張作松 施震地

摘 要：采用液相色譜法對(duì)食品中添加的苯甲酸及其鈉鹽、山梨酸及其鉀鹽、糖精鈉和安賽蜜進(jìn)行檢測(cè)。樣品加水混勻后再添加蛋白質(zhì)沉淀劑亞鐵氰化鉀和乙酸鋅以去除蛋白質(zhì)，再超聲、離心提取，上清液過0.22 μm濾膜制成待測(cè)樣品，經(jīng)過C18色譜柱分離，流動(dòng)相為甲醇-乙酸銨溶液（體積比為8∶92），等梯度洗脫，26.2 min實(shí)現(xiàn)4種待測(cè)物的有效分離。加標(biāo)濃度分別為1、5、10 mg/kg時(shí)，加標(biāo)回收率在78.3%～117.4%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）在1.6%～4.1%，本方法可用于檢定食品中的上述4種添加劑。

關(guān)鍵詞：液相色譜;苯甲酸;山梨酸;糖精鈉和安賽蜜;添加劑

食品很容易因?yàn)闇貪穸?、環(huán)境等出現(xiàn)變質(zhì)，給企業(yè)帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失，也會(huì)制約食品行業(yè)發(fā)展。防腐劑的添加很好地延長了食品的保質(zhì)期，因此被廣泛添加到食品中。目前常添加的有苯甲酸及其鈉鹽、山梨酸及其鉀鹽、丙酸及其鹽、脫氫乙酸等。甜味劑能夠改善口感進(jìn)而增加食欲，常用的甜味劑有糖精鈉、安賽蜜、阿斯巴甜、紐甜與阿力甜等[1]。近些年的研究表明食品添加劑超量使用也會(huì)危害人體健康，食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)對(duì)防腐劑和甜味劑的添加量作出明確規(guī)定，以保證食品安全[2]。本文采用液相色譜法同時(shí)測(cè)定食品中所添加的苯甲酸及其鈉鹽、山梨酸及其鉀鹽、糖精鈉和安賽蜜。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

Waters allianc acquity e2695液相色譜儀;渦旋混合器;HR/T20 MM立式高速冷凍離心機(jī);KH-250DB數(shù)控型超聲波清洗器。甲醇（HPLC純）;乙酸銨、亞鐵氰化鉀、乙酸鋅均為分析純;標(biāo)準(zhǔn)試劑：山梨酸、安賽蜜、苯甲酸、糖精鈉純度均>99%。

1.2 色譜條件

色譜柱：C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）;流動(dòng)相：甲醇+乙酸銨溶液=8+92;柱溫：35 ℃;進(jìn)樣量：10 μL，檢測(cè)波長：230 nm;流速：1 mL/min。

1.3 樣品前處理

取2.5 g左右樣品于50 mL離心管中，加入25 mL水渦旋振蕩，加入2 mL 10.6%的亞鐵氰化鉀溶液渦旋20 s混勻，再加入2 mL 22%的乙酸鋅溶液渦旋1 min后定容至刻度線，超聲30 min，于10 000 r/min離心10 min，上清液轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中，殘?jiān)偌铀靹蚝箅x心提取一次，上清液合并至原容量瓶中，用水定容至刻度線混勻，取上清液2 mL過

0.22 μm濾膜，供液相色譜上機(jī)檢測(cè)。

2 結(jié)果與討論

2.1 流動(dòng)相條件的選擇

參照GB 5009.28-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定》檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，通過改變甲醇的比例[1]對(duì)比驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)品目標(biāo)峰的分離和出峰時(shí)間，最后確定流動(dòng)相條件為：甲醇+乙酸銨溶液=8+92。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立與分析

準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)品（精確到0.000 1 g），以空白樣品為基質(zhì)制備基質(zhì)空白標(biāo)準(zhǔn)溶液，用空白標(biāo)準(zhǔn)基質(zhì)配制成梯度為1、5、10、25、50、100 mg/L與200 mg/L

的混合系列標(biāo)準(zhǔn)工作液，使用前配制，然后對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行檢測(cè)。圖1是4種標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖，從圖1中可以看出，安賽蜜、苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的出峰時(shí)間分別在10.68、12.41、17.13 min與26.24 min，實(shí)現(xiàn)了4種樣品的同時(shí)檢測(cè)。將色譜檢出的峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度進(jìn)行擬合，計(jì)算出目標(biāo)物的線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)、線性范圍和檢出限，如表1所示。4種樣品擬合曲線的線性相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.999以上?；厥章试囼?yàn)的加標(biāo)濃度分別為1、2.5、5 mg/kg，每份樣品分別重復(fù)測(cè)定4次，結(jié)果表明樣品的平均回收率在78.3%～117.4%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）在1.6%～4.1%。

3 結(jié)論

本文通過液相色譜法檢測(cè)食品中的苯甲酸及其鈉鹽、山梨酸及其鉀鹽、糖精鈉和安賽蜜，參考GB 5009.28-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定》，為防腐劑和甜味劑的檢測(cè)提供了一種高效、快捷的檢測(cè)方法。利用液相色譜技術(shù)建立了同時(shí)測(cè)定多組分防腐劑和甜味劑的方法，提高了檢測(cè)效率、縮短了樣品的檢測(cè)時(shí)間，并能確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，這也為以后的食品檢測(cè)工作提供了思路上的借鑒。

參考文獻(xiàn)

[1]中華人民共和國國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)，國家食品藥品監(jiān)督管理總局.GB 5009.28-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2017.

[2]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.SN/T3538—2013出口食品中六種合成甜味劑的檢測(cè)方法液相色譜一質(zhì)譜/質(zhì)譜法[S].北京：中國質(zhì)檢出版社，2013.