亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        TDP-43、LC3在多發(fā)性肌炎及散發(fā)性包涵體肌炎中的表達(dá)及其作用

        2020-11-21 05:50:52曾國勇曾祥俊
        中國當(dāng)代醫(yī)藥 2020年28期
        關(guān)鍵詞:肌肉組織免疫組化陽性

        曾國勇 曾祥俊 葉 瑾

        1.江西省贛州市人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科,江西贛州 341000;2.江西省贛州市人民醫(yī)院腎內(nèi)科,江西贛州 341000

        散發(fā)性包涵體肌炎(IBM)是特發(fā)性炎性肌病的一種亞型,老年人下肢近端和手指的個(gè)別屈肌無力是其典型表現(xiàn)。IBM 疾病的臨床進(jìn)展較慢,常規(guī)免疫抑制治療通常效果差,最終可導(dǎo)致嚴(yán)重的殘疾。IBM 的發(fā)病機(jī)理非常復(fù)雜,目前尚未完全了解[1-2]。臨床上,IBM 必須區(qū)別于多發(fā)性肌炎(PM),后者是另一種富含T 細(xì)胞的炎性肌病,表現(xiàn)為彌漫性主要組織相容性復(fù)合體(MHC)-Ⅰ表達(dá)上調(diào)[3],因?yàn)閮煞N疾病對(duì)皮質(zhì)類固醇激素治療的反應(yīng)明顯不同,PM 通常效果良好,IBM 則幾乎沒有反應(yīng)。臨床常出現(xiàn)一部分IBM 患者被誤診為慢性PM 的情況,并接受了不必要的類固醇治療[4]。鑒于當(dāng)前診斷標(biāo)準(zhǔn)的局限性,研究者們做出了巨大的努力去發(fā)現(xiàn)具有更高靈敏度的IBM 免疫組織化學(xué)標(biāo)志物。目前蛋白質(zhì)聚集被認(rèn)為在IBM 發(fā)病機(jī)制中具有核心作用,因此人們認(rèn)為尋找與去除異常聚集蛋白有關(guān)的標(biāo)志物可能用于鑒別IBM 和PM[5]。研究顯示,鑲邊空泡(RVs)的形成都與自噬的損害存在一定相關(guān)性,自噬障礙導(dǎo)致自噬體積累積,這可能與自噬蛋白LC3、TDP-43 有關(guān)[6]。因此,本研究通過免疫組化法、Western blot 法等分析PM 組和IBM 組骨骼肌中TDP-43、LC3 陽性表達(dá)率及蛋白含量的差異性,進(jìn)而探究TDP-43、LC3 在PM 及IBM 中的表達(dá)及其作用。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        選取2018年3月~2019年9月我院收治的PM(26 例)、IBM(26 例)患者的中等受累肌肉進(jìn)行活檢,并避開肌電圖穿刺點(diǎn),同時(shí)保證動(dòng)作輕柔未過度牽拉或擠壓所取的肌肉組織,大小約0.5 cm×1.0 cm×0.5 cm,并快速冷凍。將PM 患者取出肌肉組織作為PM 組,將IBM 患者取出肌肉組織作為IBM 組。PM 組和IBM組患者性別、肌肉組織選取部位、年齡、病程等一般資料比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn),參與研究的患者均簽署知情同意書。

        表1 兩組一般資料的比較

        1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

        臺(tái)式低速離心機(jī)(長沙湘智離心機(jī)儀器有限公司,型號(hào):TD4K);萊卡冰凍切片機(jī)(北京海天友誠科技有限公司,型號(hào):CM1850);全自動(dòng)免疫組化儀(上海永創(chuàng)醫(yī)療器械有限公司,型號(hào):MY-2300)。

        1.3 免疫組化法檢測(cè)PM 組和IBM 組TDP-43、LC3的表達(dá)

        將肌肉組織進(jìn)行常規(guī)脫蠟及水化,加入2%甲醛溶液,固定,乙醇脫水,石蠟切片,切成長寬高為1.5 μm×1.5 μm×1.5 μm 的塊狀,沖洗,室溫封閉,滴加一抗,37℃放置30~40 min,沖洗,滴加生物素化二抗(二抗試劑盒)37℃放置40 min,沖洗,二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色,水洗終止反應(yīng),蘇木精復(fù)染,分化,梯度酒精脫水干燥,中性樹膠封固。

        1.4 Western blot 法檢測(cè)PM 組 和IBM 組TDP-43、LC3 蛋白的含量

        洗凈烘干電泳槽及其他部件,制備12%分離膠,制作1 cm 的水層。將電泳裝置放置聚膠1 h,配制灌注成層膠。90 V 電泳,溴酚藍(lán)倒入分離膠,取出凝膠,放入聚偏二氟乙烯(PVDF)膜5~10 s。冰浴,雜交液稀釋一抗,β-actin:1∶1000。清洗3 次,把PVDF 膜放入對(duì)應(yīng)的二抗中常溫孵育1.5 h,輕輕晃動(dòng)。加入加入電化學(xué)發(fā)光(ECL)溶液和B 混合液約1 min,PVDF 膜檢測(cè)采用自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像分析。

        1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,組間兩兩比較采用t 檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料采用頻數(shù)表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn);P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 兩組肌肉組織中TDP-43、LC3 陽性表達(dá)量

        IBM組肌肉組織中TDP-43、LC3 陽性表達(dá)高,PM組肌肉組織中TDP-43、LC3 陽性表達(dá)量低,兩組比較,IBM 組肌肉組織中TDP-43、LC3 陽性表達(dá)明顯高于PM 組(圖1,封四)。

        圖1 兩組肌肉組織中TDP-43、LC3 陽性表達(dá)(蘇木精染色,400×)

        2.2 兩組肌肉組織中TDP-43、LC3 蛋白含量

        Western blot 法結(jié)果顯示:IBM 組肌肉組織中TDP-43、LC3 蛋白含量高于PM 組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(圖2)。

        圖2 兩組肌肉組織中TDP-43、LC3 蛋白含量

        3 討論

        IBM 與PM 由于對(duì)免疫抑制治療的效果明顯不同,且預(yù)后不同,因此病理診斷至關(guān)重要,特別是專家發(fā)現(xiàn)兩類患者臨床評(píng)估結(jié)果類似時(shí)。當(dāng)然,IBM 與PM 存在明顯的組織學(xué)重疊導(dǎo)致病理上的鑒別也很困難[7-8]。本研究定量評(píng)估了兩種免疫組織化學(xué)標(biāo)志物L(fēng)C3、TDP-4 在區(qū)分IBM 和PM 診斷方面的價(jià)值,結(jié)果顯示IBM 組肌肉組織中TDP-43、LC3 陽性表達(dá)更高,PM 組肌肉組織中TDP-43、LC3 陽性表達(dá)量更低,IBM 組肌肉組織中TDP-43、LC3 陽性表達(dá)高于PM 組(P<0.05)。Western blot 法檢測(cè)結(jié)果顯示,PM 組肌肉組織內(nèi)的TDP-43、LC3 蛋白含量最低,IBM 組肌肉組織內(nèi)的TDP-43、LC3 蛋白含量最高,IBM 組肌肉組織中TDP-43、LC3 蛋白含量高于PM 組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。IBM 發(fā)病機(jī)制的一種模型表明,細(xì)胞質(zhì)蛋白的積累是逐步發(fā)生的,首先發(fā)生自噬通量受損(通過LC3 累積檢測(cè)到),隨后發(fā)生TDP-43 和其他錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)的聚集,進(jìn)而出現(xiàn)IBM,病情逐步加重[9]。研究發(fā)現(xiàn),TDP-43、LC3 表達(dá)水平與IBM 的形成及增長有顯著相關(guān)性,在患者體內(nèi)TDP-43、LC3陽性數(shù)量越多則病情越嚴(yán)重[10-11]。實(shí)驗(yàn)得出,IBM患者TDP-43、LC3 陽性表達(dá)率顯著高于健康人群,得出TDP-43、LC3 可能參與了IBM 的發(fā)生及發(fā)展[12]。研究顯示,在PM 患者體內(nèi),TDP-43、LC3 表達(dá)水平均比健康人體高[13]。研究人員建議采用免疫組化法區(qū)分IBM、PM,在肌肉活檢中使用LC3 面板和TDP-43 抗體:LC3 臨界值<14% FS 可以幫助排除IBM,而TDP-43>7% FS 強(qiáng)烈支持IBM 診斷。由于TDP-43>7%FS 對(duì)IBM 診斷具有很高的特異性,因此TDP-43 免疫組化可以在臨床病史無法區(qū)分或病情不典型的情況下使用[14]。同時(shí),有學(xué)者研究得出,IBM 與PM 患者體內(nèi)TDP-43、LC3 表達(dá)水平不相同,且IBM患者體內(nèi)TDP-43、LC3 表達(dá)水平明顯較高,因此,臨床中可采用鑒別TDP-43、LC3 的方法來區(qū)分兩種疾病[15],與本研究結(jié)論一致。

        綜上所述,TDP-43、LC3 在IBM 骨骼肌標(biāo)本中更易表達(dá),可作為與PM 鑒別診斷的指標(biāo)之一。

        猜你喜歡
        肌肉組織免疫組化陽性
        蒙古斑點(diǎn)馬不同部位脂肪和肌肉組織中脂肪酸組成的比較研究
        肉類研究(2020年9期)2020-12-14 04:26:26
        夏枯草水提液對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性甲狀腺炎的治療作用及機(jī)制研究
        高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法建立同時(shí)測(cè)定肌肉組織中4種藥物殘留的方法及其確認(rèn)
        科技資訊(2020年3期)2020-04-07 03:38:08
        幽門螺桿菌陽性必須根除治療嗎
        嬰幼兒原始黏液樣間葉性腫瘤一例及文獻(xiàn)復(fù)習(xí)
        結(jié)直腸癌組織中SOX9與RUNX1表達(dá)及其臨床意義
        拋開“陽性之筆”:《怕飛》身體敘事評(píng)析
        高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定肌肉組織中4 種獸藥殘留
        肉類研究(2017年8期)2017-11-16 12:03:49
        MALDI-TOF MS直接鑒定血培養(yǎng)陽性標(biāo)本中的病原菌
        子宮瘢痕妊娠的病理免疫組化特點(diǎn)分析
        国产精品无码v在线观看| 国内精品极品久久免费看| 麻豆精品国产免费av影片| 丰满人妻一区二区三区蜜桃| 巨胸喷奶水www视频网站| 国产一区二区波多野结衣| 四虎无码精品a∨在线观看| 久草中文在线这里只有精品| 亚洲av午夜福利精品一区| 天天摸日日摸狠狠添| 成人日韩av不卡在线观看| 97女厕偷拍一区二区三区 | 国产看黄网站又黄又爽又色| 亚洲精品乱码久久久久99| 国产一区二区黑丝美胸| а√中文在线资源库| 中文字幕亚洲无线码| 深夜福利国产| 可以直接在线看国产在线片网址| 国产精品无码一区二区三区| 国产精品揄拍100视频| 亚洲一区二区免费日韩| 极品一区二区在线视频| 国产白袜脚足j棉袜在线观看| 456亚洲人成影视在线观看| 亚洲天堂av另类在线播放| 女优一区二区三区在线观看 | av无码精品一区二区三区| 欧美尺寸又黑又粗又长| 国产思思久99久精品| 日本在线观看一二三区| 中文无码精品a∨在线观看不卡| 在线亚洲综合| 亚洲天堂一区二区三区视频| 亚洲av无码一区二区三区鸳鸯影院| 夫妇交换刺激做爰视频| 亚洲成AV人片无码不卡| 不卡一本av天堂专区| 99精品国产一区二区| 中文字幕久热精品视频免费| 黄片免费观看视频播放|