敖梅紅，鄭涵，李明梅，李隆玉

（江西省婦幼保健院腫瘤科，南昌 330006）

已證實(shí)人乳頭瘤病毒(HPV)感染是宮頸癌的直接病因， 不同的地區(qū)， 不同病理類型宮頸癌其HPV 感染型別有一定的差別。然而，在宮頸癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中是否也存在不同的HPV 基因型別也存在差異呢？ 本研究旨在探討宮頸癌高發(fā)區(qū)江西地區(qū)宮頸癌中不同HPV 感染的型別與宮頸癌病理特性之間的關(guān)系，為宮頸癌防治提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 回顧性分析我院腫瘤科于2015 年1 月-2015 年12 月住院因IB-IIA 宮頸癌行根治性宮頸癌手術(shù)患者。入選標(biāo)準(zhǔn)：既往無(wú)宮頸手術(shù)史，無(wú)盆腔放射治療史；術(shù)前3 個(gè)月內(nèi)已用導(dǎo)流雜交技術(shù)進(jìn)行HPV 型別檢測(cè)；資料完整。 排除標(biāo)準(zhǔn)：既往宮頸手術(shù)史，盆腔放射治療史；未行或用其他方法檢測(cè)宮頸HPV 型別；資料不完整。

1.2 組織學(xué)、臨床分期判斷標(biāo)準(zhǔn) 組織病理和臨床分期由2 名本院該專業(yè)的專家進(jìn)行診斷， 有疑問(wèn)時(shí)經(jīng)第3 名專家協(xié)商確診。 組織病理分類遵照2014 年世界衛(wèi)生組織分類標(biāo)準(zhǔn)： 鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、 其他類型腫瘤。 子宮頸癌的臨床分期按2009年FIGO 子宮頸癌的臨床分期標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 研究方法

1.3.1 HPV 型別檢測(cè) 在術(shù)前3 個(gè)月內(nèi)采用導(dǎo)流雜交技術(shù)進(jìn)行HPV 型別檢測(cè)方法： 針對(duì)HPV L1段基因設(shè)計(jì)引物,利用生物素標(biāo)記的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,然后DNA 快速雜交儀,與固定在纖維膜上的HPV 基因型的特異性探針進(jìn)行雜交和顯色, 檢測(cè)HPV 感染型別。 包括 HPV6、11、l6、18、26、31、33、35、39、40、42、43、44、45、51、52、53、54、56、58、59、61、66、68、73、82、83 及 CP8304。

1.3.2 結(jié)果判定 每一張芯片有生物素點(diǎn)和IC 點(diǎn)各一個(gè)，當(dāng)兩點(diǎn)同時(shí)顯色才為HPV 陽(yáng)性。根據(jù)雜交膜條上相應(yīng)點(diǎn)的有無(wú)和位置判讀HPV 感染的亞型，多點(diǎn)陽(yáng)性即為多重感染。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué) 分析采用SPSS 16.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)或Fisher 確切概率法，以P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.

2 結(jié)果

2015 年 1 月-2015 年 12 月在我院腫瘤科有339 人因IB-IIA 期宮頸癌行根治性宮頸癌手術(shù)，符合本研究條件的141 例，其中鱗癌132 例，腺癌7 例，其他病理類型2 例。年齡為26-67 歲，中位年齡 46 歲；IB1 期 110 例，IB2 期 15 例，IIA1 期 13例，IIA2 期 3 例。

宮頸癌組織中總HPV 感染率為89.4%（126/141），單一感染率為 77.3%（109/141），多重感染率為12.1%（17/141）。 單一感染中主要感染型別依次為 HPV l6、18、52 和 58，分別為 82 例、12 例、4 例、3 例；17 例多重感染中含 16 型、18 型， 分別為 14例、2 例。

HPV 多重感染與單一感染、無(wú)HPV 感染的比例在病理分級(jí)方面存在差異(P＜0.05)，在年齡、脈管見(jiàn)癌栓、肌層浸潤(rùn)、臨床分期、病理類型和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移上無(wú)差異（見(jiàn)表1）。

16、18 型感染（含多重感染）與其他型別感染、無(wú)HPV 感染的比例在病理分級(jí)方面存在差異 (P＜0.05)，在年齡、脈管見(jiàn)癌栓、肌層浸潤(rùn)、臨床分期、病理類型和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移上無(wú)差異（見(jiàn)表2）。

表1 141 例宮頸癌患者HPV 感染狀態(tài)與臨床病理特征關(guān)系

3 討論

子宮頸癌一直是危害女性生命三大癌癥之一，對(duì)女性健康產(chǎn)生嚴(yán)重威脅。 全球每年約 50 萬(wàn)新發(fā)子宮頸癌患者， 給包括我國(guó)在內(nèi)的發(fā)展中國(guó)家子宮頸癌患者家庭及社會(huì)造成較重負(fù)擔(dān)[1]。 發(fā)達(dá)國(guó)家（尤其是歐洲）因從1960 年代開(kāi)始就開(kāi)展宮頸癌篩查， 該病的發(fā)病率和死亡率以每年2%-4%遞減，呈明顯下降趨勢(shì)。2009 年國(guó)家衛(wèi)生部全面開(kāi)展了對(duì)農(nóng)村婦女免費(fèi)的兩癌 (子宮頸癌和乳腺癌)篩查項(xiàng)目，發(fā)現(xiàn)宮頸癌例數(shù)增多，以早期宮頸癌增加為主，篩查效果初步成效[2]，但子宮頸癌防治形勢(shì)仍不樂(lè)觀。 子宮頸癌的發(fā)生與 HPV 感染有密切相關(guān)性。 研究表明，有一半以上的有性生活史的女性曾感染過(guò)HPV， 但絕大部分的女性感染的病毒一段時(shí)間內(nèi)可被自身免疫清除， 僅有一小部分人群將會(huì)出現(xiàn)高危型HPV 持續(xù)感染[3]。 環(huán)境、遺傳學(xué)或免疫學(xué)等因素可能在宮頸癌的發(fā)生過(guò)程中也起著關(guān)鍵的作用[4]。 本研究旨在探討宮頸癌高發(fā)區(qū)江西地區(qū)宮頸癌中不同HPV 感染的型別與宮頸癌病理特性之間的關(guān)系，為宮頸癌防治提供科學(xué)依據(jù)。

表2 141 例宮頸癌患者HPV 不同型別感染與臨床病理特征關(guān)系

在宮頸病變的進(jìn)展中，HPV 分型比HPV 負(fù)荷更為重要，相關(guān)性更為密切。 有學(xué)者[5]對(duì)丹麥哥本哈根11088 名登記在冊(cè)的婦女進(jìn)行了為期數(shù)年的跟蹤隨訪研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，連續(xù)兩次HPV 檢測(cè)（相隔2 年）陰性的危險(xiǎn)系數(shù)均為1.0，第一次、第二次均為陽(yáng)性， 感染型別至少有一種是相同的， 其致HSIL 的危險(xiǎn)系數(shù)為813.0。 本研究針對(duì)IB-IIA 宮頸癌行根治性宮頸癌手術(shù)141 例資料分析宮頸癌中單一HPV 感染為主。宮頸癌組織中總HPV 感染率為 89.4%（126/141）， 單一感染率為 77.3%（109/141），多重感染率為 12.1%（17/141），主要感染型別依次為 HPV l6、18、52 和 58。 可 見(jiàn)宮頸 癌與HPV 感染是密切相關(guān)的，HPV l6、18 仍為主導(dǎo)地位，HPV 型別不同致癌可能性不同。

但對(duì)宮頸癌患者HPV 感染的分布情況及多重感染與臨床病理特征的關(guān)系仍不完全明確[6,7]。我們研究宮頸癌IB-IIA 期早期宮頸癌，發(fā)現(xiàn)HPV 多重感染與單一感染、 無(wú)HPV 感染的比例在病理分級(jí)方面存在差異(P＜0.05)；在年齡、脈管見(jiàn)癌栓、肌層浸潤(rùn)、 臨床分期、 病理類型和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移上無(wú)差異；16、18 型感染與其他型別感染、無(wú) HPV 感染的比例在病理分級(jí)方面也存在差異(P＜0.05)，在年齡、脈管見(jiàn)癌栓、肌層浸潤(rùn)、臨床分期、病理類型和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移上無(wú)差異。 其原因可能是HPV 感染是宮頸癌發(fā)生的重要原因， 目前已有研究證實(shí)當(dāng)人體感染高危型HPV 后，HPV 可以將自身的DNA 整介到機(jī)體DNA 中，通過(guò)無(wú)限復(fù)制導(dǎo)致細(xì)胞癌變[8]。而HPV 多重感染可能意味著患者HPV 感染時(shí)間更長(zhǎng)，細(xì)胞癌變時(shí)間史長(zhǎng)有關(guān)。 有學(xué)者[9]報(bào)道年齡在50 歲以上、分期為III-IV 期、鱗癌、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者HPV 多重感染率更高。 與我們的研究結(jié)果有所不同，推測(cè)我們研究的是早期宮頸癌，可能宮頸癌至中晚期后體內(nèi)原有的免疫力低下導(dǎo)致潛伏期病毒復(fù)活有關(guān)。

綜上所述， 我們認(rèn)為 HPV 多重感染及HPV16、18 型感染與宮頸癌患者病理分級(jí)有關(guān)，與年齡、脈管見(jiàn)癌栓、肌層浸潤(rùn)、臨床分期、病理類型和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移上無(wú)差異,推測(cè)可能是獨(dú)立的致癌因子。后續(xù)將擴(kuò)大樣本數(shù)，前瞻性研究來(lái)證實(shí)。另外，繼續(xù)跟蹤研究， 探討HPV 型別與治療療效是否有關(guān)； 同時(shí)從分子水平進(jìn)一步探討HPV 病毒感染后如何導(dǎo)致細(xì)胞癌變。當(dāng)HPV16、18 型感染或合并多重HPV 感染時(shí)需提高警惕。