陳進軍 刁宏旺 姜俊海 李守林

（深圳市兒童醫(yī)院 廣東 深圳 518026）

膀胱的生理功能主要有兩個，即排尿、儲尿，具體表現(xiàn)為儲尿期逼尿肌在容納性、順應(yīng)性舒張作用良好的情況下將膀胱容量擴大，并對低壓狀態(tài)進行保持，對尿失禁的發(fā)生進行積極預(yù)防，并對上尿路功能進行保護；排尿期逼尿肌將整體協(xié)調(diào)性收縮速度、強度發(fā)揮出來，將膀胱中的尿液有效排空，對殘余尿的出現(xiàn)進行有效預(yù)防[1]。本研究探討了大鼠膀胱逼尿肌生物力學(xué)特性受到膀胱出口梗阻的影響。

1. 資料與方法

1.1 實驗動物

購買第三軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心提供的54 只雌性Wistar大鼠，月齡3 ～4 個月，體質(zhì)量180 ～200g。依據(jù)充盈期膀胱壓力分為梗阻2 周逼尿肌穩(wěn)定組（DS2 組，n=11）、梗阻2 周逼尿肌不穩(wěn)定組（DI2 組，n=8）、梗阻4 周逼尿肌穩(wěn)定組（DS4 組，n=15）、梗阻4 周逼尿肌不穩(wěn)定組（DI4 組，n=10）、對照組或假手術(shù)組（C 組，n=10）。

1.2 方法

1.2.1 梗阻模型制作

給予大鼠腹腔注射40mg/kg 1% 苯巴比妥進行麻醉，將切口開在下腹部正中，向尿道探入聚乙烯探子，直徑為1mm，稍微分離近端尿道，用2-0 絲線對尿道進行結(jié)扎，以能夠輕易拔出探子、對探子周圍組織進行牽拉能夠隨之移動確定松緊，將探子拔出后將切口關(guān)閉。對照組或假手術(shù)組不對尿道進行結(jié)扎，其余操作同上。

1.2.2 充盈期膀胱壓力測定

給予大鼠皮下注射1g/kg 烏拉坦進行麻醉，幫助大鼠取仰臥位，將其固定下來，經(jīng)尿道向膀胱插入硬膜外導(dǎo)管，將其和7號針頭連接起來，經(jīng)三通道將其和微量灌注泵、尿動力儀連接起來。以輕柔的動作對腹部進行按壓，將尿液排凈。以0.2ml/min 的速度給予大鼠膀胱灌注生理鹽水。

1.2.3 離體逼尿肌條制備

對大鼠頭部進行猛擊，使其昏迷，將其下腹部剪開，將其膀胱全切下來，對其質(zhì)量進行稱量。第一時間在平皿中放置，其盛有4℃ Krebs 營養(yǎng)液，將膀胱體部組織取下來，鏡下解剖，將粘膜仔細剔除，將肌條縱行切取下來，規(guī)格為8mm×2mm×2mm，每個膀胱將2 ～3 根肌條制備出來。用絲線結(jié)扎肌條兩端，在灌流機槽底部固定下端，其盛有37℃ Krebs 液，在Krebs 液中完全進入肌條，將上端和拉力傳感器連接起來，將拉力傳感器和四通道多功能生理信號放大器連接起來，向計算機中輸入檢測信號。將5%CO2+95%O2混合氣體通入Krebs 液中。氯化氨基甲酰膽堿（Carbachol）收縮試驗：平衡靜息張力到0.5g，依次用濃度為10-7mmol/L、10-6mmol/L、10-5mmol/L、10-4mmol/L、10-3mmol/L、10-2mmol/L 的carbachol 對肌條進行刺激，對肌條產(chǎn)生的收縮力進行測定，將逼尿肌對乙酰膽堿的敏感性反映出來。每種濃度試驗后均對肌條進行3 次沖洗，并進行10min 的平衡，從而將殘留的carbachol 清除。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2. 結(jié)果

2.1 膀胱出口梗阻模型建立情況

梗阻組大鼠的膀胱容量顯著大于對照組（P＜0.05），膀胱濕質(zhì)量顯著高于對照組（P＜0.05），見表1。

表1 膀胱出口梗阻模型建立情況（±s）

表1 膀胱出口梗阻模型建立情況（±s）

組別 膀胱容量（ml） 膀胱濕質(zhì)量（g）梗阻組 3.2±1.0 10.3±1.7對照組 1.5±0.4 7.1±1.4 t 4.303 4.541 P＜0.05 ＜0.05

2.2 滴度濃度Carbachol 刺激逼尿肌條產(chǎn)生的收縮力分析

DS2 組大鼠的逼尿肌條收縮力顯著高于C 組（P＜0.05），DS4 組大鼠的逼尿肌條收縮力顯著低于C 組（P＜0.05），DI2 組、DI 組大鼠的逼尿肌條收縮力均顯著低于C 組（P＜0.05）。

2.3 膀胱出口梗阻模型建立后膀胱順應(yīng)性改變分析

DS2組、DS4組大鼠的膀胱順應(yīng)性均顯著高于C組（P＜0.05），DI2 組、DI4 組大鼠的膀胱順應(yīng)性均顯著低于C 組（P＜0.05），見表2。

表2 膀胱出口梗阻模型建立后膀胱順應(yīng)性改變分析（±s，ml/cmH2O）

表2 膀胱出口梗阻模型建立后膀胱順應(yīng)性改變分析（±s，ml/cmH2O）

組別 n 膀胱順應(yīng)性DS2 組 11 0.247±0.083 DI2 組 8 0.108±0.030 DS4 組 15 0.312±0.141 DI4 組 10 0.140±0.054 C 組 10 0.185±0.052

3. 討論

平滑肌是空腔臟器管壁，通常情況下，其功能、長度會隨著腔內(nèi)壓力的變化而變化，具體表現(xiàn)在能夠正常適應(yīng)一定范圍內(nèi)的壓力刺激作用，但是自身生物力學(xué)性質(zhì)會在前內(nèi)壓力比該范圍大的情況下發(fā)生異常[2-3]。因此，在對逼尿肌的生物力學(xué)特性進行實驗研究的過程中，對膀胱出口梗阻進行分析具有極為重要的臨床意義[4-5]。相關(guān)醫(yī)學(xué)研究表明[6-7]，梗阻后穩(wěn)定性、不穩(wěn)定性逼尿肌收縮性分別有雙相性改變、受損發(fā)生，膀胱順應(yīng)性分別提升、降低，二者顯著相關(guān)。本研究結(jié)果表明，梗阻組大鼠的膀胱容量顯著大于對照組（P＜0.05），膀胱濕質(zhì)量顯著高于對照組（P＜0.05）。DS2 組大鼠的逼尿肌條收縮力顯著高于C 組（P＜0.05），DS4 組大鼠的逼尿肌條收縮力顯著低于C 組（P＜0.05），DI2 組、DI 組大鼠的逼尿肌條收縮力均顯著低于C 組（P＜0.05）。DS2 組、DS4 組大鼠的膀胱順應(yīng)性均顯著高于C 組（P＜0.05），DI2 組、DI4 組大鼠的膀胱順應(yīng)性均顯著低于C 組（P＜0.05），和上述研究結(jié)果一致。

綜上所述，大鼠膀胱逼尿肌生物力學(xué)特性受到膀胱出口梗阻的直接影響，值得重視。