盧俊

（廣西工業(yè)職業(yè)技術學院石油與化學工程系，廣西南寧530001）

巖黃連是罌粟科紫堇屬植物。在我國主要分布于云南、貴州、西藏、四川、廣西等地區(qū)，因其具有良好的藥效及藥理作用而被廣泛應用于醫(yī)學領域：（1）抗肝炎作用。在抗肝炎方面，巖黃連的相關萃取物可顯著減緩肝細胞受損程度，促使其抑制或者反轉肝細胞纖維化進程，有利于線粒體膜與肝細胞膜結構性質的穩(wěn)定，一定程度上能加強巨噬細胞的吞噬效能，并促進肝細胞的再生能力[1-3]。（2）安定與鎮(zhèn)痛作用。巖黃連中所含有的喹啉生物堿成分能促使大鼠中樞內神經(jīng)遞質排空，使紋狀體邊緣系統(tǒng)中多巴胺含量有一定程度下降；此外，巖黃連中所含有的右旋四氫巴馬汀也有很強的止痛安定作用[4-5]。有研究表明，巖黃連提取物可以對貓和猴子產生“麻痹”效果，也可抑制由電刺激引起的老鼠“憤怒”反應，但它對無條件反射沒有任何效果[6]。（3）抗腫瘤作用。巖黃連提取物可影響癌細胞的呼吸，對小鼠肝癌腹水與艾氏腹水癌相關的細胞代謝進程有明顯的抑制作用，尤其可抑制癌細胞的氧消耗[7-9]。（4）免疫調節(jié)作用。體外實驗中發(fā)現(xiàn)，巖黃連提取物對脾臟淋巴細胞的一系列增殖反應有增強作用，同時也增強了T細胞CoA所誘導的脾臟T淋巴細胞的增殖[10]。其提取物也可減少肝組織的病理學變化，同時也可顯著減輕肝細胞的變性、壞死、炎癥性細胞浸潤過程，以及促進新細胞產生[11-12]。（5）抗菌作用。體外抗菌相關試驗證實，巖黃連可在一定程度上抑制革蘭陽性菌生長，脫氫卡維丁是其有效成分[13]。

現(xiàn)今，含巖黃連萃取物的注射液和片劑等中成藥制劑已被成功研制且應用于臨床治療中，為肝硬化、乙型肝炎等疾病的治療起到了重要幫助[14-15]。因為在這些中藥制劑生產中所使用的原料均為巖黃連，其需求量也呈現(xiàn)出日益增大的趨勢。而黃連素是巖黃連中的有效化學成分，其作為一種生物堿，對細菌有顯著抑制作用，有著很高的藥用價值，故很早被人們開發(fā)與利用[16]。目前，巖黃連中黃蓮素的常用提取手段為石灰水法、稀硫酸法與乙醇法[17]。而乙醇提法提取黃連素，具有提取時間短，提取效率高等優(yōu)點，有利于后續(xù)的工廠化擴大生產。為此，本研究利用溶劑浸提法，對巖黃連原料中的黃連素進行提取，并對其相關實驗結果進行一些討論研究。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

試劑：巖黃連、丙酮、生石灰、氯化鈉、無水乙醇、硫酸、鹽酸。

儀器：電熱干燥箱、電子天平、旋轉蒸發(fā)儀、恒溫水浴鍋、調溫電熱套、b形管、電動攪拌器、索氏提取器、循環(huán)水式真空泵等。

1.2 黃連素的制備過程

（1）采用溶劑浸提法，對巖黃連中的黃連素進行提取，其工藝流程圖見圖1。

（2）黃連素提取：用電子天平稱量出巖黃連粉末10 g，放入圓底燒瓶里，加入100 mL的無水乙醇之后，進行連續(xù)回流操作，把乙醇蒸出。加入百分之一的醋酸溶液，之后對其加熱溶解，進行減壓過濾，去除不溶物。然后加入濃鹽酸，并對其冷卻，直至有黃色針狀晶體物質析出。當抽濾時，采用冰水進行洗滌。結晶時，采用丙酮洗滌。在析出的粗品里，加入熱水煮沸，調節(jié)pH值，使其維持在8.5～9.8，調節(jié)物質為石灰乳。接著進行冷卻、去除雜質，直至冷卻至室溫，待黃連素結晶物質析出。之后再減壓過濾，此時有小蘗堿結晶物出現(xiàn)，呈黃色，將結晶物烘干，再用電子天平測量其質量。

圖1 工藝流程圖

2 結果與討論

2.1 提取裝置對黃連素收率的影響

在相同提取條件下，稱取10 g巖黃連，量取100 mL乙醇溶液，分別采用索氏提取與普通蒸餾裝置對黃連素進行提取，時間約為3 h，操作過程中，保持提取液冷卻時間為20 h。兩種提取裝置提取的黃連素，其質量、狀態(tài)、顏色和熔點的參數(shù)特征如表1所示：

表1 不同提取裝置提取的黃連素特征參數(shù)

從表1可看出，相比于普通蒸餾手段，采用索氏提取裝置對黃連素提取時，其提取質量較高，也有最佳的顏色、熔點與結晶形態(tài)。以上實驗證明，索氏提取裝置為最佳提取裝置。

2.2 提取時間對黃連素收率的影響

在相同提取條件下，采用索氏提取裝置，稱取10 g巖黃連，量取100 mL乙醇溶液，進行連續(xù)提取，保持提取液的冷卻時間為20 h，設置不同的提取時間梯度，所提取的黃連素收率如表2所示：

表2 不同提取時間下黃連素收率

從表2可看出，當提取時間不斷增加時，黃連素收率開始是先增高的，后續(xù)隨著提取時間的延長，其收率降低。以提取時間2.5 h為界，其產品收率是2.642%，達到收率的最大值。黃連素本身是易溶于熱醇的，提取中將乙醇進行蒸出時，因溫度過高，可能使一些黃連素再次溶于乙醇里，造成提取的黃連素收率有所下降。上述實驗表明，提取時間2.5 h為最佳提取時間。

2.3 浸取液冷卻時間對黃連素收率的影響

在相同的提取條件下，取10 g巖黃連與100 mL乙醇溶液，進行索氏提取，提取時間設置為2.5 h，并設置不同的浸取液冷卻時間梯度，相應的黃連素收率如表3所示：

表3 不同提取液冷卻時間的黃連素收率

從表3可知，冷卻時間不斷增加時，黃連素收率開始是先增高的，后續(xù)延長冷卻時間后，其收率卻呈降低態(tài)勢。以冷卻時間20 h為界，產品收率是3.602%，達到收率的最大值。乙醇有易揮發(fā)特性，提取時間呈增加趨勢時，乙醇會不斷揮發(fā)，故原本溶于其中的黃連素，也會部分流失，進而致使收率下降。上述實驗表明，20 h為最佳冷卻時間。

2.4 乙醇加入量對黃連素收率的影響

在相同提取條件下，取10 g巖黃連與100 mL乙醇溶液，進行索氏提取，提取時間設置為2.5 h，冷卻時間為20 h，并設置不同的乙醇加入量梯度，相應的黃連素收率如表4所示：

表4 不同乙醇加入量的黃連素收率數(shù)據(jù)

由表4可以看出，乙醇加入量不斷增加時，黃連素收率開始是增高的，后續(xù)提高乙醇加入量后，其收率卻呈降低態(tài)勢。以加入100 mL乙醇的量為界，產品收率是3.610%，達到收率的最大值。而黃連素含量為恒定的，乙醇加入量增加，過多黃連素會溶于過多乙醇中，使黃連素產品收率不斷下降。上述實驗表明，乙醇加入量為100 mL時為最佳加入梯度。

3 結論

巖黃連是一種具有多種藥理活性的中藥，有抗炎、安定、鎮(zhèn)痛等作用，在抗腫瘤與免疫調節(jié)中發(fā)揮著重要療效。黃連素是巖黃連中很重要的功效組分，為規(guī)避現(xiàn)有黃連素提取方法的缺陷，并提高其提取效率，本文開發(fā)了一種新的實驗方法對其進行萃取。

本實驗以巖黃連為原料，利用溶劑浸提法來提取黃連素，實驗表明，其最佳的提取工藝是：取10 g巖黃連，量取100 mL乙醇溶液，采用索氏提取裝置，設置提取時間為2.5 h，冷卻時間為20 h，乙醇加入量為100 mL，此時黃連素具有3.610%的收率，收率達到最大。

相比于傳統(tǒng)的提取手段，本研究中利用乙醇法提取黃連素，可顯著縮短提取時間，提取效率得到了很大提升。為未來巖黃連組分提取提供了一種新的方法與思路，不僅對傳統(tǒng)提取方法缺陷進行了規(guī)避，同時也提高了提取的效率，減少了巖黃連組分處理中上游處理的人力與時間成本，縮短了提取時間的周期，有利于后續(xù)巖黃連工廠化以及擴大生產過程。

此方法中與傳統(tǒng)方法均使用了大量的化學與化工試劑，造成了一定的環(huán)境安全隱患。在后續(xù)研究中，為實現(xiàn)巖黃連的綠色與高效提取，可結合現(xiàn)今快速發(fā)展的生物科學技術，如利用微生物生物提取或用酶法來進行巖黃連成分的提取。