基因多態(tài)性對體內(nèi)IL-6 的產(chǎn)生有影響，G 和C 等位基因的表達(dá)分別增加和降低，且Cozen 等［20］對于具有霍奇金淋巴瘤（HL）和匹配對照的雙胞胎受試者進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)IL-6 啟動子位置-174 處C 等位基因與疾病風(fēng)險降低相關(guān)，表明具有保護(hù)作用，但Cliff I 等的研究并未發(fā)現(xiàn)IL-6 啟動子的等位基因或單倍型與eBL 風(fēng)險的關(guān)聯(lián)，即IL-6 啟動子SNP 可能與EBV 負(fù)荷之間沒有關(guān)聯(lián)，這還需要更多的研究進(jìn)行驗(yàn)證。

7 IL-10

IL-10 稱為“細(xì)胞因子合成抑制因子”，有廣泛的抑制促炎細(xì)胞因子的作用，是人體免疫系統(tǒng)的一個重要調(diào)節(jié)因子。其主要生物活性是抗炎與免疫調(diào)節(jié)，當(dāng)機(jī)體遭受EB 病毒感染后IL-10 分泌增加，發(fā)揮抗感染和保護(hù)機(jī)體的作用。EB病毒相關(guān)性噬血細(xì)胞性淋巴組織細(xì)胞增生癥（EBV associated hemophagocytic lymphohistocosis，EBV-HLH）是由EBV 所致的一種嚴(yán)重臨床綜合征，目前研究表明，可能包括IL-10 在內(nèi)的高細(xì)胞因子“風(fēng)暴”有關(guān)［21］。人類lL-10 基因定位于1號染色體（1q31-q32），其啟動子區(qū)存在3 種基因多態(tài)位點(diǎn)，分別是-1082（G/A）、-819（C/T）和-592（C/A）。Oduor 等［19］對IL-10 的3 個單體型基因位點(diǎn)的研究發(fā)現(xiàn)：-1082A、-819T和-592A 單體型與IL-10 低表達(dá)有關(guān)，反之與高表達(dá)有關(guān)。Helminen 等［22］通過對血清EBV DNA 陽性和陰性血樣及經(jīng)住院治療的EBV 感染患者研究發(fā)現(xiàn)，EBV DNA 陰性獻(xiàn)血者攜帶IL-10（-1082G）高于血清陽性獻(xiàn)血者或嚴(yán)重EBV 感染者，而且此位點(diǎn)在血清陰性獻(xiàn)血者和輕度癥狀或無癥狀疾病患者中比需要住院的EBV 感染患者更常見，他們的數(shù)據(jù)顯示，IL-10-1082 基因中的高生產(chǎn)者等位基因（G）可防止EBV 感染，而低生產(chǎn)者等位基因（A）使個體更容易受到嚴(yán)重EBV 感染。Merja 等［23］研究EBV 陰性及陽性兒童血清中IL-10 基因型和單倍型情況，發(fā)現(xiàn)攜帶IL-10 ATA 單倍型的患兒對早期EBV 感染有保護(hù)作用，這種作用是由于攜帶此基因型的患兒感染EBV 的早期體內(nèi)可產(chǎn)生高濃度的IL-10，導(dǎo)致患兒早期遭受EBV 感染時抗病毒作用較強(qiáng)。Vollmer-Conna 等［24］研究發(fā)現(xiàn)，對于IL-10-592C 等位基因（IL-10-592CC 基因型）純合的個體在急性疾病期間經(jīng)歷嚴(yán)重癥狀的風(fēng)險低于具有IL-10-592CA 或-592AA 基因型的受試者，即IL-10-592C 等位基因具有對抗EBV 的作用。Yali 等［25］對EBV-HLH 患者與顯著高于IM 患兒及健康兒童進(jìn)行研究顯示：IL-10-592C 等位基因和IL-10-592C/C 基因型頻率顯著升高，因此，若這一基因突變會降低EBV-HLH 中IL-10 的表達(dá)，從而使個體更易受到嚴(yán)重的EBV 感染。

綜上所述，EB 病毒感染時宿主細(xì)胞免疫反應(yīng)是多方面的，尤其是EB 病毒相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展與細(xì)胞因子關(guān)系尤為密切。進(jìn)一步明確作用機(jī)制可為EB 病毒感染的診斷、預(yù)防和治療提供新的思路。