馮丹丹，李晶晶

河南科技大學臨床醫(yī)學院/河南科技大學第一附屬醫(yī)院中心實驗室，河南洛陽 471000

自身免疫性疾病血清中存在高價的自身抗體，是臨床診斷自身免疫性疾病的重要參考依據[1-2]。間接免疫熒光法檢測抗核抗體(ANA)對多種自身免疫性疾病具有臨床診斷價值[3-4]。自身抗體譜檢測是診斷自身免疫性疾病的標準之一[5]，本研究對1 400例自身免疫性疾病住院患者中368例ANA陽性患者的ANA譜及ANA檢測結果進行分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年1-8月在河南科技大學第一附屬醫(yī)院中心實驗室接收的1 400例進行ANA譜及ANA檢測的自身免疫性疾病住院患者為研究對象，其中男368例，女1 032例。診斷依據參照1997 年修訂的國際通用的診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的標準[6]，2015 年美國風濕病學會/歐洲抗風濕聯盟發(fā)表的痛風分類標準診斷類風濕關節(jié)炎(RA)[7]，2012 年美國風濕病學會發(fā)表的診斷干燥綜合征(SS)的標準[8]等。本研究經本院倫理委員會研究通過且所有患者簽署知情同意書，所有研究對象均具有完整的病歷資料且符合診斷標準。排除合并其他重大疾病者、孕婦、女性月經期者，檢測期間發(fā)熱及不能配合者。

1.2方法

1.2.1標本采集及儲存 受檢者清晨空腹，采集靜脈血2～3 mL，待血標本凝固后，3 000 r/min離心5 min立即檢測或分離血清-20 ℃冷凍保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2儀器與試劑 采用歐蒙(杭州)醫(yī)學實驗診斷有限公司生產的ANA檢測試劑盒檢測ANA，利用歐蒙(杭州)醫(yī)學實驗診斷有限公司提供的ANA譜試劑盒及EURO Blot Master Ⅱ免疫印跡儀檢測ANA譜。

1.2.3方法 本實驗室將抗體滴度分為1∶100、1∶320、1∶1 000；ANA譜檢測采用免疫印跡儀法，嚴格按SOP進行操作，顯色、膜條干燥后儀器系統(tǒng)自動判讀結果，檢測結果的判讀根據膜條上抗原標志線是否顯色及顯色的深淺進行判定。ANA譜包括抗核小體抗體、抗組蛋白抗體(Histon)、抗SM-D1抗體、抗U1-snRNP抗體、抗SS-A/Ro-60抗體、抗SS-A/Ro-52抗體、抗La/SS-B抗體、抗Scl-70抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗著絲粒蛋白B(CENP-B)抗體、抗Jo-1抗體、抗核糖體P蛋白(Rib-P)抗體、抗PM-Scl抗體、抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)、抗線粒體M2(AMA-M2)抗體共15種不同抗體[4]。任何一種抗體陽性即視為ANA譜檢測為陽性。

1.3統(tǒng)計學處理 采用SPSS20.0處理軟件進行統(tǒng)計學分析，計數資料以例數或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1一般資料 1 400例研究對象中ANA陽性368例(26.29%)，其中267例為首診患者，101例為復查患者。267例ANA陽性首診患者中男91例，女176例；年齡15～83歲，平均(51.4±14.23)歲；根據系統(tǒng)性自身免疫性疾病分為SLE 41例，RA 87例，混合型結締組織病(MCTD)31例，硬皮病(PSS)28例，SS 42例，原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)11例，特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)12例，未明確診斷者15例。101例患者經首次診斷確診后進行為期2周的系統(tǒng)治療，然后復查血清ANA譜及ANA測定。

2.2ANA陽性的267例首診患者ANA譜分布情況 ANA陽性的267例首診患者中ANA譜陽性者84例(31.5%)。其中SLE患者的抗雙鏈DNA抗體、抗核小體抗體陽性率高,分別占SLE患者的85.4%和87.8%，見表1。結果顯示，ANA譜的自身抗體中抗雙鏈DNA抗體、抗SS-A/Ro-60抗體、抗SS-A/Ro-52抗體和抗Scl-70抗體均在多種自身免疫性疾病中表達，其次抗La/SS-B抗體、抗Jo-1抗體、抗Rib-P抗體、抗組蛋白抗體、抗SM-D1抗體和抗U1-snRNP抗體也在多種自身免疫性疾病中表達。

表1 ANA抗體陽性的267例首診患者ANA譜測定結果[n(%)]

2.3101例復查患者的ANA滴度與治療前相比 101例復查患者治療前ANA滴度分布情況為<1∶100者10例(9.9%)，≥1∶100(33例)、≥1∶320(45例)、≥1∶1 000(13例)者共91例(90.1%)。經過2周的治療后復查結果顯示，ANA滴度<1∶100者58例(57.4%)，≥1∶100(21例)、≥1∶320(19例)及≥1∶1 000(3例)者共43例(42.6%)。101例患者經過2周的治療后，其ANA滴度顯著降低，與治療前相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

2.4ANA性別差異情況 1 400例自身免疫性疾病患者中，女性患者ANA陽性率26.3%(271/1 032)，男性患者ANA陽性率35.9%(132/368)，女性患者ANA陽性率明顯高于男性，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

3 討 論

ANA是自身抗體的總稱，與自身免疫性疾病關系密切，可用于自身免疫性疾病的篩查[7]。目前，自身免疫性疾病的發(fā)病機制尚不完全明確，診斷較為復雜[8]，其診斷主要依據臨床表現及自身免疫實驗室的相關檢測結果[9],間接免疫熒光法檢測ANA具有較高的靈敏度和特異度，采用免疫印跡法檢測ANA譜，特異性高，但靈敏度低，兩種檢測方法均具有其局限性，易出現假陰性或假陽性結果。因此兩種方法聯合檢測對疾病的診斷具有互補意義。

本研究顯示，ANA譜中抗雙鏈DNA抗體、抗SS-A/Ro-60抗體、抗SS-A/Ro-52抗體和抗Scl-70抗體均在多種自身免疫性疾病中表達，其次抗La/SS-B抗體、抗Jo-1抗體、抗Rib-P抗體、抗組蛋白抗體、抗SM-D1抗體和抗U1-snRNP抗體也在多種自身免疫性疾病中表達。不同ANA譜對特定疾病的診斷也具有不同的靈敏度及特異度。因此可根據ANA譜的表達特點，對疾病進行輔助診斷，進一步指導臨床用藥及針對性治療。研究結果還顯示，101例復查患者治療前，ANA滴度<1∶100者10例(9.9%)，ANA滴度為≥1∶100、≥1∶320、≥1∶1 000者共91例(90.1%)，經過一段時間的治療后，對患者ANA抗體進行復查，其ANA滴度<1∶100者58例(57.4%)，ANA滴度為≥1∶100、≥1∶320、≥1∶1 000者共43例(42.6%)，與治療前相比，其ANA滴度顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。因此ANA滴度對自身免疫性疾病的治療及判斷病情轉歸具有指導作用，結合臨床資料及隨訪綜合分析，ANA滴度對反映病情具有很好的參考價值。

本研究還顯示1 400例自身免疫性疾病患者中，女性患者ANA陽性率明顯高于男性，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。有研究表明，性激素以多種不同方式對人體免疫系統(tǒng)產生影響[10]。

綜上所述，本研究證實血清中ANA及ANA譜對自身免疫性疾病的診斷和治療具有很好的指導意義。