（安徽省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，安徽合肥 230091）

禽白血病（avian leucosis，AL）是由C 型反轉(zhuǎn)錄病毒群的禽白血病病毒（avian leucosis virus，ALV）引起禽類不同組織、細(xì)胞的良性及惡性腫瘤性疾病。目前已從雞群中分離到A—E 5 個(gè)亞群和J 亞群ALV[1]。其中，A/B 亞群主要引起禽淋巴肉瘤白血病，J 亞群致病性和傳染性比原有的經(jīng)典亞群強(qiáng)[2]，對(duì)禽類的危害程度也比經(jīng)典ALV 高?！秶?guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）》提出，國(guó)內(nèi)全部種禽場(chǎng)禽白血病要在2020年達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)。近年來(lái)，安徽省各地區(qū)均有不同程度的禽白血病流行[3-4]。本研究在2017—2019年持續(xù)對(duì)安徽省部分禽場(chǎng)不同品種家禽進(jìn)行了ALV 的J 抗體、A/B 抗體和p27 抗原的流行病學(xué)調(diào)查和抽樣監(jiān)測(cè)，了解安徽省禽場(chǎng)ALV 感染情況，以期為進(jìn)一步開(kāi)展全省禽白血病凈化工作提供參考。

1 材料與方法

1.1 禽場(chǎng)選擇

2017—2019年，結(jié)合《國(guó)家動(dòng)物疫病定點(diǎn)監(jiān)測(cè)實(shí)施方案》要求，綜合考慮安徽省禽類養(yǎng)殖特點(diǎn)和飼養(yǎng)規(guī)模，選取有代表性和可操作性的固定監(jiān)測(cè)縣，共選擇59 個(gè)不同規(guī)模禽場(chǎng)進(jìn)行禽白血病監(jiān)測(cè)。在各規(guī)模場(chǎng)點(diǎn)，兼顧禽類的不同類型、代次和品種，同時(shí)選取疫病凈化示范創(chuàng)建項(xiàng)目和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局選定的部分種禽場(chǎng)（圖1）。

1.2 樣品采集

根據(jù)《國(guó)家動(dòng)物疫病定點(diǎn)監(jiān)測(cè)實(shí)施方案》中的動(dòng)物飼養(yǎng)規(guī)模劃分標(biāo)準(zhǔn)，在選定的小規(guī)模（養(yǎng)殖量＜10 000 只）、中規(guī)模（10 000 只≤養(yǎng)殖量≤100 000 只）和大規(guī)模（養(yǎng)殖量＞100 000 只）商品代禽場(chǎng)，分別采集血清樣品100、50、30 份，在種雞場(chǎng)每場(chǎng)采集50 份蛋清；在《國(guó)家種畜禽場(chǎng)主要?jiǎng)游镆卟”O(jiān)測(cè)實(shí)施方案》選定的安徽省祖代禽場(chǎng)名單中，每場(chǎng)采集100 份血清和150 份蛋清。

1.3 樣品檢測(cè)

ALV-J 抗體、ALV-A/B 抗體和ALV-p27 抗原檢測(cè)，均使用ELISA 方法。使用酶標(biāo)儀（TECANSunris，瑞士帝肯公司），96 通道全自動(dòng)洗板機(jī)（ELx405，美國(guó)博騰儀器有限公司）等儀器，按照IDEXX 公司的ALV-p27 抗原檢測(cè)試劑盒以及ALV-J 抗體和ALV-A/B 抗體檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行檢測(cè)和結(jié)果判斷。

1.4 數(shù)據(jù)分析

樣品中的ALV-J 抗 體、ALV-A/B 抗體和ALV-p27 抗原檢測(cè)為陽(yáng)性即為陽(yáng)性個(gè)體，只要檢出1 份陽(yáng)性個(gè)體的禽場(chǎng)即為陽(yáng)性禽場(chǎng)。使用SPSS 22.0 軟件計(jì)算P值，用卡方檢驗(yàn)分析不同組間差異。用ArcGIS 10.6 軟件，標(biāo)注選定禽場(chǎng)空間分布。

2 結(jié)果與分析

2.1 時(shí)間分布

2017—2019年，血清樣品的ALV-J 抗體陽(yáng)性率分別為22.51%、15.12%和26.11%，呈先降后升的趨勢(shì)，場(chǎng)陽(yáng)性率分別為75.00%、42.86%、40.00%，呈逐年下降趨勢(shì)，2017年和2018年差異極顯著（P＜0.01）；血清樣品的ALV-A/B 抗體陽(yáng)性率分別為14.98%、4.10%和4.07%，場(chǎng)陽(yáng)性率分別為62.50%、46.43%、60.00%，均呈逐年下降趨勢(shì)，2017年和2018年差異極顯著（P＜0.01），2018年和2019年差異不顯著（P＞0.05）。2017—2019年檢測(cè)的2 100 份種蛋蛋清樣品中，個(gè)體陽(yáng)性率分別為7.08%、6.00%和4.20%，呈逐年下降趨勢(shì)，且ALV-J 抗體陽(yáng)性率均高于ALV-A/B 抗體和ALV-p27 抗原，但差異不顯著（P＞0.05）。具體結(jié)果見(jiàn)表1～2。

2.2 場(chǎng)間分布

從不同養(yǎng)殖規(guī)?？矗珹LV-J 抗體和ALV-A/B抗體的場(chǎng)陽(yáng)性率，大規(guī)模場(chǎng)最高，中規(guī)模場(chǎng)次之，小規(guī)模場(chǎng)最低；而個(gè)體陽(yáng)性率，中規(guī)模場(chǎng)最高，大規(guī)模和小規(guī)模相差不大。ALV-p27 抗原場(chǎng)陽(yáng)性率和個(gè)體陽(yáng)性率，大規(guī)模場(chǎng)均高于中規(guī)模場(chǎng)。具體結(jié)果見(jiàn)表3。

從不同場(chǎng)點(diǎn)類型看，祖代場(chǎng)的ALV-J 抗體和ALV-p27 抗原個(gè)體陽(yáng)性率最高，而商品場(chǎng)的ALV-A/B 抗體的個(gè)體陽(yáng)性率最高，其中祖代場(chǎng)的ALV-J 抗體陽(yáng)性率與父母代場(chǎng)差異極顯著（P＜0.01），商品場(chǎng)的ALV-A/B 抗體與祖代場(chǎng)和父母代場(chǎng)差異極顯著（P＜0.01），祖代場(chǎng)與父母代場(chǎng)差異不顯著（P＞0.05）；祖代場(chǎng)的ALV-p27 抗原陽(yáng)性率與父母代場(chǎng)和商品場(chǎng)差異不顯著（P＞0.05）。具體結(jié)果見(jiàn)表4。

表1 2017—2019年禽白血病血清樣品檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

表2 2017—2019年禽白血病場(chǎng)陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

表3 不同養(yǎng)殖規(guī)模禽白血病檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

表4 不同場(chǎng)點(diǎn)類型禽白血病檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

2.3 種間分布

不同養(yǎng)殖品種上，ALV-J 抗體個(gè)體陽(yáng)性率，黃羽肉雞＞蛋雞＞鴨＞白羽肉雞＞地方品種雞；ALV-A/B 抗體個(gè)體陽(yáng)性率，鴨＞白羽肉雞＞黃羽肉雞＞蛋雞＞地方品種雞（表5）。

表5 不同養(yǎng)殖品種禽白血病個(gè)體陽(yáng)性率檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

2.4 空間分布

2017—2019年監(jiān)測(cè)的59 個(gè)場(chǎng)點(diǎn)分布于8 個(gè)市（縣），大部分位于安徽南部，ALV-J 抗體、ALV-A/B 抗體、ALV-p27 抗原個(gè)體陽(yáng)性率呈現(xiàn)一定的區(qū)域分布特點(diǎn)，其中ALV-J 抗體個(gè)體陽(yáng)性率，貴池區(qū)最高（51.90%），長(zhǎng)豐縣最低（0）；ALV-A/B 抗體個(gè)體陽(yáng)性率，太湖縣最高（15.6%），寧國(guó)市最低（0）；ALV-p27 抗原個(gè)體陽(yáng)性率，貴池區(qū)最高（9.00%），廣德市（0）、寧國(guó)市（0）最低。具體結(jié)果見(jiàn)表6。

表6 不同地區(qū)禽白血病個(gè)體陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì) %

2.5 血清型分布

2017—2019年分別檢出ALV 抗體陽(yáng)性樣品352、311 和154 份，其中ALV-J 和ALV-A/B 亞群混合感染樣品分別為51、8 和9 份。由表7 可見(jiàn)，陽(yáng)性樣品中，ALV-J 亞群?jiǎn)我桓腥菊急戎鹉暝龈撸鳤LV-A/B 亞群?jiǎn)我桓腥竞突旌细腥菊急戎鹉杲档汀?/p>

表7 2017—2019年陽(yáng)性樣品中ALV-J 和ALV-A/B 亞群感染占比 %

3 討論

安徽是禽類養(yǎng)殖大省，唐文中[5]、胡曉田[6]均在安徽省的禽類樣品中監(jiān)測(cè)到ALV-J 抗體、ALV-A/B 抗體和ALV-p27 抗原。本次調(diào)查結(jié)果顯示：2017—2019年檢測(cè)的3 275 份禽血清樣品和2 100 份蛋清樣品中，ALV-J 抗體和ALV-A/B 抗體平均陽(yáng)性率為19.36%和7.66%，ALV-p27 抗原個(gè)體平均陽(yáng)性率為5.90%；59 個(gè)場(chǎng)點(diǎn)中，超過(guò)半數(shù)檢出ALV-J 抗體陽(yáng)性。

不同養(yǎng)殖規(guī)模和場(chǎng)點(diǎn)類型均能檢測(cè)到該病。禽白血病是垂直傳播性疾病，因而種禽場(chǎng)是防控重點(diǎn)。劉麗平等[7]2019年檢測(cè)了山東省8 個(gè)種雞場(chǎng)，發(fā)現(xiàn)ALV-J 抗體個(gè)體陽(yáng)性率為12.51%。本次調(diào)查結(jié)果顯示，祖代場(chǎng)的ALV-J 抗體個(gè)體陽(yáng)性率最高，表明安徽省需要加強(qiáng)種禽場(chǎng)的禽白血病凈化。安徽榮達(dá)禽業(yè)自開(kāi)展禽白血病凈化后，連續(xù)3年的ALV-J 抗體陽(yáng)性率低于9.00%，說(shuō)明只要通過(guò)連續(xù)系統(tǒng)的凈化工作，嚴(yán)格加強(qiáng)祖代場(chǎng)和父母代場(chǎng)凈化，可以有效控制禽白血?。槐敬握{(diào)查結(jié)果還顯示，商品代場(chǎng)的ALV-A/B 抗體陽(yáng)性率明顯高于祖代場(chǎng)和父母代場(chǎng)，說(shuō)明商品代場(chǎng)的ALV-A/B 亞群凈化工作更加艱巨。但只要堅(jiān)持開(kāi)展祖代場(chǎng)和父母代場(chǎng)凈化，在種禽場(chǎng)開(kāi)產(chǎn)后及時(shí)采集血清或種蛋進(jìn)行檢測(cè)，淘汰陽(yáng)性雞[8]，就可以從源頭上控制該病，從而可以有效降低商品代場(chǎng)的感染率；本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，祖代場(chǎng)蛋清中ALV-p27 抗原檢出率較高。對(duì)于種禽，檢測(cè)蛋清中ALV-p27 抗原可用于研究雞群的感染狀態(tài)[9]。只有及時(shí)將有陽(yáng)性檢出的整個(gè)家系的雛雞全部淘汰，同時(shí)淘汰相應(yīng)種母雞[10]，對(duì)種禽場(chǎng)的產(chǎn)蛋雞和種用公雞開(kāi)展禽白血病凈化[11]，才能更好地降低通過(guò)種蛋傳播該病的風(fēng)險(xiǎn)。

不同禽種均可感染ALV。2006—2011年，全國(guó)70%的蛋雞群暴發(fā)ALV-J 流行[12]。韋平等[13]在廣西14 個(gè)地方品種雞和其他11 種非雞類家禽中均檢測(cè)到禽白血病；彭昊等[14]在地方品種鴨和鵝體內(nèi)也檢測(cè)到ALV-A/B 抗體。本次調(diào)查顯示，不同品種禽類的A LV-J 抗體陽(yáng)性率差異較大（2.00%～26.24%），其中黃羽肉雞和蛋雞檢出率最高，鴨的ALV-A/B 抗體陽(yáng)性率較高，說(shuō)明ALV 感染禽類范圍不斷擴(kuò)大。因此，目前不僅要加強(qiáng)雞群的禽白血病凈化，也要重視鴨、鵝等禽類的監(jiān)測(cè)和凈化，引導(dǎo)各禽場(chǎng)有計(jì)劃、有步驟地按照國(guó)家制定的有關(guān)凈化程序，分批、分區(qū)、分階段進(jìn)行凈化，建立核心種群，讓養(yǎng)殖戶從凈化場(chǎng)引進(jìn)種蛋。通過(guò)積極有效開(kāi)展凈化工作，可以提高家禽的生產(chǎn)效率，降低動(dòng)物疫病發(fā)病率和死亡率[15]。

2017—2019年ALV-J 和ALV-A/B 混合感染情況均呈下降趨勢(shì)。但由于混合感染引起的發(fā)病情況比單一感染更為嚴(yán)重[16]，且不同亞群病毒在同一雞群或同一雞體內(nèi)傳播，存在不同亞群發(fā)生基因重組的潛在威脅[17]，因此仍然需要加強(qiáng)混合感染的控制。

4 結(jié)論

定點(diǎn)監(jiān)測(cè)表明，安徽省禽白血病流行較為嚴(yán)重，尤其是大型場(chǎng)、祖代場(chǎng)以及肉雞和鴨的ALV感染風(fēng)險(xiǎn)較高。因此，應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)對(duì)此類高風(fēng)險(xiǎn)禽場(chǎng)和禽群的禽白血病監(jiān)測(cè)，持續(xù)推進(jìn)禽白血病凈化工作。