羅新新 ，劉玲 ，吳文明 ，劉靜 ，胡建新

（1.江西省人民醫(yī)院藥學(xué)部，南昌 330006；2.南昌大學(xué)附屬人民醫(yī)院藥學(xué)部，南昌 330006；3.江西省腫瘤醫(yī)院藥學(xué)部，南昌330096）

2 型糖尿病 （Type 2 Diabetes Mellitus, T2DM）是一種慢性代謝性疾病,主要是與肥胖和周圍組織中脂質(zhì)聚集有關(guān),胰島素β 細(xì)胞中的脂質(zhì)堆積和脂毒性會(huì)導(dǎo)致胰島β 細(xì)胞功能障礙引起血糖水平升高，糖耐量異常，臨床癥狀表現(xiàn)為持續(xù)性高血糖[1]。據(jù)國際糖尿病聯(lián)盟 （International Diabetes Federation, IDF)統(tǒng)計(jì)，中國糖尿病患者位居第一，約為1.146 億人, 近5 年江西成人糖尿病患病率高達(dá)9.5%,呈上升趨勢,糖尿病帶來的社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)是巨大的[2]。 目前T2DM 藥物的的治療主要采用方法為：胰島素皮下注射，口服降糖藥物（如：雙胍類、磺酰脲類、α 糖苷酶抑制劑等）等方式，但隨著病情的發(fā)展， 單靶點(diǎn)研發(fā)的藥物難以治療T2DM 及阻止并發(fā)癥的發(fā)生。 中藥治療T2DM 通過單靶點(diǎn)疊加作用、多成分多靶點(diǎn)協(xié)同作用、毒性分散效應(yīng)從而達(dá)到較好的療效及更低的毒性[3]，中醫(yī)藥治療是從一個(gè)整體實(shí)現(xiàn)多維調(diào)控的復(fù)雜理論體系， 與網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)基于成分-靶點(diǎn)-疾病互作網(wǎng)絡(luò)分析藥物的作用機(jī)制如出一轍， 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與中醫(yī)藥治療及辨證論治的觀點(diǎn)相符合[4]。

葛根為豆科植物野葛Pueraria lobata (Willd.)Ohwi 干燥根，具有解肌退熱，生津止渴，升陽止瀉功效。 主要化學(xué)成分有異黃酮類、三萜類、黃酮類、香豆素類等,具有降糖降脂、抗炎抗氧化、保護(hù)肝臟等藥理作用[5]。 丹參為唇形科草本植物丹參Radix Salviae 干燥根和根莖，具有活血化瘀，涼血清心，除煩安神的功效。 主要化學(xué)成分包括丹參酮類、丹參酸類、揮發(fā)油等，具有抗氧化，抗炎、抗血栓等藥理作用[6]。 陳澈[7]從 369 篇中醫(yī)藥治療 T2DM 文獻(xiàn)中分析444 個(gè)中藥方劑， 對其涉及232 味中藥進(jìn)行頻次分析，葛根、丹參分別占據(jù)了使用頻次表的第四及第五位，葛根-丹參藥對是中醫(yī)治療活血化瘀類糖尿病常用藥對。 本研究基于藥物多成分多靶點(diǎn)研究思路，通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測葛根-丹參藥對治療T2DM 的作用機(jī)制，分析篩選有效成分，活性靶點(diǎn)及疾病治療靶點(diǎn)和信號通路，為葛根-丹參藥對治療T2DM 實(shí)驗(yàn)研究及臨床運(yùn)用提供科學(xué)依據(jù)參考。

1 資料與方法

1.1 葛根-丹參藥對活性成分及潛在靶點(diǎn)的篩選借助中藥系統(tǒng)藥理學(xué)分析平臺 （TCMSP, http://tcmspw.com/tcmsp.php）獲取葛根、丹參的化學(xué)成分,根據(jù)生物利用度（OB）和類藥性（DL）篩選出符合條件的活性成分及相關(guān)靶點(diǎn)。

1.2 T2DM 相關(guān)靶點(diǎn)預(yù)測 通過 GeneCards（http://www.genecards.org/）數(shù)據(jù) 庫 ，以 “Type 2 Diabetes mellitus”為檢索詞，得到與T2DM 相關(guān)靶點(diǎn)，以相關(guān)性數(shù)值（Relevance score≥30）作為篩選條件，篩選結(jié)果作為T2DM 候選靶點(diǎn)基因。

1.3 中藥化學(xué)成分-作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 將篩選出來葛根候、丹參候選化合物和預(yù)測成分靶點(diǎn)基因?qū)隒ytoscape3.7.1[8]軟件構(gòu)建化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)，根據(jù)網(wǎng)絡(luò)中的度值（Degree）分析葛根-丹參主要有效成分。

1.4 蛋白質(zhì)相互網(wǎng)絡(luò)（PPI）的構(gòu)建 藥物對疾病治療的效應(yīng)最終表現(xiàn)在蛋白相互作用上。運(yùn)用韋恩圖(Venn diagram)得到活性成分靶點(diǎn)與T2DM 靶點(diǎn)的交集基因，導(dǎo)入STRING11.0（http://www.string-db.org/），獲取蛋白相互作用關(guān)系。Cytoscape3.7.1 繪制相互作用網(wǎng)絡(luò)，degree 值分析關(guān)鍵靶點(diǎn)，構(gòu)建葛根-丹參治療T2DM 作用靶點(diǎn)交互作用網(wǎng)絡(luò)。

1.5 葛根-丹參藥對治療T2DM 活性成分干預(yù)關(guān)鍵靶點(diǎn)分子對接預(yù)測 根據(jù)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)果分析，采用分子對接軟件預(yù)測葛根-丹參藥對主要活性成分干預(yù)關(guān)鍵靶點(diǎn)。 使用ChemOffice 軟件構(gòu)建化合物 3D 結(jié)構(gòu)， 并保存為.mol2 格式。 從 PDB（https://www.rcsb.org/） 數(shù)據(jù)庫下載靶點(diǎn)的蛋白結(jié)構(gòu)，用PyMOL 對原PDB 蛋白分子進(jìn)行蛋白與配體拆分，去氫，加水等操作，利用AutoDuck 軟件將上述化合物和蛋白格式轉(zhuǎn)換為PDBQT 格式。運(yùn)用Autodock Vina 軟件進(jìn)行化合物和核心靶點(diǎn)的分子對接，用PyMOL 對能量最低結(jié)合模式做圖。

1.6 葛根-丹參藥對治療T2DM 生物功能與通路富集分析 將葛根-丹參藥對治療T2DM 作用靶點(diǎn)導(dǎo)入ClueGO 插件，進(jìn)行GO 富集分析和通路富集分析（P＜0.05），對潛在靶點(diǎn)進(jìn)行生物過程（biological process），細(xì)胞組成(cellular component)，分子功能(molecular function)分析，KEGG 對潛在靶點(diǎn)進(jìn)行通路富集分析。

2 結(jié)果

2.1 活性化合物的篩選 通過TCMSP 查詢，葛根、丹參化學(xué)成分分別為 18 個(gè)、202 個(gè)， 經(jīng) OB≥30，DL≥0.18[9]篩選后，葛根、丹參化學(xué)成分分別為7個(gè)、61 個(gè)，葛根中的異黃酮類成分在葛根中的含量較高，雖然其OB、DL 值不符，考慮其藥理作用，結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道及臨床研究，仍然考慮將其列入后續(xù)研究。

2.2 化合物-靶點(diǎn)相互作用網(wǎng)絡(luò) 網(wǎng)絡(luò)圖直觀反映化合物和靶點(diǎn)間相互作用，節(jié)點(diǎn)代表化合物，邊代表了化合物和靶點(diǎn)之間關(guān)系。 黃色、粉色、藍(lán)色節(jié)點(diǎn)分別代表藥物靶點(diǎn)、葛根化合物、丹參化合物?；衔?靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)包含了215 個(gè)節(jié)點(diǎn)和954 條邊，葛根-丹參藥對中每個(gè)化合物平均作用于15.9 個(gè)靶標(biāo)，每個(gè)靶標(biāo)平均與6.15 個(gè)化合物連接。因此可以體現(xiàn)出中藥單成分多靶點(diǎn)、 多成分多靶點(diǎn)及多成分相同靶點(diǎn)之間的協(xié)同疊加作用。 通過Cytoscape3.7.1 軟件繪制出化合物-靶點(diǎn)相互作用網(wǎng)絡(luò)圖，見圖1。

圖1 葛根- 丹參藥對化合物- 靶點(diǎn)相互網(wǎng)絡(luò)作用圖

度值排名前四的化合物分別為MOL000006-木犀草素(度值 54)、MOL012297-葛根素(度值 53)、MOL07154-丹參酮ⅡA (度值 40)、MOL000392-芒柄花黃素（度值32）。

2.3 葛根-丹參藥對與T2DM 的交集基因 通過數(shù)據(jù)庫分析，T2DM、葛根、丹參作用靶點(diǎn)分別為475個(gè)、94 個(gè)、117 個(gè)。 通過在線韋恩圖分析得出，葛根-丹參藥對活性成分作用靶點(diǎn)與T2DM 共有57個(gè)交集基因，葛根、丹參與T2DM 共有基因21 個(gè)(圖2)， 即為葛根-丹參治療 T2DM 的主要潛在靶點(diǎn)。

2.4 蛋白相互作用PPI 網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 本研究基于STRING 數(shù)據(jù)庫分析葛根-丹參藥對治療T2DM 作用靶點(diǎn)之間的交互作用,通過在線韋恩圖得到化合物-疾病共有基因57 個(gè)導(dǎo)入STRING，交互作用可信度設(shè)置為最高值（0.900）構(gòu)建靶點(diǎn)相互作用網(wǎng)絡(luò)（圖3），并進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)分析。 該網(wǎng)絡(luò)包括48個(gè)節(jié)點(diǎn) （9 個(gè)靶點(diǎn)未發(fā)生蛋白互作關(guān)系），160 條邊。 在葛根-丹參藥對治療T2DM 蛋白質(zhì)交互作用網(wǎng)絡(luò)中，度值前五的節(jié)點(diǎn)分別為：STAT3(24)、AKT1(21)、JUN(19)、MAPK1(15)，這四個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)可能在葛根-丹參藥對治療T2DM 過程中發(fā)揮重要作用。

圖2 葛根- 丹參作用靶點(diǎn)與T2DM 靶點(diǎn)交集基因韋恩圖

圖3 葛根、丹參與T2DM 蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)圖

2.5 葛根-丹參藥對治療T2DM 活性成分干預(yù)關(guān)鍵靶點(diǎn)的分子對接預(yù)測 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測關(guān)鍵靶點(diǎn)為 STAT3(6UNQ)、AKT1(4EKL)、JUN(1JNM)、MAPK 1(3SA0)，使用AutoDock Vina[10]軟件對關(guān)鍵靶點(diǎn)與活性化合物葛根素、芒柄花黃素、木犀草素和丹參酮ⅡA 進(jìn)行對接。一般認(rèn)為配體與受體分子構(gòu)象越穩(wěn)定，能量越低，發(fā)生作用的可能性越大，以結(jié)合能≤-5kJ/mol 為篩選標(biāo)準(zhǔn)。 分子對接結(jié)果顯示STAT3 與葛根素 （-22.19）、AKT1 與丹參酮ⅡA 和木犀草素 （-34.75）、JUN 與丹參酮ⅡA（-26.80）、MAPK1 與丹參酮ⅡA（-35.17）具有最好結(jié)合力，將關(guān)鍵靶點(diǎn)與結(jié)合能最低的活性化合物進(jìn)行分子對接，PyMoL 作圖，結(jié)果見圖4。

2.6 靶點(diǎn)通路分析 通過對關(guān)鍵靶標(biāo)進(jìn)行基因功能分析，得到 GO 分析（P＜0.05）生物過程 1483 個(gè)、分子功能 75 個(gè)、細(xì)胞組成 39 個(gè)（圖5）。 細(xì)胞組成主要涉及絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶復(fù)合物、RNA 聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄因子復(fù)合物、血小板α 顆粒等；分子功能主要為蛋白酶/磷酸酶結(jié)合、絲氨酸/蘇氨酸激酶調(diào)節(jié)活性、 生長因子/類固醇激素受體結(jié)合等功能上；生物過程主要涉及血管的生成、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞增殖、蛋白質(zhì)代謝、神經(jīng)保護(hù)作用。 血管生成方面： 正向調(diào)節(jié)血管平滑肌細(xì)胞增殖； 炎癥反應(yīng)方面：氧化應(yīng)激反應(yīng)、細(xì)胞對活性氧反應(yīng)；細(xì)胞增殖方面：上皮細(xì)胞增殖、肌肉細(xì)胞增殖、正向調(diào)節(jié)血管平滑肌細(xì)胞增殖；蛋白質(zhì)代謝方面：對營養(yǎng)物質(zhì)水平的反應(yīng)； 神經(jīng)保護(hù)作用： 對脂多糖刺激時(shí)反應(yīng)。 基于這五個(gè)主要的方面分析，葛根-丹參藥對主要是通過多通路多靶點(diǎn)協(xié)同作用治療T2DM。

KEGG 結(jié)果分析， 共富集136 條信號通路，主要與PI3K-AKT 信號通路、 糖尿病并發(fā)癥的AGE/RAGE 信號通路、TNF-α 信號通路、IL-17 信號通路、HIF-1 信號通路、 流體剪切應(yīng)力與動(dòng)脈粥樣硬化等有著密切聯(lián)系。

3 討論

2 型糖尿病屬于中醫(yī)“消渴病”范疇，消渴病機(jī)為陰虛為本，燥熱為標(biāo)，在糖尿病氣血津液盈虧過程中，血行不暢致瘀，淤血阻滯氣機(jī)，津液不布消渴加重，故糖尿病在診治過程中應(yīng)注重活血化瘀，辨證論治。 葛根-丹參藥對臨床上用于表現(xiàn)有瘀血指征（舌質(zhì)暗，或有瘀點(diǎn)，舌下靜脈瘀滯等）患者最宜，也適用于2 型糖尿病伴有心血管病變、視網(wǎng)膜病變、腎病等患者。

圖5 GO 和KEGG 富集分析圖

化合物-靶點(diǎn)研究結(jié)果顯示，60 個(gè)化合物對應(yīng)155 個(gè)靶點(diǎn),顯示藥物通過多成分多靶點(diǎn)治療疾病,最重要有效成分為葛根素、 芒柄花黃素、 木犀草素、丹參酮ⅡA。 研究表明，葛根素通過激活PI3K/AKT 信號通路，抑制胰島β 細(xì)胞凋亡，上調(diào)PPARγ mRNA 表達(dá)，促進(jìn) GLUT4 轉(zhuǎn)位至細(xì)胞膜[11,12]，增強(qiáng)葡萄糖向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)， 調(diào)節(jié)細(xì)胞的糖脂代謝減輕IR。 此外，葛根素通過抑制 NF-κB、p38MAPK 信號通路，降低 TNF-α、IL-6、IL-1 等炎癥因子的表達(dá)，改善IR[13]，減輕炎癥反應(yīng)有關(guān)。 芒柄花黃素可以降低血液中的甘油三酯（TG）含量，上調(diào)清道夫受體BI(SR-B，功能性的HDL 受體）蛋白含量,減輕外周組織膽固醇的蓄積, 進(jìn)而調(diào)節(jié)體內(nèi)血脂的代謝[14]。Na Xu 等[15]研究表明低劑量膳食補(bǔ)充劑木犀草素能降低小鼠附睪脂肪組織中肥大細(xì)胞的浸潤和炎性因子的水平，從而改善小鼠飲食性肥胖和IR；張雨點(diǎn)等[16]發(fā)現(xiàn)木犀草素是一種具有PPARγ 激動(dòng)劑活性的新AMPK 激活劑，通過直接結(jié)合PPARγ，抑制 PPARγ Ser-273 位點(diǎn)磷酸化,升高 pAMPK（Thr-172）水平，抑制前體脂肪細(xì)胞分化和促進(jìn)脂聯(lián)素高聚體化，有望成為治療T2DM 的潛在藥物。 臨床數(shù)據(jù)顯示丹參酮ⅡA 可以降低糖尿病患者的纖維蛋白原、血漿黏度、糾正血液流變異常,調(diào)節(jié)血脂[17]，起到保護(hù)糖尿病患者作用。 丹參酮ⅡA 磺酸鈉能逆轉(zhuǎn)SIRT1 蛋白低表白，抑制腎臟乙?；疐ox01蛋白表達(dá),從而有效的改善糖尿病大鼠糖脂代謝紊亂，延緩腎小球硬化，減少糖尿病腎病損害[18]。研究表明，葛根素聯(lián)合丹參酮ⅡA 可以降低血糖和血脂水平，降低糖尿病血管病變大鼠血清INS 及AGES含量,下調(diào)主動(dòng)脈組織VCAM-1 蛋白表達(dá),起到保護(hù)血管內(nèi)皮作用[19]。葛根素和芒柄花黃素屬于葛根成分,木犀草素和丹參酮ⅡA 屬于丹參成分,這為葛根-丹參藥對治療T2DM 提供了理論和實(shí)踐依據(jù)。

通過葛根-丹參藥對治療T2DM 的物質(zhì)基礎(chǔ)，構(gòu)建其治療T2DM 的蛋白交互作用網(wǎng)絡(luò)。 本研究篩選出 STAT3、AKT1、JUN、MAPK1 在 T2DM 中發(fā)揮重要作用。 STAT3 是信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活子3，STAT3 信號通路在外周和肝臟胰島素敏感性中起著重要的作用，研究表明[20]嚴(yán)重肥胖或T2DM 患者骨骼肌中STAT3 蛋白高度表達(dá)，降低STAT3 蛋白表達(dá)可以防止骨骼肌中脂質(zhì)誘導(dǎo)胰島素抵抗的發(fā)展。 AKT1 是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，STAT3作為激活A(yù)KT 的上游， 能夠?qū)KT 進(jìn)行正向調(diào)控，促進(jìn)AKT 的磷酸化及激活，調(diào)控葡萄糖和脂質(zhì)代謝，激活A(yù)KT 途徑抑制脂解和肝糖原合成，改善IR[21]。 JUN 是絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）中的重要成員之一，JUN 是連接炎癥和胰島素抵抗的信號分子。 通過RNA 干擾技術(shù)敲除小鼠JUN 基因，可降低小鼠的血糖，并增強(qiáng)肝胰島素信號傳導(dǎo)；通過抑制JUN 信號通路,可以拮抗高糖誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡[22]。MAPK1 也稱為細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK),主要參與細(xì)胞增殖分化、氧化應(yīng)激等生理功能。 研究表明[23]抑制MAPK1/3 蛋白表達(dá)可以改善糖尿病大鼠心肌纖維化， 減弱高糖狀態(tài)下心肌組織的損傷。

通過對葛根-丹參藥對治療T2DM 生物功能與通路富集分析可知,與糖尿病相關(guān)的信號通路主要要：PI3K-AKT 信號通路、糖尿病并發(fā)癥的AGE/RAGE 信號通路、TNF-α 信號通路、IL-17 信號通路等。 PI3K-AKT 信號通路已成為T2DM 重要靶點(diǎn)，PI3K 是一類催化肌醇與磷酯酰肌醇的脂質(zhì)激酶，激活PI3KR1，生成細(xì)胞內(nèi)重要信使，與AKT 結(jié)合,促進(jìn)級聯(lián)反應(yīng)。PI3K/AKT 信號通路介導(dǎo)GLUT4膜異位，激活GLUT4，調(diào)節(jié)血糖水平，PI3K/AKT 表達(dá)增加，激活eNOS 和PPAR，抑制NF-κB 的表達(dá)，調(diào)節(jié)血脂，減輕炎癥反應(yīng),抑制高糖對心肌細(xì)胞的損傷,保護(hù)血管[24]。 研究表明，IR 會(huì)使得 T2DM 患者產(chǎn)生認(rèn)知障礙和代謝異常,葛根素可以激活PI3KAKT 信號通路，降低ROS 過度生成，恢復(fù)線粒體膜電位，增強(qiáng)細(xì)胞活性，減輕細(xì)胞凋亡，對膠質(zhì)細(xì)胞起到神經(jīng)保護(hù)作用[25]。AGE/RAGE 通路與T2DM 發(fā)生發(fā)展過程中有著一定的聯(lián)系， 晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)是糖尿病血管病變及功能損害的主要觸發(fā)因素，AGEs 與其受體RAGE 結(jié)合后可通過啟動(dòng)一系列信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，導(dǎo)致細(xì)胞因子的釋放，分泌大量的炎癥因子，加速血管內(nèi)皮損傷，參與T2DM 并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展中來[26]。 細(xì)胞內(nèi)ROS 水平上升，使AGEs 上調(diào)RAGE mRNA 表達(dá)，降低內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶mRNA 水平和NO 的生物利用度， 促進(jìn)炎癥因子釋放， 進(jìn)一步加速了糖尿病視網(wǎng)膜病變中的血管損傷[27]。在高糖和血糖波動(dòng)幅度增加的情況下，T2DM 患者血清 AGEs、RAGE 表達(dá)顯著性上調(diào)，使得血管內(nèi)皮損傷加劇[28]。 TNF-α 是與肥胖相關(guān)的IR 和T2DM 發(fā)病機(jī)制的一個(gè)致病因子，主要是通過參與ROS 產(chǎn)生和各種轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)途徑誘導(dǎo)脂肪和周圍組織炎癥反應(yīng)， 在脂肪細(xì)胞中，TNF-α mRNA 水平與肥胖或高胰島素血癥程度呈正相關(guān)，介導(dǎo)IR, 加重患者病情, 但隨著體重降低脂肪中TNF-α 也隨之降低[29]。T2DM 被認(rèn)為是一種自身免疫性炎癥疾病，IL-17 即可以介導(dǎo)炎癥也可以調(diào)節(jié)炎癥，IL-17 誘導(dǎo)促炎細(xì)胞因子（TNF-α）產(chǎn)生來介導(dǎo)免疫反應(yīng)，參與動(dòng)脈粥樣硬化、脂肪細(xì)胞的分化和IR 發(fā)病機(jī)制, 阻斷IL-17 表達(dá)可增強(qiáng)脂肪細(xì)胞分化標(biāo)志物和脂聯(lián)素的表達(dá)[30]。 IL-17 家族包括I L-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E 和 IL-17F六種結(jié)構(gòu)上相關(guān)的異構(gòu)體，細(xì)胞因子IL-17A 最初被認(rèn)為是慢性炎癥性疾病的介質(zhì)， 但最近研究表明[31]IL-17A 調(diào)節(jié)腎組織氧化應(yīng)激和AMP 蛋白激酶的活化，可以有利地調(diào)節(jié)炎癥，在晚期糖尿病腎病患者血漿和尿液中IL-17A 水平降低，表明小劑量IL-17A 是治療和逆轉(zhuǎn)糖尿病腎病的一種有前途的方法。

本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法初步探討葛根-丹參藥對治療T2DM 機(jī)制。 從結(jié)果中可以看出葛根-丹參的主要有效成分可以通過STAT3、AKT1、JUN、MAPK1、等多個(gè)靶點(diǎn)參與，糖尿病并發(fā)癥中的AGE-RAGE、PI3K/AKT、TNF-α、IL-17 等相關(guān)信號通路的協(xié)同作用發(fā)揮療效，初步闡明了葛根-丹參藥對主要活性成分、作用靶點(diǎn)及信號通路在T2DM治療中的研究價(jià)值， 為基礎(chǔ)研究和實(shí)驗(yàn)研究提供了理論依據(jù)和參考。 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)篩選出的活性成分可能與T2DM 患者血液中實(shí)際吸收成分不一致，作用靶點(diǎn)的激活和抑制作用難以明確，研究靶點(diǎn)和信號通路會(huì)出現(xiàn)一定的偏差， 存在一定的局限性，因此為了提高結(jié)果的可靠性，還需進(jìn)一步的開展后期實(shí)驗(yàn)研究。