□ 胡雪瀟 河南華測檢測技術(shù)有限公司
隨著我國經(jīng)濟(jì)能力的不斷提升,健康飲食已經(jīng)成為了我國民生話題的重要組成部分。目前,人們正在由“吃得飽”向“吃得好”轉(zhuǎn)變。通過食物攝入人體必需的各類營養(yǎng)成分是健康飲食的重要基礎(chǔ)。氨基酸作為人體成長的重要物質(zhì),其吸收和補(bǔ)充一直是飲食領(lǐng)域的重要研究內(nèi)容。
為了保證人們能夠攝入足夠量的氨基酸,需要對不同食品中的氨基酸含量進(jìn)行檢測。經(jīng)過多年發(fā)展,我國逐步建立了比較成熟的食品氨基酸檢測體系。由于相關(guān)技術(shù)發(fā)展的限制,現(xiàn)有的食品氨基酸檢測方法存在著一定的問題和不足。高效液相色譜法是氨基酸檢測的重要方法之一。在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上,推動(dòng)高效液相色譜法在食品中氨基酸的檢測中的應(yīng)用具有重要意義[1]。
高效液相色譜法的應(yīng)用對食品氨基酸含量的檢測有著重要的意義[2]。為了推動(dòng) 高效液相色譜法的應(yīng)用發(fā)展,本文分析了檢測過程中需要應(yīng)用到的儀器與試劑,并對其預(yù)處理方法進(jìn)行了總結(jié)研究。
高效液相色譜法是一種常用的色譜檢測方法[3]。其基本工作原理是采用液體作為流動(dòng)相,將不同的溶劑等輸入到裝有固定相的色譜柱中。在完成待檢測物的成分分離后,利用相關(guān)設(shè)備進(jìn)行檢測,完成對試樣的分析。目前,高效液相色譜法已經(jīng)在化學(xué)、醫(yī)學(xué)等諸多領(lǐng)域中得到了廣泛的應(yīng)用。
隨著高效液相色譜法的廣泛應(yīng)用,其技術(shù)設(shè)備等也在不斷更新。目前常用的高效液相色譜法設(shè)備包括Agilent1100 型高效液相色譜儀、賽多利斯天平 TB—215D 等。這些設(shè)備應(yīng)用靈活,精確度也比較高,能夠滿足日常檢測的需求。
目前高效液相色譜法常用的試劑主要包括含10 mg/mL 的鄰苯二甲醛溶液,濃度為0.4 N、pH 為10.4 的硼酸緩沖溶液。這些試劑配置比較簡單,也能夠滿足人們的日常檢測需求。此外,還需要準(zhǔn)備三乙胺等試劑用品,該用品是目前常用的試劑溶劑和催化劑之一,在高效液相色譜法的應(yīng)用中發(fā)揮著重要的作用。
在利用高效液相色譜法檢測之前,需要進(jìn)行必要的預(yù)處理活動(dòng),以保證檢測工作的順利進(jìn)行和結(jié)果的有效性。
目前比較成熟的預(yù)處理方法是事先稱取一定量的食品到試管中,具體的取用量需要根據(jù)實(shí)際情況而定。隨后,根據(jù)比例在接管中加入鹽酸。隨后,在進(jìn)行水解等活動(dòng)。上述處理工作完成后,利用容量瓶等進(jìn)行定量工作,以方便后續(xù)的檢測工作。
在依次完成高效液相色譜法的設(shè)備選取和與處理工作后,則可著手進(jìn)行分析工作。本文通過分析多方資料,結(jié)合時(shí)代技術(shù)發(fā)展的特點(diǎn),對高效液相色譜法的分析方法進(jìn)行了研究,并對其結(jié)果分析要點(diǎn)進(jìn)行了探討。
目前,人們已經(jīng)研究出了多種不同的分析方法,例如OPA 衍生法、FDNB 衍生法等。不同的檢測方法其檢測重點(diǎn)區(qū)別。根據(jù)食品氨基酸含量的檢測需求,本文重點(diǎn)介紹OPA 衍生法。
與其他的檢測方法相比,OPA 衍生法具有明顯的反應(yīng)迅速、靈敏度高等特點(diǎn),可以很好地滿足食品氨基酸含量的檢測。不過其也存在一定的應(yīng)用缺陷,主要問題是衍生產(chǎn)物穩(wěn)定性比較差。因此,一般還需要利用FMOC 衍生法進(jìn)行二級氨基酸檢測,在保證食品氨基酸含量檢測效率的同時(shí),提高檢測有效性。
在完成分析方法的選取后,還需要注意對結(jié)果進(jìn)行科學(xué)分析。
除此之外,還需要對三乙胺等用品進(jìn)行妥善保管。三乙胺的濃度對組氨酸及膀氨酸的分離有著重要的影響。為了保證三乙胺的濃度,在得到三乙胺后需要將其保存在充氮的環(huán)境中,并進(jìn)行必要的封口處理。在分析過程中,每次啟用需要將試劑瓶中的三乙胺用完,避免三乙胺受到環(huán)境的影響,對其工作性能產(chǎn)生影響。
高效液相色譜法的應(yīng)用對食品氨基酸含量的檢測具有重要意義。本文通過分析相關(guān)資料,對高效液相色譜法需要應(yīng)用到的設(shè)備和試劑進(jìn)行了研究,并總結(jié)了其預(yù)處理方法。在此基礎(chǔ)上,本文對高效液相色譜法的分析方法和結(jié)果分析要點(diǎn)進(jìn)行了探討。這些研究對高效液相色譜法的應(yīng)用和食品檢測的發(fā)展有著很好的幫助。