趙蘭靜，潘 杰，吳 茵

華東療養(yǎng)院檢驗科，江蘇無錫 214065

2018年世界衛(wèi)生組織(WHO)報告顯示，宮頸癌的發(fā)病率和病死率均位居全球女性癌癥的第4位，嚴重威脅著女性的生命健康。宮頸癌是可以通過疫苗接種、早期篩查等措施有效預防的惡性腫瘤。目前疫苗已作為預防宮頸癌及癌前病變的首選，然而疫苗的接種效果與人乳頭瘤病毒(HPV)感染的流行程度及型別分布有著重要關(guān)系[1]。本文通過對上海地區(qū)健康體檢人群的宮頸脫落細胞進行HPV分型檢測，以期了解上海地區(qū)HPV型別分布情況和特征，為宮頸癌防治和疫苗的研發(fā)提供流行病學依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2017年8月至2019年10月來華東療養(yǎng)院體檢的上海地區(qū)女性的宮頸脫落細胞標本14 394份，受試者年齡21～87歲，中位年齡46歲。以來院體檢人群的年齡分布特點為分組依據(jù)，分成5組：≤35、>35～45、>45～55、>55～65、>65歲組。

1.2儀器與試劑 Micromax微量離心機(美國Thermo公司)，Bioer MB-102振蕩恒溫金屬浴(杭州博日公司)，ABI VERITI梯度PCR儀(美國Life公司)，超級恒溫循環(huán)槽(上海一恒科學儀器有限公司)，BYN-H16雜交儀(深圳亞能生物技術(shù)有限公司)。HPV基因分型(23型)檢測試劑盒(深圳亞能生物技術(shù)有限公司)。

1.3方法

1.3.1標本采集 婦產(chǎn)科醫(yī)生以窺陰器暴露宮頸，將宮頸刷置于宮頸口，單方向旋轉(zhuǎn)4～5周，將宮頸刷放入對應編號的專用細胞保存管中，將刷柄折斷，擰緊瓶蓋，及時送檢。4 ℃保存待用，至檢測時不超過2 d。

1.3.2HPV分型檢測 采用亞能PCR-反向斑點雜交技術(shù)(PCR-RDB)對宮頸脫落細胞進行23型HPV基因分型的檢測，包括17種高危型(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82)和6種低危型(HPV6、11、42、43、81、83)。所有操作過程嚴格按照HPV基因分型(23型)檢測試劑盒產(chǎn)品說明書進行。

1.4統(tǒng)計學處理 采用EXCEL2000建立數(shù)據(jù)庫并進行初步分析。采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。計數(shù)資料以頻數(shù)或百分率表示，各組陽性率的比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1各年齡段女性HPV陽性率情況 本研究中，HPV陽性共2 368份，陽性率為16.45%。各年齡組中HPV的陽性率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(χ2=143.41，P<0.05)。>55歲的圍經(jīng)期女性HPV的陽性率隨著年齡的增長而明顯升高，其中>65歲組陽性率最高(27.05%)。見表1。

表1 14 394例女性HPV陽性率與年齡分布的關(guān)系

2.2HPV多重感染的情況 2 368份HPV陽性標本中，單一感染為1 808份，感染率為76.35%；多重感染共560份，感染率為23.65%。在多重感染中以雙重感染(16.64%)為主，最多可合并6重感染。

2.3HPV型別分布 高危型HPV感染率排在前5位的分別是HPV52(3.68%)、HPV53型(2.01%)、HPV58型(1.90%)、HPV68型(1.45%)、HPV16型(1.39%)，其他高危型的感染率從高到低依次為HPV56、66、33、39、31、59、18、35、45、82、73型。低危型HPV感染率最高的是HPV81型(1.92%)，其他低危型HPV的感染率從高到低依次為HPV42、43、6、83、11型。感染率最低的型別是HPV73型。其中HPV43、66、39、18型以多重感染為主，其他型別(特別是HPV83型)以單一感染為主。見表2、3。

表2 14 394例上海體檢女性中高危型HPV型別分布情況

表3 14 394例上海體檢女性中低危型HPV型別分布情況

3 討 論

HPV是一種易感染人表皮和黏膜鱗狀上皮細胞的雙鏈DNA病毒，持續(xù)的HPV感染是宮頸癌發(fā)生的必要非充分條件[2]。然而，與生殖道感染相關(guān)的HPV分型有40余種，且在不同地區(qū)的人群中HPV感染存在明顯的地域性差異。

本研究結(jié)果顯示，上海地區(qū)健康體檢女性中HPV的陽性率為16.45%。這一結(jié)果和馮曉春等[3]報道的上海市普陀區(qū)HPV陽性率(15.7%)相近，但明顯高于深圳市龍崗區(qū)HPV的陽性率(6.92%)[4]，低于李江燕等[5]報道的上海地區(qū)HPV陽性率(28.6%)及通遼地區(qū)蒙古族女性HPV的陽性率(36.98%)[6]。張東紅等[7]研究發(fā)現(xiàn)，HPV16型是我國最常見的感染型別，其他常見的型別依次為HPV58、18、52、33型。周小會等[8]研究表明，HPV16、52、58、53、33型是上海地區(qū)的優(yōu)勢型別。而本研究中排在前5位的高危型別依次為HPV52、53、58、68和16型，最常見的低危型別是HPV81型。這一結(jié)果進一步說明了HPV型別分布具有顯著的人群特點和地域差異。另外，有研究認為隨著年齡的增長，會伴隨HPV16型和HPV52型作為優(yōu)勢型別的轉(zhuǎn)變[9-10]。

有關(guān)HPV感染與年齡的相關(guān)性，文獻報道的結(jié)果不盡相同。李晨等[11]發(fā)現(xiàn)≤25歲和50～59歲年齡組HPV陽性率較高，呈雙峰分布。CAO等[12]研究表明，50歲以上的女性HPV陽性率最高(34.54%)，呈單峰分布。本研究結(jié)果顯示，從>55～65歲年齡組開始，HPV的陽性率隨著年齡增長呈現(xiàn)上升趨勢，因此上海地區(qū)高齡女性是HPV感染的重點篩查對象。本研究結(jié)果與部分研究結(jié)果一致[13]。分析原因可能是：一方面是由于年輕女性自我保護意識增強，自身免疫力提高，而大齡女性由于卵巢功能下降，激素水平改變，清除既往感染和新發(fā)感染的能力減弱；另一方面可能與本研究中人群的選擇性偏倚有關(guān)。

本研究結(jié)果顯示，HPV多重感染率達23.65%，最多可合并6重感染。有關(guān)HPV多重感染是否增加致癌風險的說法尚存爭議。章濤等[14]研究發(fā)現(xiàn)，HPV多重感染率隨著宮頸病變程度加重呈增加趨勢,提示宮頸癌與HPV多重感染密切相關(guān)。劉宗花等[15]認為，高危型HPV多重感染可增加宮頸上皮內(nèi)病變的風險，但與宮頸癌的發(fā)生無明顯相關(guān)性。也有研究認為，隨著宮頸病變級別增加，HPV單一感染率與多重感染率差異并無統(tǒng)計學意義(P>0.05)[16]。因此對HPV多重感染與宮頸病變的關(guān)系及其發(fā)生機制，仍需結(jié)合病理學資料及其病因?qū)W機制進行深入研究。

現(xiàn)有的多價疫苗所針對的HPV型別與上海地區(qū)HPV感染的主要型別有所差異，需研制出適合上海地區(qū)的多價疫苗來更有效地預防宮頸病變的發(fā)生。另外，要繼續(xù)加強對高齡女性HPV感染的定期隨訪，探索適合我國不同經(jīng)濟水平地區(qū)的HPV相關(guān)疾病預防方法，從而最大限度地降低宮頸病變的發(fā)生與發(fā)展。