魏秋姣，杜 鵬，劉小鳳，黃嘉怡，沈守星

珠海市慢性病防治中心，廣東 珠海 519000

變態(tài)反應(yīng)性疾病又稱過(guò)敏性疾病，包括過(guò)敏性鼻炎、過(guò)敏性哮喘、濕疹、蕁麻疹、接觸性皮炎和過(guò)敏性胃腸炎，機(jī)體通過(guò)吸入、食入、注入或接觸某種含有致敏成分的物質(zhì)（稱為過(guò)敏原或變應(yīng)原）后觸發(fā)機(jī)體產(chǎn)生過(guò)量的免疫球蛋白E(immunoglobulin E，IgE)，從而引起各種功能性障礙或組織損傷的一類疾?。?-2］，其病因復(fù)雜，而且容易受內(nèi)外環(huán)境因素的影響，導(dǎo)致防治較困難。研究表明，治療過(guò)敏性疾病的關(guān)鍵在于過(guò)敏原的檢測(cè)，如果過(guò)敏原檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確，則無(wú)法為醫(yī)生提供治療的可靠依據(jù)［3］?；颊哐逄禺愋訧gE(Specific IgE antibodies,sIg)的檢測(cè)可以確定過(guò)敏原，過(guò)敏原的分布具有區(qū)域、氣候、自然環(huán)境以及生活方式的差異性，因此，了解變態(tài)反應(yīng)性皮膚病患者血清總IgE和特異性IgE（sIgE）的種類、分布及其相互關(guān)系，可以為疾病的診療與本地區(qū)過(guò)敏性疾病的防治提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2015年5月—2016年11月珠海市慢性病防治中心收治的變態(tài)反應(yīng)性皮膚病患者985例，男440例，女545例，年齡1個(gè)月到83歲，平均年齡26歲?；颊咴跈z查前1周未使用過(guò)抗過(guò)敏及糖皮質(zhì)激素類等藥物。按年齡分為4 組: 嬰幼兒組(≤5 歲)123 例，青少兒組(6 歲～19 歲) 150 例，中青年組(20歲～49歲) 481例，老年組(≥50歲) 267 例。

1.2 標(biāo)本采集與保存

抽取靜脈血5 ml，置于干燥管內(nèi)，3 000 r/min 離心10 min，分離血清，不能及時(shí)檢測(cè)的樣本2 °C～8 °C 保存，不超過(guò)3天。

1.3 總IgE與特異性變應(yīng)原的檢測(cè)

患者總IgE 的檢測(cè)采用歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷有限公司的總IgE 檢測(cè)試劑盒，嚴(yán)格按試劑說(shuō)明書操作，依試劑說(shuō)明書標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行反應(yīng)性判定；特異性變應(yīng)原的檢測(cè)采用歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷有限公司的吸入性和食入性特異性IgE(sIgE)抗體檢測(cè)試劑盒，該試劑盒采用免疫印跡法，膜條上包被了10 種吸入性過(guò)敏原：樹組合2（柳樹/楊樹/榆樹）、艾草、艾蒿、塵螨組合（屋塵螨/粉塵螨）、屋塵、貓毛、狗上皮、蟑螂、霉菌組合1（點(diǎn)青霉/分枝孢霉/煙曲霉/交鏈孢霉）、葎草，同時(shí)包被了10 種食入性過(guò)敏原：雞蛋白、牛奶、花生、黃豆、牛肉、羊肉、海魚組合1（鱈魚/龍蝦/扇貝）、淡水魚組合1（鮭魚/鱸魚/鯉魚）、蝦、蟹。實(shí)驗(yàn)儀器為歐盟EUROBlotMaster 和EUROLineScan 系統(tǒng)。試驗(yàn)步驟：先將檢測(cè)膜條預(yù)處理，然后加入患者血清與檢測(cè)膜條在搖擺床上進(jìn)行孵育，使血清中的IgE 抗體與膜條上包被的相應(yīng)抗原相結(jié)合，然后用緩沖液進(jìn)行膜條清洗，去掉未結(jié)合的抗體，加入酶結(jié)合物與IgE 抗體抗原復(fù)合物再次孵育，再次洗滌，加入色原/底物液進(jìn)行孵育，最后經(jīng)蒸餾水洗滌，風(fēng)干膜條，粘附于結(jié)果判定模板中的塑料膜上。

1.4 結(jié)果判定

采用“EUROLineScan”軟件自動(dòng)讀取風(fēng)干后的膜條，按照sIgE 濃度的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，把結(jié)果分為0～6 級(jí)：0 級(jí)為＜0.35 kU/l（未檢出特異性抗體）；1 級(jí)為0.35～0.7 kU/l(極低抗體滴度，通常沒(méi)有臨床癥狀，但比較敏感)；2級(jí)為0.7～3.5 kU/l（低滴度抗體，如果在該類別的上限，則通常有臨床癥狀）；3 級(jí)為3.5～17.5 kU/l（檢測(cè)到特定抗體，通常會(huì)有臨床癥狀）；4 級(jí)為17.5～50 kU/l（檢測(cè)到高滴度抗體，通常具有臨床癥狀）；5 級(jí)為50～100 kU/l（檢測(cè)到高抗體滴度）；6級(jí)為＞100 kU/l（檢測(cè)到非常高的抗體滴度）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 總IgE和sIgE的檢測(cè)結(jié)果

985 例患者中，578 例總IgE 檢測(cè)有反應(yīng)性，716 例sIgE檢測(cè)有反應(yīng)性，具體的結(jié)果，見(jiàn)表1。

表1 總IgE檢測(cè)與sIgE檢測(cè)結(jié)果

2.2 sIgE檢測(cè)結(jié)果

716 例sIgE 檢測(cè)有反應(yīng)性的樣本中，吸入性過(guò)敏原最多的是塵螨組合（屋塵螨/粉塵螨），其次是蟑螂，食入性過(guò)敏原最多的是海魚組合1（鱈魚/龍蝦/扇貝），其次是淡水魚組合1（鮭魚/鱸魚/鯉魚），表中列出前五位組合，詳細(xì)結(jié)果，見(jiàn)表2。

表2 sIgE檢測(cè)結(jié)果

2.3 年齡與特異性變異原分布

將患者分為嬰幼兒組、青少年組、中青年組、老年組。吸入性過(guò)敏原中各組最多的是塵螨組合；食入性過(guò)敏原中，嬰幼兒組最多是雞蛋白，其它三組為海魚組合，詳細(xì)結(jié)果，見(jiàn)表3。

2.4 總IgE濃度與特異性過(guò)敏原等級(jí)關(guān)系

患者總IgE 數(shù)值分為正常組、2 倍參考值組、3 倍參考值組、大于3倍參考范圍值組。sIgE各等級(jí)占比不隨總IgE濃度而改變，除當(dāng)總IgE的濃度大于3倍參考值時(shí)6級(jí)數(shù)量明顯增加，詳細(xì)結(jié)果，見(jiàn)表4。

3 討論

近年來(lái)，由于環(huán)境污染、食品安全和生活方式改變等原因，過(guò)敏原的種類越來(lái)越多，變態(tài)反應(yīng)性皮膚病的發(fā)病率較前明顯提高［4］。據(jù)世界變態(tài)反應(yīng)組織（World Allergy Organization，WAO）白皮書報(bào)告，全世界有30%～40%的人被過(guò)敏問(wèn)題所困擾，過(guò)敏已成為全球第六大疾?。?］。在日常生活中，常把由IgE 抗體介導(dǎo)的體液免疫反應(yīng)認(rèn)為是過(guò)敏反應(yīng)的主要產(chǎn)生機(jī)制［6］，主要通過(guò)結(jié)合多價(jià)抗原并交聯(lián)肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞表面受體，促使細(xì)胞托顆粒而產(chǎn)生炎癥反應(yīng)［7］，而過(guò)敏原特異性IgE 與過(guò)敏原息息相關(guān)，已被納入多項(xiàng)疾病診療指南。因此，總IgE 和特異性IgE檢測(cè)在過(guò)敏性疾病中具有重要意義。

我們對(duì)985 例患者進(jìn)行了總IgE 和sIgE 的檢測(cè)，總IgE檢測(cè)有反應(yīng)性578 例（58.7%），sIgE 檢測(cè)有反應(yīng)性716 例（80.7%），總IgE 與sIgE 具有相關(guān)性（χ2=42.5，P<0.01）。sIgE 檢測(cè)分為吸入性和食入性，吸入性過(guò)敏原最多的是塵螨組合（屋塵螨/粉塵螨），占58.2%，其次是蟑螂，占33.0%，與國(guó)內(nèi)其它南方地區(qū)的研究結(jié)果基本一致［8-10］，但新疆［11］以艾蒿、樹組合為主，這可能與當(dāng)?shù)氐臍夂颦h(huán)境有關(guān)，南方地區(qū)夏季高溫高濕并且長(zhǎng)期使用空調(diào)容易導(dǎo)致室內(nèi)空氣流通不均，有利于螨蟲和蟑螂的繁殖生長(zhǎng)；食入性過(guò)敏原最多的是海魚組合1（鱈魚/龍蝦/扇貝），其次是淡水魚組合1（鮭魚/鱸魚/鯉魚）、蟹，國(guó)內(nèi)部分研究與本研究結(jié)論相同［12-13］，但有些研究表明牛奶是主要的過(guò)敏原［14-15］，主要原因可能是珠海作為沿海城市，居民喜歡食用海鮮。同時(shí)，我們將患者按年齡分為嬰幼兒、青少年、中青年、老年四組，各組吸入性過(guò)敏原最多的是塵螨組合，而食入性過(guò)敏原中，嬰幼兒組最多是雞蛋白，其它三組為海魚組合，筆者猜測(cè)這是由于嬰幼兒與成人具有不同的飲食結(jié)構(gòu)。有報(bào)道指出，雞蛋致敏主要發(fā)生在生命早期，我們應(yīng)該密切監(jiān)測(cè)嬰幼兒食物過(guò)敏情況，避開這些變應(yīng)原［16］，但雞蛋具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，又是中國(guó)餐桌常見(jiàn)食物，是否完全拋棄需要慎重考慮。

表3 年齡與特異性變異原分布的關(guān)系

表4 總IgE與特異性過(guò)敏原等級(jí)關(guān)系

對(duì)總IgE 濃度與sIgE 的等級(jí)之間的關(guān)系進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)sIgE 等級(jí)1 級(jí)在各總IgE 濃度組別中占主要部分， sIgE的各等級(jí)的占比不隨總IgE濃度的變化而變化，但當(dāng)總IgE的濃度大于3 倍參考值時(shí)，sIgE 等級(jí)6 級(jí)數(shù)量明顯增加，所以筆者推測(cè)較低濃度的總IgE 與sIgE 的等級(jí)即臨床癥狀沒(méi)有必然的關(guān)系，但在高濃度時(shí)關(guān)系得到加強(qiáng)?？赡艿脑蛴校海?）參加檢測(cè)的患者處于疾病非發(fā)作期；（2）患者過(guò)敏反應(yīng)可能由檢測(cè)項(xiàng)目以外的其他過(guò)敏原引起；（3）患者處于疾病高峰期與IgE 耗竭期，出現(xiàn)假陰性結(jié)果［17］。

過(guò)敏原陽(yáng)性患者可根據(jù)檢測(cè)報(bào)告調(diào)整自己的食物結(jié)構(gòu)或者生活方式。吸入性過(guò)敏原陽(yáng)性者要避免與過(guò)敏原接觸，改善居住環(huán)境，保持房間通氣干燥，衣被充分晾曬，清潔空調(diào)、空氣凈化器濾網(wǎng)等，不養(yǎng)寵物［18］, 食入性過(guò)敏原陽(yáng)性者要盡量避免攝入含陽(yáng)性成分的食物。由于包被抗原的種類與抗原特異性的限制，過(guò)敏性疾病與變應(yīng)原的檢測(cè)做不到完全符合，臨床醫(yī)生在結(jié)果解釋時(shí)需慎重。雖然過(guò)敏原檢測(cè)安全可靠，但也存在著缺乏符合我國(guó)國(guó)情的檢測(cè)項(xiàng)目和陽(yáng)性預(yù)計(jì)值參考范圍以及沒(méi)有國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的缺點(diǎn)。