唐曉林 趙紫平

小兒反復(fù)呼吸道感染(Recurrent Respiratory Tract Infection，RRTI)是一種上、下呼吸道感染頻繁發(fā)作為特點的兒科疾病，好發(fā)于6個月～6歲患兒[1]。目前臨床常多采用抗生素治療，但長期使用同種抗生素治療可使病原菌產(chǎn)生耐藥性。既往研究[2]指出：RRTI致病病原體繁多，常見的有肺炎鏈球菌(streptococcus pneumoniae,SP)、呼吸道合胞病毒( respiratory syncytial virus，RSV)及鼻病毒(rhinovirus ，HRV)等，且不同地區(qū)人群的病原體分布特征也有所不同。本地區(qū)以往研究[3]指出：RSV、腺病毒(adenovirus，AdV)和副流感病毒(parainfluenza virus，PIV)為本地區(qū)兒童RRTI感染的主要病原。為了解現(xiàn)階段本地區(qū)兒童RRTI感染的病毒病原流行情況，本研究檢測了2017年01月-2019年01月間322例RRTI患兒咽拭子、肺泡灌洗液標(biāo)本中的13項病原體，以期為長沙地區(qū)防治RRTI提供參考，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

資料與方法

一、 一般資料

2017年1月-2019年1月采集本院內(nèi)因反復(fù)咳嗽或內(nèi)科治療療效不佳的322例RRTI患兒行咽拭子檢查，呼吸道13項病原體檢測。其中，男性172例，女性150例，年齡：1月～14歲，平均(43.5±14.6)個月，BMI(22.46±3.52)kg/m2,病程均>7d。納入標(biāo)準(zhǔn) ①符合1987年全國小兒呼吸病學(xué)術(shù)會議制定的RRTI診斷標(biāo)準(zhǔn)[4](見表1)；②患兒家屬均已簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn) ①伴有佝僂癥；②存在先天性心臟病、營養(yǎng)不良者；③合并有貧血、變應(yīng)性疾病、免疫缺陷疾病者；④其他易引起RRTI的合并癥；⑤先天性結(jié)構(gòu)異常者。

表1 RRTI判斷標(biāo)準(zhǔn)(次/年)

二、方法

(1)提取核酸 提取患兒咽拭子中的DNA/RNA，試劑盒購自羅氏公司，50 μl洗脫液溶解，-70℃凍存待測。(2)病毒核酸檢測 采用多重反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)檢測，每個樣本給予3個多重PCR擴(kuò)增，電泳分析產(chǎn)物，檢測AdV、PIV、RSV ，設(shè)置套系多重PCR反應(yīng)條件;采用熒光定量PCR及實時熒光定量RT-PCR試劑盒檢測鼻咽拭子標(biāo)本中SP、肺炎支原體(mycoplasma pneumonia，MP) 、百日咳桿菌(bacillus pertussis，BP)、卡他莫拉菌(moraxelle catarrhalis，MC) 、HRV、流感嗜血桿菌(haemophilus influenzae，Hi)、流感A型 (influenza A，INF-A)、流感B型(influenza B，INF-B)、博卡病毒(human boca virus，hBoV)、偏肺病毒(partial lung virus，hMPV)。MC購自上海聯(lián)邁生物供貨才能有限公司，HRV、Hi購自上海晅科生物科技有限公司，BP試劑盒購自上海一研生物科技有限公司，其他檢測試劑盒均購自上海之江生物科技有限公司;以上操作均需嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行[5]。

三、統(tǒng)計學(xué)方法

采用軟件SPSS22.0處理數(shù)據(jù)，以n，%表示計數(shù)資料，多組之間比較采用χ2檢驗,多組之間兩兩比較采用P值修正的方法；以示計量資料，行獨(dú)立t檢驗，以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)。

結(jié) 果

一、13種病原體檢出情況

322例樣本中檢出陽性樣本313例 ，總陽性檢出率為97.20%，其中以BP 占比最高，為25.47%；其次為RSV ，占比22.67%；第三為SP，占比13.35%(見表2)。

表2 13種病原體檢出情況 例(%)

二、四季間RRTI病原體總陽性檢出率比較

RRTI病原體總陽性檢出率在不同季節(jié)間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)(見表3，圖1)。

表3 四季間RRTI病原體總陽性檢出率比較 例(%)

圖1 四季間RRTI病原體總陽性檢出率

三、不同年齡組間RRTI病原體總陽性檢出率比較

RRTI病原體總陽性檢出率在不同年齡組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；不同年齡段兩兩差異比較，經(jīng)P值修正后，差異均不具有修正統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.0083)(見表4，圖2)。

表4 不同年齡組間RRTI病原體總陽性檢出率比較 例(%)

圖2 不同年齡組間RRTI病原體總陽性檢出率

四、四季間主要RRTI病原體陽性檢出率比較

BP、RSV、SP、PIV、Hi在不同季節(jié)間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，其中BP在夏季的陽性檢出率明顯高于秋季(P<0.0083)；PIV在春季的陽性檢出率明顯高于冬季(P<0.0083)；Hi在冬季的陽性檢出率明顯高于春、夏季(P<0.0083)(見表5，圖3)。

表5 四季間主要RRTI病原體陽性檢出率比較 例(%)

圖3 四季間主要RRTI病原體陽性檢出率比較

五、5不同年齡組間主要RRTI病原體檢出陽性率比較

BP、RSV、SP、PIV在不同年齡間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，其中BP在≤1歲組的陽性檢出率明顯高于3～≤6歲(P<0.0083)；RSV在≤1歲組的陽性檢出率明顯高于3～≤6歲組(P<0.0083),3～≤6歲組的陽性檢出率明顯低于>6歲，≤14歲組(P<0.0083)；SP在3～≤6歲組的陽性檢出率明顯高于≤1歲組及>6歲，≤14歲組(P<0.0083)；PIV在各組的陽性檢出率比較，差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.0083)(見表6，圖4)。

表6 不同年齡組間主要RRTI病原體檢出陽性率比較 例(%)

圖4 各年齡組間主要RRTI病原體陽性檢出率比較

討 論

RRTI是一種可反復(fù)發(fā)作的小兒呼吸道疾病，其發(fā)病機(jī)制尚不明確，其感染病原體種類繁多，可與病毒、細(xì)菌等感染有關(guān)，其中部分病原體感染有季節(jié)流行趨勢。國內(nèi)研究[6-7]指出：武漢地區(qū)病毒總檢出率為56.08%，而瀘州地區(qū)的總檢出率為59.31%，其中MP占比最高為46.56%。而本研究中總病原體陽性檢出率為97.20%，高于國內(nèi)其他水平，其原因考慮與本研究納入的為反復(fù)發(fā)作且難以治愈的RRTI患兒有關(guān)。BP是一種高度傳染性病原體，可在學(xué)校、醫(yī)院等區(qū)域內(nèi)暴發(fā)，在BP疫苗出現(xiàn)以前，感染BP嬰幼兒的死亡率較高，但自我國接種BP疫苗以來，BP的死亡率已得到了控制[8]。本研究結(jié)果則顯示：病原體檢出占比最高的為BP，提示近年來BP發(fā)生率有所上升，原因則可能與近年來，長沙地區(qū)部分嬰幼兒未給予接種疫苗有關(guān)。

本研究中≤1年齡組的病原體總檢出率明顯最低為91.07%，而>1～<3歲組總感染率最高為99.04%。國內(nèi)對廣州地區(qū)患兒的研究則指出[9]：4～6歲患兒的病原體檢出率最高，與本研究結(jié)果存在差異的原因可能與研究樣本的不同有關(guān)。進(jìn)一步分析結(jié)果顯示：BP呈夏季流行趨勢，與山東地區(qū)的研究結(jié)果一致[10]。且其多發(fā)于≤1歲的嬰幼兒，分析由于≤1歲嬰幼兒呼吸道尚未發(fā)育完全，加上未接種疫苗，極易感染BP。為更好的防控長沙地區(qū)BP的傳播，各大醫(yī)院應(yīng)及時控制傳染源 ，在BP流行季節(jié)，一旦發(fā)現(xiàn)前驅(qū)癥狀，家長應(yīng)及早帶患兒就診；同時必須阻斷BP，保持室內(nèi)通風(fēng)，曝曬衣物，消毒處理痰液及口鼻分泌物；宣傳普及BP防治知識，孕婦在懷孕期間提前給予接種BP疫苗，減少母嬰傳播，為嬰幼兒的健康生長提供預(yù)防基礎(chǔ)[11]。

RSV是一種較為常見的肺炎病毒屬，多見于下呼吸道感染。國內(nèi)研究[12]指出：RSV在揚(yáng)州地區(qū)的檢出率均處于第一的地位。本研究中RSV檢出率處于第二，為22.67%。本研究結(jié)果還顯示：RSV在冬季的陽性檢出率較春、夏有明顯升高；且RSV多發(fā)于≤1歲的嬰幼兒，國內(nèi)研究[13]曾指出：RSV多在冬春季流行，且好發(fā)于1歲以下嬰幼兒。考慮原因與嬰幼兒呼吸系統(tǒng)及免疫功能均未完全發(fā)育，更易感染。因此，臨床在冬季應(yīng)注意預(yù)防RSV，并重點保護(hù)≤1歲的嬰幼兒。SP是存在人體鼻咽部的一種正常菌群，但其常?？梢l(fā)嬰幼呼吸道系統(tǒng)疾病。國內(nèi)研究[14]指出：SP檢出率與PM2.5、PM10等指標(biāo)呈明顯正相關(guān)。而本研究結(jié)果也顯示：SP的檢出率居于第三位，考慮長沙地區(qū)SP檢出率較高的原因也與空氣污染，汽車尾氣排放有關(guān)。同時有研究[15]中還指出：在夏季需預(yù)防SP引起的呼吸道感染，且其好發(fā)于幼兒及學(xué)齡前兒童。本研究中SP在冬季的流行趨勢則較為明顯，且其多發(fā)于3～≤6歲幼兒，考慮SP季節(jié)流行趨勢存在差異的原因與地區(qū)溫度、環(huán)境的差異有關(guān)。PIV共有四個亞型，感染后可引起毛細(xì)支氣管炎、肺炎或下呼吸道感染，且可伴隨發(fā)熱、喘息等癥狀。研究[16]指出：其流行趨勢與其亞型有關(guān)，但PIV常常發(fā)生于春夏季。另有研究則指出：PIV在1個月～3歲兒童中的檢出率更高。本研究中，PIV在春季的陽性檢出率明顯高于其他季節(jié)，但其更易發(fā)生在3～≤6歲兒童中，存在差異的原因可能與地區(qū)差異有關(guān)。

目前，長沙地區(qū)引起RRTI的病原體種類繁多，且不同病原體引起的癥狀也有所相同，通過病毒核酸檢測，能夠幫助臨床快速鑒定致病病原體，為臨床選擇合理的抗菌藥提供了可靠依據(jù)。綜上所述，長沙地區(qū)反復(fù)發(fā)作、難治性RRTI的主要病原體為BP 、RSV 及SP，在春、夏季臨床需做好BP的預(yù)防工作，在冬季做好RSV、SP的防治工作等，臨床可加強(qiáng)對長沙地區(qū)病原體的監(jiān)測，達(dá)到合理用藥，促進(jìn)RRTI患兒早日康復(fù)的目的。但本研究存在不足，如研究結(jié)果可能存在地區(qū)差異，且未對不同病原體感染患兒預(yù)后進(jìn)行分析等，需行進(jìn)一步的大樣本研究證實。