賀春蘭，何煜暐

(1.青海大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，青海 西寧 810001； 2.青海大學(xué)附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科，青海 西寧 810001)

本研究利用免疫學(xué)方法，研究高原缺氧環(huán)境下2型糖尿病患者尿液細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子small mothers against decapentaplegic homolog 1(Smad1)表達(dá)與糖尿病腎病的相關(guān)性，為高原2型糖尿病腎病早期診治提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1.對象與方法

1.1 研究對象

選擇2017年10月至2018年10月在青海大學(xué)附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科就診的高原缺氧環(huán)境下居住的2型糖尿病(符合1999年WHO糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)。經(jīng)臨床或?qū)嶒?yàn)室檢查確診無感染性疾病、急慢性腎炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡和風(fēng)濕性疾病以及其他影響本研究結(jié)果的干擾性疾病)患者68例和健康對照者20例。按尿白蛋白/肌酐比值(UACR)，將入組患者分為三組：正常蛋白尿組(23例，UACR<30mg/g)；微量白蛋白尿組(22例，30mg/g≤UACR<300mg/g)；大量白蛋白尿組(23例，UACR≥300mg/g)。同時(shí)選擇高原缺氧環(huán)境下居住的健康體檢者(20例)作為對照(NC)組。不同組別患者的性別及年齡比較無顯著性差異，具有可比性。詳見表1～2。

表1 不同組別患者性別情況(n，%)

表2 不同組別患者年齡情況

1.2 標(biāo)本收集及檢測方法

抽取研究對象空腹靜脈血4 mL，使用BECKMAND×C800全自動(dòng)生化分析儀檢測糖化血紅蛋白、肌酐、空腹血糖及尿微量白蛋白的表達(dá)量。

留取研究對象清晨尿10 mL，離心(2500r/min)10 min后取上清液并在-70 ℃冰箱凍存。尿Smad1檢測采用酶聯(lián)免疫吸附(enzymelinkedimmuno absorbentassay，ELISA)法測定，使用上海廣銳生物科技有限公司提供的試劑盒。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2.結(jié)果

2.1 不同組別患者檢測結(jié)果

不同組別患者檢測結(jié)果詳見表3。

表3 不同組別患者檢測結(jié)果

2.2 糖尿病患者Smad1蛋白與其他指標(biāo)的相關(guān)性分析結(jié)果

68例糖尿病患者samd1蛋白水平與糖化血紅蛋白、肌酐、空腹血糖及尿微量白蛋白之間的相關(guān)性分析顯示，糖尿病患者尿Smad1蛋白與糖化血紅蛋白及空腹血糖均無相關(guān)性，但與血肌酐存在相關(guān)性(r=0.259，P=0.015)、與尿微量白蛋白存在相關(guān)性(rs=0.819，P<0.001)。糖尿病患者Smad1蛋白與其他指標(biāo)的相關(guān)性分析結(jié)果詳見圖1～2。

圖1 糖尿病患者Smad1蛋白與Cr的散點(diǎn)圖

圖2 糖尿病患者Smad1蛋白與尿微量白蛋白的散點(diǎn)圖

3.討論

糖尿病腎病早期腎臟的病理變化是細(xì)胞外基質(zhì)的聚集[1-2]，而調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和分化的TGF-β超家族主要成員轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β)可引起細(xì)胞外基質(zhì)積聚[3]。Smad蛋白是TGF-β下游重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，介導(dǎo)Smads通路的胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，以此調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分IV型膠原的表達(dá)[4-5]。對動(dòng)物模型的研究結(jié)果顯示，Smad1可上調(diào)Ⅳ型膠原的表達(dá)，可活化腎小球硬化相關(guān)分子，如膠原特異性伴侶熱休克蛋白47、骨橋蛋白、Ⅰ型膠原、a平滑肌肌動(dòng)蛋白等[4，6-7]。目前認(rèn)為糖尿病早期尿液Smad1的增加與腎小球硬化有關(guān)，Smad1可作為新標(biāo)志物預(yù)示系膜擴(kuò)張的出現(xiàn)[8-10]。本研究結(jié)果顯示，糖尿病大量白蛋白尿組患者尿Smad1蛋白含量明顯高于其他各組。糖尿病微量白蛋白尿組患者尿Smad1蛋白含量明顯高于糖尿病正常蛋白尿組和正常對照組。糖尿病正常蛋白尿組和正常對照組尿Smad1蛋白含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示在高原環(huán)境下，尿液Smad1蛋白與糖尿病患者糖尿病腎病有關(guān)，且關(guān)系密切。