孫 翔， 拓紅曉

(1. 河南理工大學(xué)第一附屬醫(yī)院(焦作市第二人民醫(yī)院)檢驗(yàn)科， 河南 焦作 454100； 2. 焦作煤業(yè)集團(tuán)有限責(zé)任公司中央醫(yī)院檢驗(yàn)科， 河南 焦作 454100)

機(jī)體免疫功能與惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展間具有密切聯(lián)系，惡性腫瘤患者往往存在免疫功能不全現(xiàn)象。細(xì)胞免疫在抗腫瘤免疫中具有重要作用，故對(duì)細(xì)胞免疫功能狀態(tài)進(jìn)行評(píng)估，能夠?yàn)榛颊卟∏?、治療方案的制定提供依?jù)[1]。T淋巴細(xì)胞亞群在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮的作用已獲諸多研究證實(shí)，但目前關(guān)于其他淋巴細(xì)胞亞型與惡性腫瘤間的關(guān)系尚無(wú)諸多研究報(bào)道[2-3]。鑒于此，本研究將分析外周血淋巴細(xì)胞免疫表型檢驗(yàn)評(píng)價(jià)惡性腫瘤患者細(xì)胞免疫功能的價(jià)值。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年1月至2019年12月本院治療的86例惡性腫瘤患者作為觀察組，并選取同期到本院體檢健康者90例作為對(duì)照組。觀察組患者均經(jīng)病理檢查明確診斷，且無(wú)肝、腎功能不全或嚴(yán)重感染。觀察組：男54例，女32例；年齡46～78歲，平均(59.83±3.40)歲；腫瘤類型：生殖系統(tǒng)腫瘤15例，胃腸腫瘤28例，呼吸系統(tǒng)腫瘤43例；腫瘤未轉(zhuǎn)移49例，轉(zhuǎn)移37例。對(duì)照組：男57例，女33例；年齡44～78歲，平均(59.91±3.45)歲。簽署知情同意書，獲醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。兩組性別、年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

采集入選者空腹靜脈血2 ml，保存于EDTA-K2抗凝管，向外周血標(biāo)本中分別加入20 μl熒光標(biāo)記的CD3、CD4、CD8、CD56、CD19單克隆抗體，孵育后將細(xì)胞裂解液加入，溶解紅細(xì)胞，通過(guò)磷酸緩沖鹽溶液沖洗，采用流式細(xì)胞儀(BD FACS Calibur)測(cè)定淋巴細(xì)胞群，包括B淋巴細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞亞群、自然殺傷細(xì)胞，于直方圖中將淋巴細(xì)胞群框出，并選取5 000個(gè)淋巴細(xì)胞，對(duì)其中各標(biāo)記細(xì)胞數(shù)量與其所占百分比進(jìn)行計(jì)算。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

分析兩組、觀察組中不同化療周期及腫瘤轉(zhuǎn)移與否患者的淋巴細(xì)胞免疫表型檢測(cè)結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組淋巴細(xì)胞免疫表型檢測(cè)結(jié)果比較

觀察組CD3+CD4+、總T淋巴細(xì)胞低于對(duì)照組，CD3+CD8+、CD3+CD56+高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見(jiàn)表1。

表1 兩組淋巴細(xì)胞免疫表型檢測(cè)結(jié)果比較

2.2 觀察組中不同化療周期患者淋巴細(xì)胞免疫表型檢測(cè)結(jié)果比較

未化療、化療1～6周期患者CD3+CD4+低于對(duì)照組，化療>6周期患者CD3+CD4+高于未化療患者；未化療、化療1～6周期患者CD3+CD8+高于對(duì)照組，化療>6周期患者CD3+CD8+低于未化療患者；未化療、化療不同周期患者CD3+CD56+高于對(duì)照組；未化療患者總T淋巴細(xì)胞低于對(duì)照組，不同化療周期患者CD3+CD56+、總T淋巴細(xì)胞高于未化療者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見(jiàn)表2。

表2 觀察組中不同化療周期患者淋巴細(xì)胞免疫表型檢測(cè)結(jié)果比較

2.3 觀察組中腫瘤未轉(zhuǎn)移、轉(zhuǎn)移患者淋巴細(xì)胞免疫表型檢測(cè)結(jié)果

腫瘤轉(zhuǎn)移患者CD3+CD4+低于腫瘤未轉(zhuǎn)移患者，CD3+CD8+、CD3+CD56+高于腫瘤未轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；腫瘤轉(zhuǎn)移、未轉(zhuǎn)移患者總T淋巴細(xì)胞比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。詳見(jiàn)表3。

表3 觀察組中腫瘤未轉(zhuǎn)移、轉(zhuǎn)移患者淋巴細(xì)胞免疫表型檢測(cè)結(jié)果比較

3 討論

惡性腫瘤發(fā)生是腫瘤細(xì)胞逃避機(jī)體免疫監(jiān)視的結(jié)果，細(xì)胞免疫功能在腫瘤發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后評(píng)估中發(fā)揮著重要作用，目前依據(jù)腫瘤與細(xì)胞免疫功能狀態(tài)相關(guān)性的抗腫瘤細(xì)胞免疫治療措施在臨床逐漸推廣，故對(duì)患者細(xì)胞免疫功能進(jìn)行準(zhǔn)確評(píng)估有利于指導(dǎo)臨床治療[4-5]。細(xì)胞免疫應(yīng)答主要由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)，目前T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)已被廣泛用于自身免疫性疾病、心血管疾病及肝臟疾病等診治中[6]。

CD3+是細(xì)胞免疫主要活性細(xì)胞，CD3+CD4+、CD3+CD8+細(xì)胞分別為輔助性、抑制性T淋巴細(xì)胞代表，前者能夠達(dá)到正向調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫功能的作用，增強(qiáng)吞噬細(xì)胞抗感染能力，達(dá)到抗腫瘤效果，而后者主要發(fā)揮負(fù)向調(diào)節(jié)作用，抑制機(jī)體免疫應(yīng)答反應(yīng)[7-8]。CD3+CD56+屬于NKT細(xì)胞，由多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)產(chǎn)生，能夠發(fā)揮細(xì)胞溶解效應(yīng)，參與腫瘤、自身免疫疾病及感染疾病的發(fā)生[9]。蘇麗等[10]研究中指出，惡性腫瘤患者CD3+CD4+低于健康組，CD3+CD8+高于健康組，患者伴有不同程度的免疫功能紊亂現(xiàn)象。本研究結(jié)果顯示，觀察組CD3+CD4+、總T淋巴細(xì)胞低于對(duì)照組，CD3+CD8+、CD3+CD56+高于對(duì)照組，腫瘤轉(zhuǎn)移患者CD3+CD4+低于腫瘤未轉(zhuǎn)移患者，CD3+CD8+、CD3+CD56+高于腫瘤未轉(zhuǎn)移患者，由此可見(jiàn)，惡性腫瘤患者處于免疫失衡狀態(tài)，機(jī)體內(nèi)免疫抑制作用較免疫輔助作用強(qiáng)，且隨著患者病情的進(jìn)展，腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散嚴(yán)重，加重機(jī)體免疫抑制現(xiàn)象。此外，患者機(jī)體內(nèi)細(xì)胞免疫功能將促進(jìn)NKT細(xì)胞增殖，腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移促使NKT細(xì)胞抗腫瘤作用增強(qiáng)?；熞殉蔀閻盒阅[瘤治療中重要手段，有利于延長(zhǎng)患者生存期，改善預(yù)后。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，惡性腫瘤患者接受化療治療時(shí)雖能夠?qū)⒛[瘤細(xì)胞殺滅，但也將殺滅部分健康免疫細(xì)胞，產(chǎn)生雙重免疫調(diào)節(jié)作用[11-12]。本研究中；未化療、化療1～6周期患者CD3+CD4+低于對(duì)照組，化療>6周期患者CD3+CD4+高于未化療患者；未化療、化療1～6周期患者CD3+CD8+高于對(duì)照組，化療>6周期患者CD3+CD8+低于未化療患者；未化療、化療不同周期患者CD3+CD56+高于對(duì)照組；未化療患者總T淋巴細(xì)胞低于對(duì)照組，不同化療周期患者CD3+CD56+、總T淋巴細(xì)胞高于未化療者。提示化療對(duì)腫瘤細(xì)胞殺傷能力較強(qiáng)，持續(xù)的化療能夠調(diào)節(jié)患者免疫抑制狀態(tài)，改善機(jī)體免疫功能，有利于恢復(fù)機(jī)體免疫平衡狀態(tài)。

綜上所述，惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展與細(xì)胞免疫功能有著密切關(guān)系，患者可能出現(xiàn)CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD56+等細(xì)胞比例的改變，故對(duì)上述指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)有利于監(jiān)視腫瘤免疫狀態(tài)，評(píng)估細(xì)胞免疫功能。