江蘇省鹽城市食品藥品監(jiān)督檢驗中心(224002)陳遠霞 支榮榮
2016年3月,我中心參加了CNAS組織的中藥飲片真?zhèn)舞b別能力驗證,谷精草為驗證品種之一,本次提供的樣品為華南谷精草(經(jīng)鑒別后確定),系谷精草的偽品,借此機會,對谷精草與華南谷精草的鑒別方法進行了進一步研究,以探索更加快捷、簡便、專屬的鑒別方法。
谷精草為中國藥典2015 年版[1]收載,為谷精草科植物谷精草Eriocaulon buergerianum Koern.的干燥帶花莖的頭狀花序。近年來,常見偽品有同科植物賽谷精草、華南谷精草、毛谷精草的全草或頭狀花序,石竹科蚤綴的全草,應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格區(qū)分[2][3][4]。谷精草屬植物,由于花序較小,基原相近,鑒別比較困難。本文從性狀、顯微、薄層色譜三方面對兩者進行了研究比較,研究了兩者典型的鑒別要點和快捷的鑒別方法,可作為日常檢驗及快速檢驗的參考。
1.1 儀器 Olympus bx51顯微成像系統(tǒng)。
1.2 試藥 谷精草供試品(CNAS能力驗證樣品<經(jīng)鑒定為華南谷精草>,由廣東省食品藥品檢驗所提供);谷精草對照藥材(中檢院提供,批號:121631-201202);谷精草藥材(鹽城市中藥飲片有限公司提供,經(jīng)鑒定為谷精草正品);試劑均為分析純。
2.1 性狀鑒別 谷精草及華南谷精草主要區(qū)別歸納為以下幾點,詳見附表;性狀區(qū)別特征見附圖1。
附圖1 性狀圖片
2.2 顯微鑒別[6][7][8]
2.2.1 粉末顯微特征 華南谷精草與谷精草特征相似之處:本品粉末黃綠色。非腺毛甚長,2~4細(xì)胞?;ㄇo表皮細(xì)胞表面觀長條形,表面有縱直角質(zhì)紋理,氣孔類長方形。果皮細(xì)胞表面觀類多角形,垂周壁念珠狀增厚。花粉粒類圓形,具螺旋狀萌發(fā)孔。與谷精草區(qū)別之處:(1)腺毛。華南谷精草:腺毛頭部圓錐形,頂端較尖,常彎曲。谷精草:腺毛頭部較長,長橢圓形。(2)種皮表皮細(xì)胞。華南谷精草:表面觀扁長六角形,紅棕色;部分壁上衍生支柱,支柱有三種形態(tài):①傘形支柱,傘柄與正品相近,但傘臂比正品短;②部分支柱頂端銳尖,無傘臂;③部分支柱頂端分叉。谷精草:表面觀扁長六角形,淡黃色;壁上衍生傘形支柱,傘臂較長。見附圖2。
附圖2 粉末顯微圖。A-腺毛(華南谷精草);B-腺毛(谷精草);C-衍生傘形支柱(谷精草);D-衍生傘形支柱-傘臂較短(華南谷精草);E-衍生支柱-頂端銳尖,無傘臂(華南谷精草);F-衍生支柱-頂端分叉(華南谷精草)。
附圖3 華南谷精草花莖橫切面
附圖4 谷精草花莖橫切面
2.2.2 本品花莖的橫切面 華南谷精草特征:本品橫切面五邊形,表皮細(xì)胞一列,角隅處無厚角組織。皮層薄壁細(xì)胞數(shù)列,外韌型維管束5個,排列成五星形。髓部較大,見附圖3。
谷精草特征:本品橫切面類圓形,有5處凸起的棱角,表皮一列細(xì)胞,棱角處有明顯的厚角組織。皮層薄壁細(xì)胞間具有5個氣室,氣室外側(cè)通氣細(xì)胞含眾多細(xì)小草酸鈣方晶,外韌型維管束約10個,排列成環(huán)狀。髓部較小,見附圖4。
2.2.3 薄層色譜鑒別[1]供試品溶液制備:取本品粉末1g,加乙醇30ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加乙醇1ml 使溶解,作為供試品溶液。對照藥材溶液制備:另取谷精草對照藥材1g,同法制成對照藥材溶液。薄層板:硅膠G薄層板;展開劑:甲苯-丙酮(10∶0.6);結(jié)果:置紫外光燈(365nm)下檢視,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,熒光主斑點不完全一致,詳見附圖5。
經(jīng)采用不同的溫濕度條件及不同薄層板(自制硅膠G薄層板與青島海洋化工廠分廠產(chǎn)硅膠預(yù)制薄層板)進行了比較,該薄層條件重現(xiàn)性較好,層析的結(jié)果穩(wěn)定。
附圖5 薄層色譜圖。1、谷精草 2、華南谷精草
附表 谷精草及華南谷精草的鑒別要點
由于谷精草與華南谷精草基原相近,在性狀、顯微、薄層色譜等方面相似度較高,給中藥鑒定以及基層監(jiān)管人員快速鑒別帶來了難度。本文在性狀方面經(jīng)過反復(fù)比較,選擇了兩者的典型特征,總結(jié)歸納了5個主要鑒別要點,可作為鑒定人員和現(xiàn)場執(zhí)法人員快速鑒別參考。在顯微鑒別方面,按照中國藥典對谷精草的文字描述,華南谷精草與谷精草并沒有明顯區(qū)別,但筆者通過反復(fù)比較,主要三個細(xì)微的差異:一是腺毛的頭部形態(tài),二是種皮表皮細(xì)胞的顏色以及衍生的支柱,三是花莖橫切面,這三個區(qū)別目前查閱到的研究資料很少。在薄層色譜方面,兩者斑點不完全一致。谷精草及華南谷精草性狀等方面的典型區(qū)別,可作為藥典標(biāo)準(zhǔn)修訂以及日常檢驗參考,也可作為中藥快檢資料加以補充完善。