吳海波 劉若男 高敏 許露 徐方舟 張妍蓓

肺癌是全世界最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和死亡率均位于首位，嚴重威脅人們的生命健康和生活質量[1]。從病理和治療角度，國際上通常將肺癌分為非小細胞肺癌(non small cell lung cancer，NSCLC)和小細胞肺癌(small cell lung cancer，SCLC)兩大類，其中非小細胞肺癌又可進一步分為腺癌、鱗癌、大細胞癌等等，有研究表明，非小細胞肺癌約占總肺癌人群的80%～85%[2]。肺癌的臨床表現(xiàn)缺乏特異性，早期診斷困難，經病理學確診后往往已處于腫瘤終末期，已喪失最佳治療機會，臨床上多采用以化療為主的綜合治療。因此化療療效的評估就顯得極為重要。早在1978年，美國國立癌癥研究所就明確了腫瘤標記物的概念：在腫瘤患者或者正常人中，產于腫瘤細胞本身的或者是由人體對腫瘤細胞反應而產生的，可以反映腫瘤存在和變化情況的一類化學物質，包括糖類、蛋白質、酶等等[3]。腫瘤標記物具有多種優(yōu)點，如簡單易行、幾乎無創(chuàng)等等，是當前研究的熱點[4]，目前已廣泛應用到各種腫瘤化療療效的評價中。腫瘤異常蛋白(tumor abnormal protein，TAP)是指各種惡性腫瘤發(fā)展過程中產生的糖蛋白的統(tǒng)稱[5]。多年前，外國學者Kostyantin,A,Galakhin就發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞在其生存和發(fā)展過程中會有多種異常糖蛋白被釋放出來，這些糖蛋白是突變的抑癌基因及癌基因的表達產物[6]。有研究表明，腫瘤異常蛋白在正常人體中處于低水平，難以被檢測出，而當腫瘤細胞累積到一定數(shù)量時則可被檢測出來[7]。如今被公認的腫瘤標志物如癌胚抗原(CEA)、CA125、CA199等糖蛋白抗原類腫瘤標志物均屬于腫瘤異常蛋白[8]。已有研究證實，外周靜脈血中的TAP可為早期肺癌的診斷提供依據(jù)，且對于肺癌與其他肺部病變的鑒別診斷亦具有重要參考價值[9]。而本研究將探討外周靜脈血TAP水平與肺癌的化學治療療效的相關性，以期為療效評價提供更多方法。

資料與方法

一、一般資料

收集安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院老年呼吸與危重癥學科于2016年9月24日至2018年10月4日收住入院的NSCLC患者83例。本研究收集外周靜脈血標本前已得到本人同意且獲得醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準。收集的肺癌患者中男性56人，構成比67.47%，女性27人，構成比32.53%，年齡在30～78歲之間，且病理類型均為非小細胞肺癌，其中腺癌44人，構成比53.01%，鱗癌39人，構成比46.99%。入選標準：①經支氣管活檢或肺部穿刺病理證實為原發(fā)性肺癌；②僅實施化療，未接受手術、放療、射頻消融、放射性粒子植入等其他治療；③PS<2分，無嚴重心腦腎等重要臟器疾病，耐受化療；④有完整的治療經過及輔助檢查。排除標準：①未經病理確診的肺癌患者；②確診后行除化療外的其他治療；③PS>2分，有嚴重心腦腎等重要臟器疾病，不能耐受化療；④依從性差，未能規(guī)律化療，導致資料不完整。

二、化療方案

本研究的NSCLC患者均應用以鉑類為基礎的一線化療方案(排除應用二線及三線方案)，常規(guī)三周為一個化療周期，經過四個周期后評價化療效果。

三、試劑與儀器及操作方法

試劑及儀器均由采用浙江瑞生醫(yī)療科技有限公司提供的TAP檢測試劑盒(凝聚法)、TAP檢測圖像分析儀。具體操作是對所有進入本研究的NSCLC患者分別于初次化療前及第4次化療結束后，采集外周靜脈血5mL，借助凝聚助劑，形成特定的圓形斑點。通過TAP檢測圖像分析儀測量凝聚物的面積。下一步進行面積判定：若凝聚物面積≥225μm2，則結果為TAP異常/凝聚物較大；若凝聚物面積為121～225μm2，則結果為TAP異常/凝聚物較??；若凝聚物面積<121μm2，則結果為TAP正常/無明顯凝聚物。最后統(tǒng)計化療前后患者外周靜脈血TAP的數(shù)值，并將化療前后的數(shù)值進行對比。

四、療效評價

NSCLC患者化療效果根據(jù)WHO實體瘤近期療效評定標準[10]可分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、穩(wěn)定(SD)及進展(PD)。我們將CR+PR歸為化療緩解組，SD歸為化療穩(wěn)定組，PD歸為化療無效組。本研究中完全緩解(CR)0 人，部分緩解(PR)22人，穩(wěn)定(SD)53人，進展(PD)8人，即入組患者經過四周期化療后共分為化療緩解組22人、化療穩(wěn)定組53人、化療無效組8人。

五、分析的統(tǒng)計學方法

結 果

一、對NSCLC患者化療前后各腫瘤標記物監(jiān)測

統(tǒng)計的各腫瘤標記物化療后均數(shù)均較化療前下降，其中有TAP、CEA及CYFRA211化療前后的差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)(見表1)。

表1 NSCLC患者化療前后各腫瘤標記物水平

二、對不同化療療效(即緩解、穩(wěn)定和進展)的NSCLC患者外周靜脈血TAP化療前后的數(shù)值及其變化監(jiān)測

發(fā)現(xiàn)緩解組、穩(wěn)定組化療后外周靜脈血TAP水平下降，進展組化療后外周靜脈血TAP水平升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，且不同化療療效患者化療前后外周靜脈血TAP的變化存在差異，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)(見表2)。

表2 NSCLC患者不同化療療效與TAP化療前后數(shù)值變化的關系

三、對NSCLC患者化療前后各種腫瘤標記物的變化進行相關性分析

發(fā)現(xiàn)化療療效與化療前后TAP數(shù)值的變化存在中等程度相關性(P<0.05)，而其他腫瘤標記物不具有此種相關性(見表3)。

表3 NSCLC患者化療療效與常見各腫瘤標記物化療前后數(shù)值變化的相關性

四、對不同病理類型及病理分期的NSCLC患者化療前后TAP數(shù)值監(jiān)測

發(fā)現(xiàn)肺腺癌組和肺鱗癌組化療后TAP均值均較前下降，兩組之間的差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，但病理分期越晚的患者，TAP水平越高(F=8.049,P<0.05)(見表4、5)。

表4 NSCLC患者不同病理分型化療前后TAP水平

表5 NSCLC患者不同病理分期化療前后TAP水平

討 論

近些年來，全世界范圍內的惡性腫瘤的發(fā)病率呈明顯上升趨勢。肺癌目前已成為全球男性死亡的第一大原因，女性死亡的第二大原因[11]，目前還有上升趨勢。目前國際上公認的肺癌化療療效由影像學(肺部CT等)檢查前后對比評估。此方法不僅對醫(yī)療設備、閱片人員具有高要求，有一定的副作用(如輻射等)而且增加了病人的醫(yī)療負擔。近些年來興起的腫瘤標記物可以克服這些弊端，具有無副作用、費用相對較低、簡便等優(yōu)點，更容易被廣大患者接受[12]。

復合型腫瘤標志物，腫瘤異常蛋白亦叫異常糖鏈蛋白。而蛋白的糖基化是蛋白質翻譯后修飾之中最主要的修飾之一。近些年來，隨著研究的深入以及糖生物化學等學科的發(fā)展，腫瘤細胞會產生糖基化的改變這一結論已得到普遍認可。即當細胞發(fā)生惡變時，由于糖基化修飾酶類(如糖基轉移酶等)的失活或某些存在于體內的靜止的酶被激活，從而引起細胞表面糖類結構發(fā)生變化。而細胞表面的糖結構發(fā)生變化的時候，會產生多種異常糖鏈糖蛋白，最終被釋放到體液中，并較多地存在于外周血中[13-15]。許多常見的腫瘤標志物如CEA、AFP等就是源于此。已有研究指出，一些腫瘤標記物在肺癌患者化療前后可存在變化，可作為化療效果的評估指標[16]。而TAP的檢測是一種復合檢測技術，可將CEA、AFP等現(xiàn)有的臨床可以檢測的及部分尚不可檢測的幾十種腫瘤標志物，進行一次性組合檢測，高度聚集腫瘤信號。

本研究對83例非小細胞肺癌患者化療前后TAP數(shù)值進行統(tǒng)計、對比，發(fā)現(xiàn)化療后患者TAP數(shù)值明顯下降，提示化療對非小細胞肺癌患者體內TAP含量的改變有較為重要的影響，進一步分析發(fā)現(xiàn)化療緩解組及化療穩(wěn)定組化療后TAP數(shù)值下降而化療進展組化療后TAP數(shù)值升高，這一結果與史英等[17]的研究結果相似，表明在肺癌化療過程中適時測定外周靜脈血TAP數(shù)值有助于評估化療療效。

我們還比較了緩解、穩(wěn)定、進展三組化療前后TAP的變化，發(fā)現(xiàn)這三組化療前后TAP的變化有統(tǒng)計學差異，提示患者化療療效越好，TAP變化越明顯。進一步分析化療療效與化療前后各種腫瘤標記物變化的相關性，發(fā)現(xiàn)TAP的變化與化療療效有中等程度相關性，而劉謹[18]的研究顯示：以培美曲塞為基礎的胃癌患者化療前后的TAP的變化與化療療效有相關性，與本研究結果具有相似性。進一步表明監(jiān)測腫瘤患者化療前后外周靜脈血TAP數(shù)值有助于評估患者化療療效。

最后，本研究還對不同病理類型及病理分期患者的TAP數(shù)值進行了分析，結果表明肺腺癌組與肺鱗癌組TAP數(shù)值之間的差異在化療前后均無統(tǒng)計學意義，但病理分期越晚的患者，TAP含量越高，史英等[19]研究表明：肺腺癌組、肺鱗癌組及小細胞肺癌組化療前后TAP數(shù)值之間的差異無統(tǒng)計學意義，但病理分期越晚的患者，TAP水平越高，與本研究相似。

但考慮到本研究入組量相對較少，病理類型僅包含肺腺癌及肺鱗癌，且僅僅研究患者首次確診和化療四次后血清TAP含量，未就患者第1次、第2次、第3次化療后血清TAP含量進行分析，故有待擴大樣本量、分析不同次化療后TAP含量，進一步驗證本研究結論。

綜上所述，監(jiān)測患者化療前后外周靜脈血TAP水平可用于評估非小細胞肺癌患者化療療效并指導患者下一步治療，當患者化療后TAP水平升高時可能提示疾病進展，需要更換化療方案或更換治療方法。