亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        Twist 及 E-cadherin 在人骨肉瘤組織中的表達及臨床意義

        2020-12-19 11:35:18蔣棟康鵬程肖炯哲李騰飛李洵任煉成世高趙會
        中國骨與關節(jié)雜志 2020年12期
        關鍵詞:分型軟骨惡性

        蔣棟 康鵬程 肖炯哲 李騰飛 李洵 任煉 成世高 趙會

        作者單位:417000 湖南,南華大學附屬婁底醫(yī)院、湖南省婁底市中心醫(yī)院骨科 (蔣棟、康鵬程、肖炯哲、李騰飛、李洵、任煉、成世高);100020 北京,首都醫(yī)科大學附屬北京朝陽醫(yī)院骨科 (趙會)

        骨肉瘤 (osteosarcoma,OS) 是一種間葉源性的惡性腫瘤,其發(fā)病率占原發(fā)性惡性骨腫瘤的首位[1]。骨肉瘤惡性程度高,預后差,腫瘤切除聯(lián)合肢體修復重建術后患者的 5年生存率為 65%~75%[2],有轉(zhuǎn)移患者的 5年生存率僅為 20% 左右[3]。目前,對骨肉瘤發(fā)病機制及病因?qū)W的研究尚不明確。研究表明,骨肉瘤的發(fā)生發(fā)展與某些原癌基因的異常激活和抑癌基因的異常失活以及相關調(diào)控因子的失常密切相關。

        Twist 是一種癌基因[4],其基因異常表達與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展關系密切,影響腫瘤細胞的凋亡,而且還是上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)變 (epithelial mesenchymal transition,EMT) 過程中的關鍵因子,對腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移有著重要影響[5]。Twist 的表達水平與腫瘤各亞型的惡性程度密切相關,浸潤性越強表達越高,惡性程度也越高,增加 Twist 表達會提高腫瘤 EMT 能力[6]。目前,僅少量報道 Twist 在骨肉瘤中存在高表達,但對 Twist 與骨肉瘤關系更深入的研究尚未見報道,仍有較大的研究空間和研究意義。

        E-cadherin 介導的細胞間黏附作用的喪失是腫瘤細胞侵襲和轉(zhuǎn)移過程中的重要起始步驟,故被認為是一種抑癌基因[7]。E-cadherin 表達下調(diào)、紊亂或缺失都將導致細胞-細胞間黏附解體,腫瘤細胞脫落,侵襲力增強。Twist 可下調(diào) E-cadherin 的表達誘導 EMT 的發(fā)生。

        在許多上皮來源性惡性腫瘤中 Twist 與 E-cadherin表達呈負相關,Twist 高表達可下調(diào) E-cadherin 表達,從而促使腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移,患者預后差。相反,在 Twist 低表達腫瘤組織內(nèi) E-cadherin 相對高表達,腫瘤細胞間粘連相對穩(wěn)定,腫瘤細胞不易移動,患者預后相對較好[8-10]。而對來源性于間葉組織的骨肉瘤中是否 Twist 的表達水平與各惡性程度亞型密切相關;是否 Twist 與 E-cadherin 的表達在骨肉瘤中呈負相關。目前尚未見報道,需進一步研究。

        本研究用免疫組化檢測 Twist 及 E-cadherin 在人骨肉瘤、骨軟骨瘤組織中的表達情況,研究以上兩種基因在不同病理分級與分型骨肉瘤組織的表達情況、在轉(zhuǎn)移與非轉(zhuǎn)移骨肉瘤組織的表達情況,并研究 Twist 與 E-cadherin 的相關性。共同探討 Twist與 E-cadherin 在骨肉瘤發(fā)生發(fā)展過程中的生物學意義,為進一步闡明骨肉瘤的發(fā)病機制、早期診斷、判斷預后和基因治療提供理論和實驗基礎。

        材料與方法

        一、納入標準與排除標準

        1. 納入標準:(1) 2012年6月至 2018年11月,婁底市中心醫(yī)院等 4 家三甲醫(yī)院 (婁底市中心醫(yī)院 10例,湘雅二院 13例,岳陽市二院 16例,解放軍第 169 中心醫(yī)院 11例) 經(jīng)治的骨肉瘤標本;(2) 有明確的病理診斷者;(3)年齡在 5~80 歲之間;(4) 男女均可;(5) 所有患者均接受同一骨肉瘤標準治療方案。

        2. 排除標準:(1) 取標本前已經(jīng)大劑量化療等抗腫瘤藥物治療者;(2) 已發(fā)生肺轉(zhuǎn)移等遠處轉(zhuǎn)移者;(3) 合并其它惡性腫瘤者;(4) 治療前合并嚴重心肝腎等功能衰竭者;(5) 圍術期死亡者。

        二、研究對象資料

        1. 骨肉瘤組:本研究共納入 4 家醫(yī)院截肢、腫瘤切除或手術切取活檢的人骨肉瘤標本 50例。其中男 36例,女 14例,年齡 6~76 歲,平均 26.14歲;其中股骨 19例,脛骨 12例,肱骨 7例,腓骨6例,上 (下) 頜骨 5例,跟骨 1例。所有標本均經(jīng)2 位資深病理科醫(yī)師確認 (圖 1~6)。

        對所有骨肉瘤標本在 HE 染色下按病理組織學分型為:骨母細胞型骨肉瘤、軟骨母細胞型骨肉瘤、纖維母細胞型骨肉瘤和混合型骨肉瘤四種[11]。其中含骨母細胞型骨肉瘤 12例:異型性骨母細胞為其主要成分,一般伴有豐富的瘤骨形成;軟骨母細胞型骨肉瘤 13例:瘤組織中有一半以上呈軟骨肉瘤樣結(jié)構(gòu),并有化生骨質(zhì)形成,而且有直接形成類骨或瘤骨的梭形瘤細胞;纖維母細胞型骨肉瘤 18例:瘤組織中一半以上呈纖維肉瘤樣結(jié)構(gòu),由束狀及緊密編織狀排列的梭形瘤細胞組成,但瘤細胞間可見少量腫瘤性骨質(zhì)或骨樣組織形成;混合型骨肉瘤7例:是指由以上兩種或三種類型等量混合組成,其它特殊類型骨肉瘤也歸為此類。

        圖1 骨母細胞型骨肉瘤 (I 級) (HE × 400) Fig.1 Osteoblastic osteosarcoma (grade I) (HE × 400)

        圖2 軟骨母細胞型骨肉瘤 (II 級) (HE × 400) Fig.2 Chondroblast osteosarcoma (grade II) (HE × 400)

        圖3 纖維母細胞型骨肉瘤 (III 級) (HE × 400) Fig.3 Fibroblast osteosarcoma (grade III) (HE × 400)

        圖4 混合型骨肉瘤 (II 級) (× 100) Fig.4 Mixed osteosarcoma (grade II) (× 100)

        圖5 混合型骨肉瘤 (II 級) (× 400) Fig.5 Mixed osteosarcoma (grade II) (× 400)

        圖6 骨軟骨瘤 (HE × 100) Fig.6 Osteochondroma (HE × 100)

        將 50例骨肉瘤根據(jù)瘤細胞的病理組織學特征,將其惡性程度分為 I、II、III 級[12],其中 I 級13例:視野中瘤巨細胞較少,富含骨樣組織,瘤細胞略呈異型性改變,核分裂相少見,每個高倍鏡視野僅見 0~1 個;II 級 20例:瘤巨細胞多,中等量骨樣組織,瘤細胞分化較差,具有一定的異型性,核分裂相較多,每個高倍鏡視野見 2~3 個;III 級17例:瘤巨細胞較多,僅含少量骨樣組織,瘤細胞分化差,具有明顯的異型性改變,核分裂相多見,每個高倍鏡視野見 3 個以上。

        所有骨肉瘤患者術后經(jīng)電話聯(lián)系和搜索復查病歷資料隨訪,術后發(fā)生肺轉(zhuǎn)移等遠處轉(zhuǎn)移或術后2年內(nèi)非其它病因死亡者均歸為轉(zhuǎn)移組,共 29例;術后未發(fā)生轉(zhuǎn)移且生存期限超過 2年者另歸非轉(zhuǎn)移組,共 13例;失訪 8例。

        2. 骨軟骨瘤組:收集 2012年6月至 2018年11月間婁底市中心醫(yī)院骨科手術切除的 12例人骨軟骨瘤新鮮標本。其中男 6例,女 6例,年齡 3~53 歲,平均 22.08 歲;股骨 6例,脛骨 4例,手指、足趾各 1例。所有標本經(jīng)兩位資深病理科醫(yī)師對 HE 切片進行復診確認。

        三、實驗主要試劑及儀器

        兔抗人 Twist (濃縮型) 多克隆抗體 (北京博奧森公司編號:bs-2441R-AF680)、鼠抗人 E-cadherin(即用型) 單克隆抗體 (福州邁新公司編號:MAB-0589)、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶法 (streptavidin-peroxidase,SP) 超敏免疫組化試劑盒 (福州邁新公司編號:KIT-9720)、石蠟包埋機 (孝感市泰康醫(yī)療設備有限公司型號:BM450B)、病理組織切片機 (英國 SHANDON 公司型號:AS325)、光學顯微鏡 (日本 Olympus 公司型號:BX41)、超清晰度病理圖文分析系統(tǒng) (日本 Olympus 公司型號:PIPS-2020)。

        四、實驗方法

        本實驗研究中對 Twist 和 E-cadherin 蛋白的表達均采用 SP 法檢測。

        免疫組織化學染色 (SP 法) 步驟:(1) 烤片:將烤箱調(diào)至 60 ℃ 烤片 3 h;(2) 脫蠟:二甲苯 I、二甲苯 II 每缸浸泡脫蠟 20 min;(3) 水化:依次經(jīng)過無水乙醇 I、II、95%、90%、80%、70% 乙醇各5 min,蒸餾水洗 5 min;(4) PBS 漂洗 5 min×3 次;(5) 微波修復:pH6.0 檸檬鹽酸緩沖液 (>500 ml) 置微波盒煮沸,放入切片后中高檔微波修復 15 min,切片和緩沖液一起自然涼至室溫。PBS 洗 5 min×3 次;(6) 滅活內(nèi)源性過氧化物酶:3% 甲醇-H2O2(SP 試劑盒中試劑 A) 室溫 20 min,PBS 洗 5 min×3 次;(7) 非免疫血清封閉:正常山羊血清 (SP 試劑盒中試劑 B) 封閉,37 ℃ 20 min,甩去余液,不洗;(8) 滴加一抗:滴加一抗 (E-Cad / Twist,預實驗摸索 Twist 兔抗人多克隆抗體最適濃度為 1∶200)孵育,濕盒置 4 ℃ 冰箱過夜;(9) 復溫 20 min,PBS洗 5 min×3 次;(10) 滴加二抗:滴加二抗 (SP 試劑盒中試劑 C) 孵育,37 ℃ 20 min (二抗為生物素標記的羊抗兔 / 鼠 IgG),PBS 洗 5 min×3 次;(11) 滴加三抗:滴加三抗 (SP 試劑盒中試劑 D) 孵育,37 ℃20 min (三抗為辣根酶標記的鏈酶親和素),PBS 洗5 min×3 次;(12) DAB 顯色:按標準說明書配置DAB 顯色液,滴加于切片上,鏡下觀察結(jié)果,控制染色結(jié)果,適時用蒸餾水沖洗終止;(13) 復染:置蘇木素中 5 min,自來水沖洗片刻,75% 的鹽酸酒精溶液分化 30 s,自來水沖洗 5 min 藍化;(14) 脫水和透明:依次經(jīng)過 70%、80%、90%、95%、無水乙醇,各 5 min,二甲苯 I、II 各透明 10 min;(15) 封片、鏡檢:滴中性樹脂蓋片,鏡下觀察、記錄并攝片。

        五、主要觀察指標

        Twist 和 E-cadherin 在每個切片組織中的表達情況和強度。每張切片均由 2 名資深病理診斷醫(yī)師在雙盲下獨立觀察。瘤細胞呈黃色、棕黃色或棕褐色均為陽性表達。

        Twist 陽性結(jié)果判定標準:染色顆粒主要位于細胞質(zhì)中,少數(shù)細胞核中亦有表達。在顯微鏡 10×40倍視野下,每張切片隨機選取 10 個非重疊視野按陽性細胞所占比例分為:0%~25% 為弱陽性 (+),25%~50% 陽性 (++),>50% 為強陽性 (+++)。視細胞未著色或背景均勻一致淡黃色為陰性 (-)。

        E-Cad 染色結(jié)果判定標準:陽性染色顆粒主要位于胞膜和胞質(zhì)中且以胞質(zhì)中為主。在顯微鏡10×40 倍視野下,每張切片隨機選取 10 個非重疊視野按陽性細胞表達部位和所占比例分為:陽性:定位于包膜或胞漿者,其中 0%~25% 為弱陽性 (+),25%~50% 陽性 (++),>50% 為強陽性 (+++);陰性 (-):細胞無著色或背景一致性淡棕色者。

        六、統(tǒng)計學處理

        采用統(tǒng)計學軟件 SPSS 23.0 對實驗數(shù)據(jù)進行分析,運用 Chi-square 和 Fisher’s 確切法進行χ2檢驗比較兩組間的陽性率;運用成組設計兩個樣本比較的秩和檢驗 (Mann-WhitneyU法) 比較各抗體在骨肉瘤、骨軟骨瘤組織的表達強度;運用多個獨立樣本非參數(shù)檢驗 (Kruskal-WallisH法) 比較各抗體在骨肉瘤 4 種不同病理組織分型中的陽性率;運用 Spearman 等級相關非參數(shù)檢驗,分析 Twist 和E-cadherin 兩者在骨肉瘤中表達的相關關系。以上均以 α=0.05 作為檢驗水準。

        結(jié) 果

        一、Twist 在骨肉瘤和骨軟骨瘤中的表達

        Twist 在骨腫瘤細胞中陽性染色部位主要位于細胞質(zhì)內(nèi),少數(shù)胞核中有表達,為棕黃色,顯色過強時為棕褐色,可見細小顆粒 (圖 7~12)。

        50例骨肉瘤組織和 12例骨軟骨瘤組織中 Twist表達的陽性率和表達強度比較,差異均有統(tǒng)計學意義 (P<0.05) (表 1,圖 19)。

        二、骨肉瘤中 Twist 表達與其病理分型和分級的關系

        1. Twist 表達與病理分型的關系:在骨肉瘤 4 種不同病理分型中 Twist 表達的陽性率比較,差異無統(tǒng)計學意義 (P>0.05) (表 2,圖 20)。

        表1 Twist 在骨肉瘤和骨軟骨瘤組中的表達情況Tab.1 Expressions of Twist in osteosarcoma and osteochondroma

        表2 Twist 在骨肉瘤不同病理組織類型的表達情況Tab.2 Twist expressions in different osteosarcoma pathological tissues

        2. Twist 表達與病理分級的關系:本研究中,將根據(jù)骨肉瘤的惡性程度分為 3 級,其中把 I 級列為低級別骨肉瘤組,把 II、III 級列為高級別骨肉瘤組。低級別與高級別兩組中 Twist 表達的陽性率和表達強度比較,差異有統(tǒng)計學意義 (P<0.05) (表 3,圖 21)。

        圖7 Twist 在骨肉瘤中陽性表達 (×100) Fig.7 Positive expressions of Twist in osteosarcoma (× 100)

        圖8 Twist 在骨肉瘤中陽性表達 (× 400) Fig.8 Positive expressions of Twist in osteosarcoma (× 400)

        圖9 Twist 在骨肉瘤中陰性表達 (× 400) Fig.9 Negative expressions of Twist in osteosarcoma (× 400)

        圖10 Twist 在骨軟骨瘤中陽性表達 (× 100) Fig.10 Positive expressions of Twist in osteochondroma (× 100)

        表3 Twist 在骨肉瘤低級 (I 級) 與高級 (II、III 級) 組的表達情況Tab.3 Twist expressions of osteosarcoma (grade I; grade II, III)

        圖11 Twist 在骨軟骨瘤中陽性表達 (× 400) Fig.11 Positive expressions of Twist in osteochondroma (× 400)

        圖12 Twist 在骨軟骨瘤中陰性表達 (× 400) Fig.12 Negative expressions of Twist in osteochondroma (× 400)

        三、Twist 在骨肉瘤轉(zhuǎn)移組與非轉(zhuǎn)移組中的表達情況

        對本實驗中所有骨肉瘤患者均經(jīng)術后隨訪,失訪 8例,全為 Twist 表達陽性。其中轉(zhuǎn)移組與非轉(zhuǎn)移組兩組 Twist 表達的陽性率比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05) (表 4,圖 22)。

        表4 Twist 在骨肉瘤轉(zhuǎn)移組與非轉(zhuǎn)移組中的表達情況Tab.4 Twist expressions of osteosarcoma metastatic group and nonmetastatic group

        四、骨軟骨瘤、骨肉瘤中 E-cadherin 的表達

        E-cadherin 在骨腫瘤細胞中陽性染色部位主要位于細胞質(zhì)內(nèi),胞膜僅少量有表達,為棕黃色,顯色過強時為棕褐色,可見細小顆粒 (圖 13~18)。

        50例骨肉瘤組織與 12例骨軟骨瘤組織兩組E-cadherin 表達的陽性率和表達強度比較,差異均有統(tǒng)計學意義 (P<0.05) (表 5,圖 19)。

        五、骨肉瘤中 E-cadherin 表達與其病理分型和分級的關系

        1. E-cadherin 表達與病理分型的關系:四組不同病理分型中 E-cadherin 表達陽性率比較,差異無統(tǒng)計學意義 (P>0.05) (表 6,圖 20)。

        2. E-cadherin 表達與病理分級的關系:低級別(I 級) 組與高級別 (II、III 級) 組中 E-cadherin 表達的陽性率和表達強度比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05) (表 7,圖 21)。

        六、E-cadherin 在骨肉瘤轉(zhuǎn)移組與非轉(zhuǎn)移組中的表達情況

        圖13 E-cadherin 在骨肉瘤中陽性表達 (× 100) Fig.13 Positive expressions of E-cadherin in osteosarcoma (× 100)

        圖14 E-cadherin 在骨肉瘤中陽性表達 (× 400) Fig.14 Positive expressions of E-cadherin in osteosarcoma (× 400)

        圖15 E-cadherin 在骨肉瘤中陰性表達 (× 400) Fig.15 Negative expressions of E-cadherin in osteosarcoma (× 400)

        圖16 E-cadherin 在骨軟骨瘤中陽性表達 (× 100) Fig.16 Positive expressions of E-cadherin in osteochondroma (× 100)

        圖17 E-cadherin 在骨軟骨瘤中陽性表達 (× 400) Fig.17 Positive expressions of E-cadherin in osteochondroma (× 400)

        圖18 E-cadherin 在骨軟骨瘤中陰性表達 (× 400) Fig.18 Negative expressions of E-cadherin in osteochondroma (× 400)

        表5 E-cadherin 在骨肉瘤和骨軟骨瘤組中的表達情況Tab.5 E-cadherin expressions of osteosarcoma and osteochondroma

        表6 E-cadherin 在骨肉瘤不同病理組織類型的表達情況Tab.6 E-cadherin expressions in different osteosarcoma pathological tissues

        表7 E-cadherin 在骨肉瘤低級 (I 級) 與高級 (II、III 級) 組的表達情況Tab.7 E-cadherin expressions of osteosarcoma (grade I; grade II, III)

        表8 E-cadherin 在骨肉瘤轉(zhuǎn)移組與非轉(zhuǎn)移組中的表達情況Tab.9 E-cadherin expressions of osteosarcoma metastatic group and non-metastatic group

        本研究過程中失訪的8例骨肉瘤組織有 2例E-cadherin 表達陽性,6例陰性。轉(zhuǎn)移組與非轉(zhuǎn)移組中 E-cadherin 表達的陽性率比較,差異有統(tǒng)計學意義 (P<0.05) (表 8,圖 22)。

        七、骨肉瘤中 Twist 和 E-cadherin 表達的相關性

        運用非參數(shù)檢驗中的 Spearman 等級相關分析骨肉瘤組織中 Twist 和 E-cadherin 表達強度之間的相關關系,結(jié)果顯示,Twist 和 E-cadherin 表達強度呈明顯負相關且差異有統(tǒng)計學意義 (rs=-0.457,P<0.05) (表 9)。

        表9 Twist 和 E-cadherin 在骨肉瘤組織中表達的相關性Tab.9 Correlations between Twist and E-cadherin expressions in osteosarcoma tissues

        討 論

        骨肉瘤好發(fā)于青少年,惡性程度和致殘率極高。臨床上治療骨肉瘤常采用擴大切除或截肢術,而保肢術需要聯(lián)合復雜的修復重建手術,治療具有挑戰(zhàn)性。骨肉瘤的發(fā)生發(fā)展也和其它腫瘤相似,也是一個由多基因參與、多通路調(diào)控的復雜過程。因此,臨床上尋求基因治療骨肉瘤迫在眉睫。

        一、Twist 與骨肉瘤發(fā)生發(fā)展的關系

        Twist 是一個可調(diào)節(jié)胚胎發(fā)育細胞重建并賦予其遷移能力的保守轉(zhuǎn)錄因子。Twist 高表達可能促進細胞惡性變,是某些惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展的關鍵因素,特別是與 EMT 及惡性腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移關系密切。

        圖19 Twist 與 E-cadherin 在骨肉瘤和骨軟骨瘤中的陽性率圖20 Twist 與 E-cadherin 在骨肉瘤不同組織類型中的陽性率圖21 Twist 與 E-cadherin 在骨肉瘤低級和高級組中的陽性率圖22 Twist 與 E-cadherin 在骨肉瘤轉(zhuǎn)移和非轉(zhuǎn)移組中的陽性率Fig.19 Positive rates of Twist and E-cadherin in osteosarcoma and osteochondromaFig.20 Positive rates of Twist and E-cadherin in different osteosarcoma tissuesFig.21 Positive rates of Twist and E-cadherin in the lower and higher groups of osteosarcomaFig.22 Positive rates of Twist and E-cadherin in the metastatic and nonmetastatic groups of osteosarcoma

        目前研究顯示,Twist 主要通過以下作用機制導致腫瘤的發(fā)生發(fā)展:(1) Twist 可抑制凋亡程序而激活抗凋亡程序,增強細胞抗凋亡能力,并促進細胞發(fā)生 EMT[13]。有研究表明 Twist 的凋亡抑制作用也可通過多種通路抑制抑癌基因 p53 的正常表達和轉(zhuǎn)錄,發(fā)揮抑制細胞凋亡作用,進而導致腫瘤發(fā)生[4]。Twist 還可以誘導細胞周期素依賴性蛋白激酶抑制分子 p21WAF1 / CIP1 的表達,增加 p21mRNA 表達水平,抑制細胞凋亡[14]。(2) Twist 參與調(diào)節(jié) Wnt 通路,導致細胞增殖、分化、凋亡及黏附等功能的改變。轉(zhuǎn)錄因子 Twist、APC、Axin 等可在多種人體腫瘤中發(fā)生突變,導致 Wnt 信號通路的紊亂,使其靶基因的相繼激活及細胞增生的失控,最終導致腫瘤細胞的形成[4]。(3) 大量研究顯示 EMT 參與了多種腫瘤脫離原發(fā)灶而發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移的過程,Twist 作為EMT 過程中的關鍵調(diào)控因子,對腫瘤細胞侵襲和轉(zhuǎn)移有關鍵作用[6]。Twist 與 Snail、SIP1 等其它調(diào)控因子一樣可抑制 E-cadherin 的轉(zhuǎn)錄表達[15],Twist 高表達的細胞中的 E-cadherin 和 β-catenin 等黏附蛋白表達降低,從而引起 EMT,其主要機制是 Twist 能與E-cadherin 啟動子區(qū)的 E-box 結(jié)合,抑制 E-cadherin mRNA 的轉(zhuǎn)錄,喪失細胞間黏附作用,從而促進EMT 發(fā)生[16]。另外,Twist 促進腫瘤浸潤侵襲轉(zhuǎn)移還表現(xiàn)在能促進腫瘤血管生成[17]。目前,在多種實體腫瘤中研究發(fā)現(xiàn),Twist 不僅參與了腫瘤的形成,還促進了腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移,惡性程度越高 Twist 表達也越高。

        本研究顯示,Twist 在骨肉瘤組與骨軟骨瘤組表達陽性率比較和表達強度比較,差異均有統(tǒng)計學意義 (P<0.05)。這說明 Twist 在骨肉瘤中高表達,可能是通過抑制細胞凋亡和分化導致骨肉瘤的發(fā)生;Twist 在骨肉瘤各種病理分型中陽性表達率差異無統(tǒng)計學意義 (P>0.05),說明 Twist 在其病理分型中表達無差別;隨著骨肉瘤惡性程度 (即分級指標) 的遞增,Twist 陽性表達率和表達強度均有上升趨勢,差異有統(tǒng)計學意義 (P<0.05),說明 Twist 陽性表達率和表達強度可作為判斷骨肉瘤分級及判斷預后的指標;在隨訪的轉(zhuǎn)移組中 Twist 陽性表達率為 93.10%(27 / 29),非轉(zhuǎn)移組陽性率為 46.15% (6 / 13),兩組差異有統(tǒng)計學意義 (P<0.05),這提示 Twist 可能參與了骨肉瘤的侵襲轉(zhuǎn)移過程。

        二、E-cadherin 與骨肉瘤的關系

        E-cadherin 屬于上皮型鈣黏附蛋白,為 I 型跨膜糖蛋白,存在于幾乎所有上皮細胞和部分間質(zhì)細胞表面[18],其主要生理功能有:(1) 介導細胞間連接,是保持細胞相互黏合的主要細胞黏附分子;(2)參與細胞分化和維持機體組織的結(jié)構(gòu),必要時可通過改變細胞的微環(huán)境,影響細胞的分化,參與器官的形成與修復;(3) 維持原位功能,抑制細胞遷移,E-cadherin 表達減少或缺失使瘤細胞具有移動性,使原位腫瘤易發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移。

        大量研究表明,E-cadherin 在許多腫瘤組織低表達,而且惡性程度越高表達越低。E-cadherin 在正常細胞及大部分腫瘤細胞上主要為膜表達,胞質(zhì)內(nèi)少量表達。張海燕等[19]研究報道,E-cadherin 在胃癌組織中卻主要為細胞質(zhì)及核表達,包膜上極少表達,惡性程度越高其表達量越低。研究顯示,E-cadherin 存在或高表達的腫瘤其侵襲轉(zhuǎn)移能力較低,是一種腫瘤抑制蛋白,在乳腺癌[20]、肝癌[21]等許多腫瘤中已被發(fā)現(xiàn)。有實驗證實,通過基因轉(zhuǎn)染技術 E-cadherin 可逆轉(zhuǎn)惡性腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移能力,而阻斷 E-cadherin 在惡性腫瘤細胞內(nèi)的表達又可重新誘發(fā)侵襲轉(zhuǎn)移現(xiàn)象[22]。

        本研究發(fā)現(xiàn),與其它大部分腫瘤相比,E-cadherin 在骨腫瘤細胞中陽性染色部位主要定位細胞質(zhì)內(nèi),胞膜僅少量有表達,其在骨肉瘤組和骨軟骨瘤組中陽性率比較差異有統(tǒng)計學意義 (P<0.05)。說明E-cadherin 的低表達與骨肉瘤的發(fā)生發(fā)展過程有一定的關系。

        低級別 (I 級) 組與高級別 (II、III 級) 組中E-cadherin 表達的陽性率和表達強度比較,差異均無統(tǒng)計學意義 (P>0.05)。這說明 E-cadherin 與骨肉瘤惡性程度的關系不大,E-cadherin 尚不能作為評價骨肉瘤分級的指標。

        E-cadherin 在骨肉瘤各種病理分型中陽性表達率差異無統(tǒng)計學意義 (P>0.05),說明 E-cadherin 在其病理分型中表達無差異;轉(zhuǎn)移組骨肉瘤與非轉(zhuǎn)移組骨肉瘤中 E-cadherin 表達的陽性率比較,非轉(zhuǎn)移組明顯高于轉(zhuǎn)移組 (P<0.05)。這提示 E-cadherin 低表達也可能參與了骨肉瘤的侵襲轉(zhuǎn)移過程。

        三、骨肉瘤中 Twist 與 E-cadherin 之間的關系

        大量研究表明,Twist 與 E-cadherin 在腫瘤發(fā)生發(fā)展中起非常關鍵的作用,且分別通過多種通路導致腫瘤發(fā)生發(fā)展。目前,在研究腫瘤中 Twist 與E-cadherin 關系的焦點通路為 EMT,Twist 可以與E-cadherin 啟動子區(qū)的 E-box 結(jié)合,抑制 E-cadherin mRNA 的轉(zhuǎn)錄,從而誘導由 E-cadherin 介導的細胞間黏附消失,并使上皮細胞發(fā)生 EMT 轉(zhuǎn)化。有研究報道,通過阻止骨肉瘤細胞 Wnt / LRP5 信號通路可明顯上調(diào) E-cadherin 表達,并且可明顯降低 Twist 介導的侵襲轉(zhuǎn)移能力[23]。但在骨肉瘤組織中 Twist 下調(diào) E-cadherin 表達的作用機制尚不明確,Twist 是否還存在另外的通路導致 EMT、促進瘤細胞侵襲轉(zhuǎn)移尚不清楚。

        本研究運用非參數(shù)檢驗中的 Spearman 等級相關分析骨肉瘤組織中 Twist 和 E-cadherin 表達強度之間的相關關系,結(jié)果顯示,Twist 和 E-cadherin 表達強度之間呈明顯負相關且差異有統(tǒng)計學意義 (rs=-0.457,P<0.05),這說明 Twist 在骨肉瘤中高表達可能抑制 E-cadherin 的表達,EMT 可能也參與了骨肉瘤的侵襲轉(zhuǎn)移。國內(nèi)外絕大多數(shù)研究表明 EMT 主要是上皮性來源腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的機制,而在間葉源性的骨肉瘤中 Twist 與 E-cadherin 是否還通過另外的途徑導致骨肉瘤的發(fā)生、發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移尚需進一步研究探討。

        猜你喜歡
        分型軟骨惡性
        惡性胸膜間皮瘤、肺鱗癌重復癌一例
        失眠可調(diào)養(yǎng),食補需分型
        鞍區(qū)軟骨黏液纖維瘤1例
        卵巢惡性Brenner瘤CT表現(xiàn)3例
        便秘有多種 治療須分型
        原發(fā)肺軟骨瘤1例報告并文獻復習
        甲狀腺結(jié)節(jié)內(nèi)鈣化回聲與病變良惡性的相關性
        基于分型線驅(qū)動的分型面設計研究
        多層螺旋CT在甲狀腺良惡性病變診斷中的應用
        頸椎病中醫(yī)辨證分型與影像探討
        久久精品国产亚洲AV高清wy| 国产精品自在线拍国产手机版| 少妇内射高潮福利炮| 九九久久国产精品大片| 伊人网综合| 日本中文字幕一区二区视频| 东京热日本道免费高清| 国产一区二区三区四色av| 夹得好湿真拔不出来了动态图 | 亚洲国产成人一区二区精品区| 777亚洲精品乱码久久久久久| 欧美俄罗斯乱妇| 国产激情久久99久久| 日本老年人精品久久中文字幕| 中文乱码字幕在线亚洲av| 国产精品538一区二区在线| 内射后入在线观看一区| 熟女系列丰满熟妇av| 日韩有码在线观看视频| 人妻体体内射精一区二区| 疯狂做受xxxx高潮欧美日本| 久久久久久久久国内精品影视| 国产一区二区三区乱码在线| 亚洲av天堂在线视频| 两个人看的www免费视频中文| 二区三区视频| 亚洲中文字幕高清乱码毛片| 成人自慰女黄网站免费大全| 狠狠色噜噜狠狠狠狠色综合久| 禁止免费无码网站| 国产盗摄一区二区三区av| 人妻丰满熟妇av无码区app| 精品久久久久久777米琪桃花| 少妇熟女淫荡丰满| 亚洲国产女性内射第一区二区| 国产亚洲2021成人乱码| 国产精品久久久久久麻豆一区 | 另类内射国产在线| 9191在线亚洲精品| 完整在线视频免费黄片| 亚洲国产精品成人av在线不卡 |