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        使用熒光定量PCR檢測(cè)孕婦Uu和Ct感染情況分析

        2013-08-24 07:44:14吳玉霞
        關(guān)鍵詞:原體沙眼陽(yáng)性者

        吳玉霞

        (北海市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣西 北海536000)

        解脲脲原體(Ureaplasma urealyticum,Uu)和沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis,Ct)是可寄居于人體并能引起疾病的病原體。在婦女懷孕期間可導(dǎo)致母嬰傳播,對(duì)母體本身、胎兒及新生兒均可造成明顯的不良后果[1]??焖贉?zhǔn)確診斷非常重要,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time quantity PCR)方法檢測(cè)臨床收集的2348份孕婦標(biāo)本的Uu和Ct,分析孕婦Uu和Ct的感染情況,取得較好效果,現(xiàn)報(bào)道如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 收集2006年7月至2013年1月在我常規(guī)產(chǎn)前檢查的孕婦2348例,年齡18~38歲。所有被檢查者在此研究前30d均無(wú)局部或全身使用抗菌素史。

        1.2 標(biāo)本處理 用無(wú)菌棉拭子輕輕擦取患者生殖道宮頸分泌物密閉送檢。將棉拭子放入0.5ml無(wú)菌生理鹽水中浸泡10min,充分?jǐn)D壓洗脫棉簽,吸取200μl放置-20℃保存待檢。

        1.3 方法

        1.3.1 PCR法 儀器使用杭州博日Line Gene9620自動(dòng)熒光PCR擴(kuò)增儀,試劑盒由中山醫(yī)科大學(xué)達(dá)安基因診斷中心提供,操作嚴(yán)格按說(shuō)明書。以Uu或Ct-DNA≥103copies/ml作為判斷陽(yáng)性的標(biāo)準(zhǔn)。質(zhì)控物由廣西臨床檢驗(yàn)中心提供。

        1.3.2 培養(yǎng)法 Uu培養(yǎng)、鑒定試劑盒由珠海浪峰生物技術(shù)有限公司提供,Ct培養(yǎng)試劑盒由珠海浪峰生物技術(shù)有限公司提供,操作嚴(yán)格按說(shuō)明書。

        1.3.3 統(tǒng)計(jì)分析 將得到的結(jié)果應(yīng)用卡方χ2檢驗(yàn)分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        檢測(cè)的2348例孕婦中,使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢出Uu陽(yáng)性者920例 (39.18%),Ct陽(yáng)性者286例 (12.18%),Uu和 Ct混合陽(yáng)性者 11例(0.47%),合計(jì)檢出陽(yáng)性者1217例(51.83%)。培養(yǎng)法檢出Uu陽(yáng)性者406例 (17.29%),CT陽(yáng)性者44例(1.87%),Uu和 Ct混合陽(yáng)性者 9例 (0.38%), 合計(jì)459例(19.54%),結(jié)果實(shí)時(shí)熒光定量PCR法陽(yáng)性檢出率明顯高于培養(yǎng)法(P<0.05),見表1。

        表1 PCR與培養(yǎng)法的陽(yáng)性檢出率比較[n(%)]

        3 討論

        Uu、Ct是介于細(xì)菌和病毒之間的病原微生物,是人類泌尿生殖道最常見的寄生菌之一[2]。均能引起女性生殖道感染,相當(dāng)部分為無(wú)癥狀攜帶者,因此令感染者未能引起重視而及時(shí)就醫(yī)。當(dāng)孕婦感染時(shí)雖沒(méi)有不適,但Uu是引起自然流產(chǎn),而Ct是引起先兆流產(chǎn)的危險(xiǎn)因素。且孕婦感染Uu和Ct可引起胎膜早破[3]產(chǎn)生不良的妊娠結(jié)局 ,還可通過(guò)母嬰的垂直傳播使新生兒發(fā)病 ,如新生兒肺炎、結(jié)膜炎、中耳炎、陰道炎及腦膜炎等。有文獻(xiàn)報(bào)道20~40歲年齡組患者感染率為85.80%是發(fā)病的高危人群[4],而此年齡段也是最佳生育期。本文檢測(cè)的2348例孕婦中,1017陽(yáng)性占43.31,高于國(guó)內(nèi)報(bào)道[5],說(shuō)明孕婦感染Uu和Ct的幾率相當(dāng)高。

        本文就目前Uu和Ct檢測(cè)常用的兩種方法實(shí)時(shí)熒光定量PCR法和培養(yǎng)法做比較,結(jié)果實(shí)時(shí)熒光定量PCR法陽(yáng)性檢測(cè)率顯著高于培養(yǎng)法法 (P<0.05)。因此本文建議孕期應(yīng)重視生殖道Uu和Ct感染的檢測(cè),在產(chǎn)科門診建卡時(shí)對(duì)宮頸分泌物行Uu和Ct常規(guī)篩查,且選用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法,及時(shí)發(fā)現(xiàn)及早治療無(wú)癥狀攜帶者,達(dá)到預(yù)防胎膜早破、早產(chǎn),降低母嬰病率,提高圍產(chǎn)保健質(zhì)量,達(dá)到優(yōu)生優(yōu)育目的。

        [1]Mardh PA.Influence of infection with Chlamydia trachomatia on pregnancy outcome,infanl health and life-Jocg sequelac in infected offxpning[J].Best Pruct Res Clin Obatet Cynaecd,2002,16(6):847-864.

        [2]馬曉波,宋秀宇,鄭燕青,等.??苹颊呓怆咫逶w的培養(yǎng)結(jié)果及耐藥性分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2009,27(6):681.

        [3]尤莉芳,蔡惠萍.孕婦生殖道解脲支原體和沙眼衣原體感染與胎膜早破的關(guān)系研究[J].蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)2011,31(4)684-685.

        [4]姚曄,萬(wàn)瓊,李志紅,等.345例支原體陽(yáng)性患者病原體分布及藥敏分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2010,28(1):84-85.

        [5]梁寶珠,解脲脲原體沙眼衣原體與妊娠結(jié)局的關(guān)系[J].解脲脲原體沙眼衣原體與妊娠結(jié)局的關(guān)系[J].河北醫(yī)學(xué),2006,(5):401-402.

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