周麗敏，陳毅聰

(增城市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，廣東增城511300)

全自動生化分析儀試劑針攜帶污染對脂肪酶測定的影響

周麗敏，陳毅聰

(增城市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，廣東增城511300)

全自動生化分析儀；脂肪酶；試劑針；交叉污染；清洗

目前，全自動生化分析儀已廣泛應用于臨床各大、中、小型實驗室，全自動生化分析儀具有快速、高效、準確、重復性好及多項目，多樣品處理能力等優(yōu)點。但由于生化分析儀在分析過程中必須共用吸樣針、試劑針、攪拌棒以及比色杯，使得交叉污染問題也隨之產生。交叉污染分為吸樣針、攪拌棒、樣品杯及試劑間(試劑針)的交叉污染，其中試劑間的交叉污染常不易發(fā)現(xiàn)，具有偶然性,對檢測結果影響最為嚴重。本實驗室在實際工作中發(fā)現(xiàn)脂肪酶這一生化項目存在不穩(wěn)定性，個別標本會偏離，但復查后又正常，懷疑存在試劑針交叉污染問題，下面針對脂肪酶這一項目做一試劑間交叉污染試驗[1]。

1 材料與方法

1.1 標本取正常人新鮮混合血清100ml。

1.2 材料LPS采用北京利得曼試劑，方法為酶顯色法，常規(guī)生化項目所用試劑為廈門英科新創(chuàng)試劑，校準品為試劑配套校準品；生化儀為日立7180全自動生化分析儀。

1.3 方法實驗前應確保實驗環(huán)境符合相關實驗操作條件，并嚴格按照儀器生產廠家的操作規(guī)程作儀器校準、維護及操作，以確保儀器始終處于正常狀態(tài)及檢測的準確性。試劑確保在有效期內并用配套校準品進行校準。

1.3.1 取適量混合血清，在日立7180生化分析儀上用新鮮混合血清連續(xù)測定脂肪酶(LPS)10次結果，結果在50～52U/L，測量結果的均值為51.1U/L，變異系數(shù)為1.1%，重復性試驗能夠滿足臨床需要。

1.3.2 取適量新鮮混合血清，在日立7180生化分析儀上，先測定一個常規(guī)生化項目(污染項目)，再測定LPS(受污染項目)，本實驗室34個常規(guī)生化項目與LPS逐一配對測試。

1.4 結果判斷當脂肪酶測定結果小于平均值95%或大于平均值105%,則強烈支持上一測試項目對LPS存在交叉污染[2]。

2 結果

2.1 初步判斷對LPS存在試劑針污染的項目分別為尿酸、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇五個項目，如表1。

表1 測定一個常規(guī)生化項目后再測定LPS結果比較

2.2 將疑似對LPS污染項目確定，根據表2，將尿酸、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇五個項目與LPS配對測定，如測定尿酸后，再連續(xù)測定LPS3次，結果如表2，對LPS引起污染的項目為總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇，而尿酸項目則可能是其他一些隨機誤差引起表2的不準確度。

2.3 清洗效果

2.3.1 確定污染項目后，在生化儀上進行特殊清洗功能設置，首先用水清洗，測定次數(shù)3次，效果如表3，血脂項目對LPS存在的污染用水清洗沒法消除。

2.3.2 在生化儀特殊清洗系統(tǒng)中設置用堿性清洗液清洗后，測定3次結果如表4，血脂項目總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇對LPS存在的污染用堿性清洗液清洗基本可以消除。

表2 測定疑似污染項目后再測定LPS三次結果比較

表3 用水清洗后結果比較

表4 堿性清洗液清洗后結果比較

3 討論

血清脂肪酶測定是臨床生化檢驗中最常見的項目之一，可用于急、慢性胰腺炎、總膽管結石等多種疾病的輔助診斷，但在日常生化檢驗工作中，發(fā)現(xiàn)LPS項目的檢測存在不穩(wěn)定性，一些標本會出現(xiàn)異常增高，與病人的臨床癥狀不符，將標本復查后又變成正常范圍，檢查儀器、試劑、校準品、室內質控品等并未發(fā)現(xiàn)異常，懷疑存在試劑間的交叉污染[3]。通過上面實驗證明血脂項目總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇這四個項目(簡稱血脂四項)對LPS存在試劑間的交叉污染。查看血脂四項的試劑成份，均含有脂蛋白脂肪酶成分，其中甘油三酯試劑中所含脂蛋白脂肪酶成分最高，因此污染LPS最為嚴正重。在針對血脂項目對LPS存在試劑間的交叉污染而設置的特殊清洗實驗中，發(fā)現(xiàn)用堿性清洗液清洗，可消除上述的交叉污染問題。另外據報導,脂肪酶項目的試劑配方中含有鈣離子作為激活劑,因此含有鈣離子絡合劑的試劑對它會發(fā)生負干擾，本實驗室生化試劑中含鈣離子絡合劑的試劑并不多，這種負干擾的發(fā)生幾率較少，因此并未進行這一實驗。

在全自動生化分析儀應用過程中，由于生化試劑的組分和含量問題,各項目間常常會出現(xiàn)明顯的正干擾或負干擾，這些造成干擾的原因主要來自于試劑的交叉污染，試劑間的交叉污染通常來自于生化儀的試劑針及攪拌棒的攜帶污染，丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)項目試劑中含有乳酸脫氫酶，對乳酸脫氫酶項目存在正干擾，乳酸脫氫酶、肌酸激酶項目試劑中含有鎂，對鎂項目測定存在干擾等等，要求檢驗人員對儀器工作流程、試劑組成、測定原理了如指掌,對試劑交叉污染的各種可能性加以考慮，合理設計程序。合理安排檢測項目的順序，在有交叉污染的檢測項目中間插入特殊清洗系統(tǒng)，最好是將被干擾項目置于干擾項目之前,或者干擾項目與被干擾項目間隔5個以上無干擾項目，以消除干擾發(fā)生的可能[4]。

[1]楊兆武,明德松.邁瑞全自動生化分析儀血糖試劑交叉污染及排除[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2012,30(1):98-99.

[2]于嘉屏.全自動生化分析儀及其試劑間化學污染對檢測結果的影響．中華檢驗醫(yī)學雜志[J].2007,30(11):1301-1302.

[3]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學出版社,2006:431-434.

[4]汪仙德,程金蓮.EDTA-K2對血糖、血脂和腎功能檢測的影響[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2013,31(1):82-83.

R446.11+2

B

1674-1129(2013)03-0288-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.03.039