張召興，劉少杰，賈青輝，張艷英，史秋梅*，高桂生

（1.河北旅游職業(yè)學(xué)院畜牧獸醫(yī)系，河北承德 067000；2.河北科技師范學(xué)院/河北省預(yù)防獸醫(yī)學(xué)重點實驗室，河北秦皇島 066004）

烏蘇里貉為食肉目犬科貉屬的一種珍貴毛皮動物，主要分布于我國河北、山東、吉林、黑龍江等地區(qū)，我國每年烏蘇里貉養(yǎng)殖量達4 000 萬只，其中河北地區(qū)烏蘇里貉養(yǎng)殖數(shù)量占全國的一半以上，是我國重要的經(jīng)濟動物之一[1-2]。在烏蘇里貉的養(yǎng)殖過程中，一些抗生素及含有抗生素添加劑的使用導(dǎo)致烏蘇里貉細菌性疾病耐藥性增強、腸道菌群失調(diào)及免疫低下等[3]。相關(guān)研究表明益生菌可以具有調(diào)節(jié)腸道菌群平衡、提高免疫力、不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點，被廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖中[4]。

益生菌是一種活性微生物、培養(yǎng)物以及其他產(chǎn)物的統(tǒng)稱，益生菌同通過多種途徑調(diào)節(jié)胃腸道微生物菌群平衡、促進營養(yǎng)物質(zhì)消化與吸收及動物生長，具有提高生長性能、增強機體的免疫力等多種優(yōu)點，被廣泛應(yīng)用于畜禽的健康養(yǎng)殖中，是抗生素最佳替代品之一[5]。益生菌常用的菌種主要包括酵母菌類、乳酸菌類、腸球菌類、芽孢桿菌類等，其中酵母菌是一種兼性厭氧微生物，富含多種蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、微量元素等多種營養(yǎng)物質(zhì)，還富含多種消化酶類，可作為蛋白質(zhì)補充料[6-7]。國內(nèi)關(guān)于復(fù)合酵母菌制劑在烏蘇里貉養(yǎng)殖過程中應(yīng)用的報道較少。本試驗旨在探討復(fù)合酵母菌制劑對貉生長性能、糞便微生物菌群及血液生化指標的影響，為復(fù)合酵母菌制劑在臨床中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 復(fù)合酵母菌為固體粉末，其酵母菌、乳酸菌、雙歧桿菌菌種分離健康動物腸道，經(jīng)過篩選應(yīng)用比例為4:2:1，活菌數(shù)均為9.0×109CFU/g，由本試驗制備。

1.2 試驗設(shè)計及日糧 選擇體重相近、60 日齡斷奶仔貉40 只，仔貉由昌黎縣貉規(guī)?；B(yǎng)殖場提供，隨機分成4個組，每個組10 個重復(fù)，每個重復(fù)1 只。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗組分別在基礎(chǔ)日糧添加0.5%、1.0%、1.5%復(fù)合酵母菌制劑。籠子為70 cm×60 cm×50 cm，食物在飼槽中飼喂，單籠飼養(yǎng)。試驗貉的基礎(chǔ)日糧設(shè)計參照李漠的試驗[8]，飼糧組成及營養(yǎng)成分見表1。在試驗期間不添加任何益生菌制劑與抗生素制劑。試驗期60 d。

表1 飼糧組成及營養(yǎng)成分(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1.3 生產(chǎn)性能測定 在試驗開始與結(jié)束，提前斷料12 h，并對每個試驗組中每個重復(fù)組逐個稱重，記錄試驗開始與結(jié)束時的體重，每天定時給料，回稱剩料，測定平均日增重、平均日采食量、耗料增重比。

1.4 糞便微生物菌群的測定 在試驗結(jié)束時，斷料12 h，用糞便采集管，隨機采集每個組的新鮮糞便樣品5 份，置于-20℃冰箱保存，分別接種于MRS 培養(yǎng)基、大腸桿菌桿菌顯色培養(yǎng)基、LB 培養(yǎng)基上，參考何佳等[9]的方法檢測糞便中乳酸桿菌、雙歧桿菌和大腸桿菌的數(shù)量，每克糞便中所含乳酸桿菌、雙歧桿菌和大腸桿菌總數(shù)用對數(shù)（log10CFU/g）表示。

1.5 血清生化指標的測定 在試驗結(jié)束后斷料12 h，每個試驗組隨機抽取5 只試驗貉，用采血針后肢外側(cè)跗關(guān)節(jié)上方隱靜脈采血液3 mL，3 000 r/min 離心 5 min，分離血清。按照試劑盒（南京建成生物工程研究所）說明書測定血清中總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）、血尿素氮（BUN）。

1.6 統(tǒng)計分析 采用SPSS 19.0 軟件進行單因素方差分析（One-Way ANOVA），采用Duncan's 法進行均值比較，P<0.05 表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 復(fù)合酵母菌制劑對貉生長性能的影響 由表2 可知，1.0%、1.5% 組的平均日增重顯著高于對照組，耗料增重比顯著低于對照組。0.5%、1.0%、1.5% 組間平均日增重、耗料增重比差異均不顯著。

表2 復(fù)合酵母菌制劑對貉生長性能的影響

2.2 復(fù)合酵母菌制劑對貉糞便微生物菌群的影響 由表3 可知，1.0%、1.5%組糞便中的雙歧桿菌和乳酸桿菌含量顯著高于對照組，與0.5%組無顯著差異。1.0%、1.5%組糞便中的大腸桿菌含量顯著低于對照組，與0.5%組無顯著差異。

表3 復(fù)合酵母菌制劑對貉糞便微生物菌群的影響 log10CFU/g

2.3 復(fù)合酵母菌制劑對貉血液生化指標的檢測結(jié)果 由表4 可知，1.0%、1.5%組血清中TP 含量顯著高于對照組，與0.5%組差異不顯著。10.0%、1.5%組血清中GPT 和BUN 含量顯著低于對照組，與0.5% 組無顯著差異。4個處理組的ALB、GOT 均無顯著差異。

表4 復(fù)合酵母菌制劑對貉血液生化指標的影響

3 討 論

3.1 復(fù)合酵母菌制劑對貉生長性能的的影響 酵母菌等益生菌制劑具有提高動物生長性能、生產(chǎn)性能及免疫機能[4-7]。如酵母菌等復(fù)合培養(yǎng)物可以提高肉雞生長性能[10]、復(fù)合益生菌制劑可以顯著提高仔豬生長性能[11]。本試驗結(jié)果表明，在斷奶仔貉基礎(chǔ)日量中添加1.0%、1.5%復(fù)合酵母菌制劑可以顯著提高斷奶仔貉的平均日增重，顯著降低耗料增重比，試驗組平均采食量均高于對照組，說明1.0%、1.5%復(fù)合酵母菌制劑均可以提高斷奶仔貉的生長性能，以1.0%添加為適宜。酵母菌等益生菌制劑中富含多種活性物質(zhì)，腸道內(nèi)多種消化酶的分泌，可以促進飼料中營養(yǎng)物質(zhì)在體內(nèi)的消化與吸收，提高飼料的利用率，降低其耗料增重比，提高其日增重[9]。

3.2 復(fù)合酵母菌制劑對貉糞便微生物菌群的影響 大腸桿菌是存在動物腸道中的正常菌群，當(dāng)外界條件改變時，該菌可以轉(zhuǎn)化為致病菌，引起動物的腸炎、腹瀉及敗血癥等，嚴重者可導(dǎo)致死亡[12]。相關(guān)研究表明外來酵母菌、芽孢桿菌、乳酸菌等多種厭氧菌在腸道中增殖，通過占位作用，與大腸桿菌、沙門菌等病原菌競爭宿主結(jié)合位點，促進腸道蠕動及腸液沖刷，有利于排除病原菌，調(diào)整菌群平衡[10-11]。本試驗結(jié)果表明，在斷奶仔貉基礎(chǔ)日量中添加1.0%、1.5%復(fù)合酵母菌制劑能夠顯著降低斷奶仔貉糞便中大腸桿菌含量，提高雙歧桿菌和乳酸桿菌含量?？赡苡捎趶?fù)合酵母菌制劑促進了腸道有益菌生長繁殖，降低有害菌在腸道內(nèi)定植，從而讓益生菌在腸道起到一個“占位”效果，因而抑制了有害菌生長與繁殖。何佳等[9]報道在斷奶仔豬基礎(chǔ)日糧中添加益生菌可顯著降低糞便大腸桿菌含量，提高雙歧桿菌和乳酸桿菌含量。酵母菌制劑調(diào)節(jié)腸道微生物菌群平衡機制尚未明確，有待進一步研究。

3.3 復(fù)合酵母菌制劑對貉血液生化指標的影響 血液生化指標的動態(tài)變化可以反映機體物質(zhì)代謝情況及健康狀態(tài)。血清中的TP 和ALB 含量變化可以反映機體蛋白的代謝水平和物肝臟蛋白質(zhì)合成能力的強弱重要指標之一，GPT 和GOT 主要參與肝臟的物質(zhì)代謝，當(dāng)肝臟受到損傷時GPT 和GOT 活性增強，是評價肝功能重要指標之一，血清中BUN 是飼料中蛋白質(zhì)最終的代謝產(chǎn)物，是評價腎功能重要的指標之一[13-14]。本試驗結(jié)果表明，在斷奶仔貉基礎(chǔ)日糧中添加1.0%、1.5%復(fù)合酵母菌制劑可以顯著提高血清中TP 含量，降低血清中GPT和BUN 含量；0.5%、1.0%、1.5% 組血清中ALB 含量高于對照組，0.5%、1.0%、1.5%組血清中GOT 含量均低于對于組，但均差異性不顯著，與王杰等[11]、王傳龍等[15]報道一致。可能由于復(fù)合酵母菌制劑中富含多種活性物質(zhì)，可以促進體內(nèi)的物質(zhì)代謝，因而降低肝、腎損傷，提高肝、腎代謝功能。

4 結(jié) 論

本試驗條件下，添加1.0%、1.5%復(fù)合酵母菌制劑均可以提高貉生長性能，改善腸道菌群結(jié)構(gòu)，降低肝腎損傷，以1.0%添加較適宜。