鐘遠(yuǎn)宣，尹麗萍

(1.平樂縣大發(fā)鄉(xiāng)水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)站，廣西 平樂 542403；2.平樂縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，廣西 平樂 542403)

血液生化指標(biāo)反映機(jī)體營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝規(guī)律及健康狀況。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)某一時(shí)間段產(chǎn)后奶水牛的血液生化指標(biāo)，通過實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以準(zhǔn)確分析水母牛的產(chǎn)后健康狀況，為今后產(chǎn)后奶水牛在疫病監(jiān)控方面提供切實(shí)可靠的依據(jù)，這方面目前在國(guó)內(nèi)報(bào)道很少。為了解奶水牛產(chǎn)后肝功能血液生化指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化情況，以便為奶水牛疫病監(jiān)控、防治、營(yíng)養(yǎng)研究提供科學(xué)理論依據(jù)，設(shè)計(jì)了此次試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)動(dòng)物選擇廣西某水牛種畜場(chǎng)臨床健康的母水牛17頭，其中么雜一代10頭、么雜二代3頭、尼雜一代2頭、尼雜二代2頭。試驗(yàn)牛年齡為48～60月齡，體重為410～560kg，胎次1～2胎。健康狀況除了有1頭患過胎衣不下、1頭子宮外翻以外，其余均為健康牛。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1采血

產(chǎn)后的0、7、14、21、28、35、42、49、56d連續(xù)上午8：00左右飼前頸靜脈采血，按所測(cè)指標(biāo)要求，用一次性使用自動(dòng)定量靜脈采血管(加肝素抗凝劑)采血5 mL，共兩支管。采血后立即送到實(shí)驗(yàn)室處理待測(cè)。

1.2.2血液生理生化指標(biāo)的測(cè)定方法

測(cè)定方法見表1。

表1 血液生理生化指標(biāo)的測(cè)定方法

1.3 數(shù)據(jù)處理

所有的測(cè)定結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。測(cè)定結(jié)果的范圍是由每一項(xiàng)測(cè)定結(jié)果的最低限與最高限來表示。用統(tǒng)計(jì)分析軟件分析各測(cè)定指標(biāo)之間的相關(guān)性，以顯著性表示。

2 產(chǎn)后奶水牛血液生化指標(biāo)的動(dòng)態(tài)檢測(cè)結(jié)果

結(jié)果見表2、表3、表4。血液生化主要指標(biāo)相關(guān)性見表5。

表2 產(chǎn)后奶水牛的血酮(Ket)、血糖(Glu)、血脂、總蛋白(TP)、白蛋白的變化

表3 產(chǎn)后奶水牛鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)、堿性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶(GGT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)含量的檢測(cè)結(jié)果變化

表4 產(chǎn)后奶水牛α-羥丁酸脫氫酶、總膽紅素含量的檢測(cè)結(jié)果變化

表5 血液生化主要指標(biāo)相關(guān)性

3 討論

3.1 血酮

奶水牛分娩后血酮初期變化極不規(guī)則，在產(chǎn)后第49天達(dá)到最大值(1.97±2.88)mg/L，從表2中可以看到奶水牛血漿酮體含量在產(chǎn)后的前21d變化不是很規(guī)則，但是在21～49d的這段時(shí)間由(1.21±1.44)mg/L升至(1.97±2.88)mg/L的最大值，說明產(chǎn)后對(duì)能量消耗量還是在逐漸增加；在產(chǎn)后的0～21d呈現(xiàn)波浪式變化，表明這一時(shí)期水牛對(duì)能量調(diào)節(jié)能力存在個(gè)體間的差異；產(chǎn)后第21天以后逐漸呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)，說明從這一時(shí)期開始水牛對(duì)能量的調(diào)節(jié)處于積極的作用。血酮在產(chǎn)后0～7d、49～56d差異不顯著(P>0.05)，而在產(chǎn)后7～49d差異極顯著(P<0.01)。產(chǎn)后第49天是出現(xiàn)血酮的高峰期，這與PATEL[1]等報(bào)道一致。

3.2 血糖

從表2中可以看出血糖在分娩時(shí)最高，達(dá)(69.54±23.74)mg/L，主要是受腎上腺皮質(zhì)激素應(yīng)激所致；以后逐漸降低，在產(chǎn)后第56天降到最低，表明奶水牛產(chǎn)奶量較低，消耗的能量在產(chǎn)后沒有明顯的變化，與奶牛相比不易發(fā)生低血糖癥[2]；從產(chǎn)后0～56d血糖基本上變化不大，在一個(gè)較平緩的正常范圍內(nèi)。產(chǎn)后0d與7d、14d、21d、28d、35d差異極顯著(P<0.01)，與其他時(shí)間之間差異不顯著(P>0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：奶水牛似乎不存在發(fā)生能量負(fù)平衡的問題，因?yàn)槠湓诋a(chǎn)后的試驗(yàn)期間血糖盡管有所波動(dòng)，但是一直維持在正常范圍之內(nèi)，結(jié)果與REDA[3]在埃及奶水牛測(cè)定值基本一致。此現(xiàn)象是否與胰島素抵抗有關(guān)，因?yàn)槟趟．a(chǎn)后血糖胰島素(INS)未見顯著下降[4]。因此，圍產(chǎn)前期奶水牛只要保持能量攝入平衡，產(chǎn)奶量不高的情況下是不存在能量負(fù)平衡及能量代謝障礙的[5]。

3.3 血脂

分娩后的血脂含量從產(chǎn)時(shí)(1.55±0.45)g/L較快上升到產(chǎn)后42d (2.33±0.55)g/L，之后緩慢下降，到產(chǎn)后56d為(2.10±0.51)g/L，這是由于分娩后體脂逐漸動(dòng)員，而此時(shí)機(jī)體不能對(duì)血脂進(jìn)行有效調(diào)節(jié)，導(dǎo)致血脂升高，但是在產(chǎn)后42d后卻又緩慢降低[6]。這在我國(guó)奶水牛血脂在產(chǎn)后動(dòng)態(tài)變化檢測(cè)中尚未見報(bào)道。產(chǎn)后14d與21d、28d、35d、42d、49d、56d各時(shí)間段血脂差異極顯著(P<0.01)，充分說明奶水牛產(chǎn)后血脂持續(xù)升高，并且在產(chǎn)后的42d達(dá)到最高值，隨后緩慢下降但是變化不大，說明奶水牛產(chǎn)后能量平衡調(diào)節(jié)機(jī)制比較平穩(wěn)，不易發(fā)生酮病和脂肪肝[7]。奶水牛在分娩后對(duì)能量的需求增加，導(dǎo)致機(jī)體血糖下降，血脂產(chǎn)生相應(yīng)增加，標(biāo)志脂肪動(dòng)員有所增加，在分娩后42d達(dá)到高峰。奶水牛脂肪動(dòng)員增加，意味著血脂增加， AST也隨之有所增加，在產(chǎn)后28d最高。但是變化范圍都在正常值內(nèi)。可見，奶水牛血糖在產(chǎn)后降低能促進(jìn)脂肪動(dòng)員，使血液血脂含量增加。

3.4 TP動(dòng)態(tài)變化

TP從產(chǎn)后的(75.43±8.78)g/L逐漸升高，在產(chǎn)后第21天達(dá)到峰值(79.66±9.22)g/L，以后緩慢下降；產(chǎn)后21d與28d TP差異極顯著(P<0.01)，0～28d TP差異顯著(P<0.05)。說明在產(chǎn)后0～28d內(nèi)攝入的蛋白質(zhì)較多。

3.5 ALB動(dòng)態(tài)變化

ALB從分娩0d的(30.57±4.74)g/L升至產(chǎn)后56d的(32.98±4.69)g/L，從產(chǎn)后的0d到56d基本保持在一個(gè)比較平穩(wěn)的范圍內(nèi)，上升幅度較小。在試驗(yàn)期內(nèi)的0d、21d、35d、56d；35d、56d；21d、42d ALB差異極顯著(P<0.01)，而在7d、42d ALB差異顯著(P<0.05)。變化不規(guī)則，這可能是奶水牛產(chǎn)奶量不大，ALB在產(chǎn)后與產(chǎn)前沒有明顯變化，生成也未受到抑制，盡管妊娠期間需要供給胎兒豐富的營(yíng)養(yǎng)[8]。

3.6 OCT 動(dòng)態(tài)變化

Ott報(bào)道OCT正常值范圍在6.6～11.8U/L[9],本試驗(yàn)中，OCT最低值出現(xiàn)在產(chǎn)后56d，為(7.62±4.67)U/L，而最高值在產(chǎn)后14d，為(13.28±4.77)U/L。樊立超等[10]報(bào)道的無脂肪肝奶牛OCT值為10.74 U/L，從表3中可看到OCT峰值出現(xiàn)在產(chǎn)后14d 為(13.28±4.77)U/L，從表3中可看出堿性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶(GGT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸基轉(zhuǎn)移酶(ALT)峰值都出現(xiàn)在產(chǎn)后14d，說明OCT在調(diào)節(jié)過程中的靈敏性較其他各種酶高。OCT在14d上升至最大值后逐漸下降，到56d降到最低值(7.62±4.67)U/L，統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，在產(chǎn)后0d、7d、14d及49d、21d、28d、35d、42d差異極顯著(P<0.01)。OCT系肝臟器官專一性酶，幾乎僅在肝臟內(nèi)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)肝細(xì)胞破損時(shí)，該酶被釋放入血液，引起血漿OCT活性升高[11]。OCT催化鳥氨酸生成瓜氨酸，此反應(yīng)必須在肝細(xì)胞線粒體中進(jìn)行，OCT逸入血液導(dǎo)致瓜氨酸生成受阻，從而進(jìn)一步影響到精氨酸以及尿氨循環(huán)，機(jī)體代謝活動(dòng)受到阻礙，OCT活力升高反映肝實(shí)質(zhì)受到損害[12]?？赡苁怯捎诋a(chǎn)后奶水牛分泌乳汁肝臟功能較活躍，引起該酶在血漿中的活性升高[13]。

3.7 ALP動(dòng)態(tài)變化

ALP存在于身體各種組織中。血清中ALP主要來源于肝臟，血清ALP測(cè)定主要用于肝膽系統(tǒng)疾病的診斷。堿性磷酸酶峰值出現(xiàn)在產(chǎn)后的14d為(188.58±130.12)U/L，隨后逐漸下降，在試驗(yàn)0d、7d、14d、21d、28d、35d、42d、49d、56d各時(shí)間段ALP差異極顯著(P<0.01),但是都處于正常范圍內(nèi)。

3.8 GGT動(dòng)態(tài)變化

GGT從產(chǎn)后開始就一直處于上升趨勢(shì)，并且在產(chǎn)后14d達(dá)到峰值，為(24.31±4.74)U/L，隨后便迅速在機(jī)體調(diào)節(jié)下呈下降趨勢(shì)。但是變化數(shù)值始終在正常范圍內(nèi)，產(chǎn)后0d、7d、14d、21d、35d、56d GGT差異極顯著(P<0.01)，其他時(shí)間段GGT差異顯著(P<0.05)。GGT在肝細(xì)胞內(nèi)合成，血清中的GGT主要來自肝臟；如果肝實(shí)質(zhì)受到擠壓，可導(dǎo)致肝細(xì)胞的炎癥，使肝細(xì)胞合成GGT增加，從而導(dǎo)致血清中GGT增高。在肝實(shí)質(zhì)疾病時(shí)呈輕度增高，是肝膽疾病中陽性率最高的酶，有助于肝膽疾病的鑒別診斷，在肝臟輕度損傷時(shí)其靈敏度比較高,是脂肪肝較敏感的生化指標(biāo)。但GGT缺乏特異性，與其他肝功能指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，有助于對(duì)酮病的早期診斷[14]。

3.9 AST動(dòng)態(tài)變化

奶水牛血中AST正常值為78～132U/L[15]，從表3中知道AST在產(chǎn)后7d最低，為(107.44±25.74)U/L，最高值為產(chǎn)后14d(122.10±26.77)U/L,這與肖玲等[16]的(77.42±28.06)U/L和Moallem 等[17]對(duì)產(chǎn)后奶牛的測(cè)定值61.7～63.9U/L相差比較大，與Ott[9]報(bào)道的接近。水牛血漿AST含量相對(duì)較穩(wěn)定，即水牛在AST升高的刺激下，機(jī)體的反饋調(diào)節(jié)使之能保持一個(gè)較長(zhǎng)時(shí)間的穩(wěn)定。經(jīng)統(tǒng)計(jì)方差分析，在0d、7d、14d、21d、28d、35d 差異極顯著(P<0.01)。AST主要存在于線粒體，肝病變較輕時(shí)，它的升高程度低于ALT， AST/ALT<1.0，在重癥肝炎、慢性肝炎，特別是肝硬化時(shí)，AST將會(huì)大幅升高。

3.10 ALT動(dòng)態(tài)變化

ALT主要存在于肝細(xì)胞的胞質(zhì)中，是肝損傷的一個(gè)較靈敏指標(biāo)，其正常值為11～40U/L[18],在本次測(cè)定中ALT最低值出現(xiàn)在產(chǎn)后49d的(18.95±7.58)U/L，最高值為產(chǎn)后14d的(37.46±9.92)U/L，經(jīng)統(tǒng)計(jì)，水牛產(chǎn)后35d、42d、49d與59d ALT差異極顯著(P<0.01)。

3.11 α-HBDH動(dòng)態(tài)變化

從表4中知道，產(chǎn)后奶水牛α-羥丁酸脫氫酶由分娩當(dāng)天的(334.61±100.51)U/L緩慢升高到產(chǎn)后49d的最高值(603.48±176.25)U/L，變化較平緩。 在42d、49d、56d α-羥丁酸脫氫酶差異極顯著(P<0.01)。心肌梗死時(shí)α-HBDH明顯升高，且持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，故多用于心肌梗死的診斷。肝和心肌疾患α-HBDH亦可增高，但肝病時(shí)變化不顯著，故常以α-HBDH與LDH比值用于肝和心臟疾患的鑒別診斷。正常α-HBDH/LDH為0.67，急性心肌梗死患者>0.8，肝病患者則<0.6。因此，測(cè)定產(chǎn)后奶水牛血漿中α-羥丁酸脫氫酶指標(biāo)可能對(duì)檢測(cè)水牛肝功能意義不大。

3.12 TBiL動(dòng)態(tài)變化

總膽紅素在分娩當(dāng)天含量達(dá)到峰值(5.91±3.06)U/L，隨后下降，0d、7d總膽紅素含量變化差異極顯著(P<0.01)，在整個(gè)試驗(yàn)過程中所監(jiān)測(cè)的產(chǎn)后奶水牛血漿中總膽紅素含量始終在正常生理范圍值內(nèi),血清膽紅素含量升高幅度不明顯時(shí)，其對(duì)肝細(xì)胞損害就不是一個(gè)靈敏的指標(biāo)，但肝臟疾病中膽紅素濃度明顯增高，可作為肝細(xì)胞有嚴(yán)重?fù)p害的診斷指標(biāo)。

3.13 相關(guān)指標(biāo)之間的相關(guān)性

在正常范圍內(nèi),白蛋白與α-羥丁酸脫氫酶間呈極顯著(P<0.01)正相關(guān); 鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶與堿性磷酸酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶間呈極顯著(P<0.01)正相關(guān);而血糖與天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶呈顯著(P<0.05)正相關(guān)。