李偉堅 林常青 陳中紅

慢阻肺中較為常見的并發(fā)癥為肺動脈高壓(PH)，這會對患者的預(yù)后與生活質(zhì)量造成嚴(yán)重的影響，且會提高患者住院風(fēng)險，延長住院時間[1]。以往臨床上認(rèn)為慢阻肺患者由于缺氧而出現(xiàn)肺動脈重塑與肺動脈痙攣是最終引發(fā)肺動脈高壓的原因。近年臨床上認(rèn)為慢阻肺患者發(fā)生肺動脈高壓的原因不僅與缺氧有關(guān)，還與其他原因有關(guān)。近年臨床上開始對患者慢性肺部炎性反應(yīng)在肺動脈高壓發(fā)生、發(fā)展過程中的重要作用進(jìn)行了研究[2]。慢阻肺屬于慢性呼吸道炎性疾病，它的發(fā)生、發(fā)展均與氧化應(yīng)激反應(yīng)、蛋白酶失衡、炎性反應(yīng)有關(guān)[3]。當(dāng)慢阻肺患者發(fā)生肺動脈高壓后會導(dǎo)致心力衰竭、肺心病等的發(fā)生。在患者發(fā)生肺動脈高壓期間，血清miR-130a、miR-204水平會發(fā)生明顯的異常，說明在慢阻肺合并肺動脈高壓發(fā)生中，血清miR-130a、miR-204發(fā)揮著一定的作用。我們在慢阻肺合并肺動脈高壓患者血清miR-130a、miR-204水平及其臨床意義研究中，認(rèn)為血清miR-130a、miR-204水平與肺動脈高壓的發(fā)生存在緊密的聯(lián)系，通過對miR-130a、miR-204水平進(jìn)行檢測，可為臨床治療提供一定的依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

資料與方法

一、一般資料

選取2016年9月-2018年9月我院收治的慢阻肺合并肺動脈高壓患者210例作為研究組，同期選取單純慢阻肺患者210例作為對照組。

對照組210例，男125，女85例，年齡58～76歲，平均年齡(64.5±3.4)歲；病程4～18年，平均病程(15.5±2.2)年；平均肺動脈壓(28.6±3.2)mmHg；研究組210例，年齡60～77歲，平均年齡(65.7±3.8)歲；病程3～19年，平均病程(16.3±2.5)年；平均肺動脈壓(50.3±4.3)mmHg；患者資料有可比性(P>0.05)，研究得到了我院倫理委員會處批準(zhǔn)。

二、納入排除標(biāo)準(zhǔn)

1 納入標(biāo)準(zhǔn)：

(1)所有患者均符合慢阻肺合并肺動脈高壓診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)無其他呼吸系統(tǒng)疾病的患者；(3)肺動脈高壓：肺動脈收縮壓≥40mmHg；(4)無免疫性疾病的患者；(5)選取的患者均為急性加重期患者；(6)均知曉同意此次研究。

2 排除標(biāo)準(zhǔn)：

(1)存在肝腎功能異常的患者；(2)存在內(nèi)分泌紊亂的患者；(3)近期存在手術(shù)史的患者；(4)存在惡性腫瘤的患者；(5)心室功能異常的患者；(6)存在呼吸系統(tǒng)疾病的患者。

三、治療方法

生化指標(biāo)檢查：所有患者均在入院后的第二天清晨空腹抽取靜脈血5mL，將其裝入到抗凝管中放置到-70℃條件下保存。同時抽取患者的外周靜脈血送到檢驗處，檢驗儀器(全自動生化分析儀)由日本奧林巴斯公司提供，生化指標(biāo)均正常[4]。

血清miR-130a(血清中微小RNA-130a)、miR-204(血清中微小RNA-204)水平檢測：應(yīng)用rizol一步法對血液樣本中的總RNA進(jìn)行檢測。逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)：應(yīng)用Taqman@MicroRNAAssay、Taqman0Micro RNA Reverse Transerio-tionKit試劑盒中的特異性莖一環(huán)狀反轉(zhuǎn)錄引物進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。在進(jìn)行此操作時嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，反應(yīng)體系：15μl，條件：85℃5min、42℃30min、16℃30min[5]。同時應(yīng)用PCR引物探針混合液(Taqman8MicroR-NAAssays試劑盒)進(jìn)行熒光與擴(kuò)增檢測。通過熒光定量PCR儀反應(yīng)，在進(jìn)行此操作時嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。反應(yīng)體系：20μl，條件：60℃1min、95℃15s、95℃10min，前兩個步驟共40個循環(huán)。為了消除誤差，每個反應(yīng)均進(jìn)行3次[6]。

血清標(biāo)志物檢測：所有患者均在入院后的第二天清晨空腹抽取靜脈血5mL，離心分取上清液，后應(yīng)用免疫比濁法對CRP(超敏C反應(yīng)蛋白)水平進(jìn)行檢測(試劑盒由美國寶潔公司提供)，同時對患者的VEGF(血管內(nèi)皮生長因子)、ET-1(內(nèi)皮素)水平進(jìn)行檢測[7]。另外采集患者空腹外周血4mL，離心分取血漿，后應(yīng)用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測法對NT-proBNP(N末端B型鈉尿肽原)水平進(jìn)行檢測。

四、觀察指標(biāo)

比較兩組患者肺功能。應(yīng)用肺功能檢測儀器對患者的肺功能進(jìn)行檢測，指標(biāo)主要包括用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼吸量(FEV1)[8]。

比較兩組患者VEGF(血管生長因子)、NT-proNBP(N末端B型鈉尿肽原)、ET-1(內(nèi)皮素)、CRP(超敏C反應(yīng)蛋白)血清標(biāo)志物水平[9]。

比較兩組患者血清miR-130a、miR-204水平。

分析血清miR-130a(血清中微小RNA-130a)、miR-204(血清中微小RNA-204)水平與慢阻肺合并肺動脈高壓相關(guān)性[10]。

比較兩組患者血氣指標(biāo)變化情況。

使用血氣分析儀對兩組患者血氣指標(biāo)進(jìn)行檢測，指標(biāo)主要有血氧飽和度(SPO2)、血氧分壓(PaO2)、二氧化碳分壓(PaCO2)、pH等。PaO2正常值：60～90mmHg，PaCO2正常值：35～45mmHg，pH正常值：7.35～7.45。SPO2動脈血:約98%、靜脈血:約75%。

五、統(tǒng)計學(xué)方法

結(jié) 果

一、兩組肺功能對比

研究組FEV1低于對照組(P=0.003)，研究組FEV1%低于對照組(P=0.014)，研究組FEV1%/FVC低于對照組(P=0.045)(見表1)。

表1 肺功能對比

二、兩組VEGF、NT-proNBP、ET-1、CRP血清標(biāo)志物水平對比

研究組VEGF高于對照組(P=0.011)，研究組NT-proNBP高于對照組(P=0.047)，研究組ET-1高于對照組(P=0.040)，研究組CRP高于對照組(P=0.002)(見表2)。

表2 VEGF、NT-proNBP、ET-1、CRP血清標(biāo)志物水平對比

三、兩組血清miR-130a、miR-204水平對比

研究組血清miR-130a水平高于對照組(P=0.008)；研究組miR-204水平低于對照組(P=0.003)(見表3)。

表3 血清miR-130a、miR-204水平對比

四、血清miR-130a、miR-204水平與慢阻肺合并肺動脈高壓相關(guān)性分析

血清miR-130a水平與肺動脈壓水平呈正相關(guān)(P=0.017)；miR-204水平與肺動脈壓水平呈負(fù)相關(guān)(P=0.020)(見表4)。

表4 血清miR-130a、miR-204水平與慢阻肺合并肺動脈高壓相關(guān)性分析

五、血氣指標(biāo)對比

研究組SPO2、PaO2水平低于對照組(P=0.005)；研究組PaCO2水平高于對照組(P=0.012)；研究組pH與對照組相比無明顯差別(P=0.127)(見表5)。

表5 血氣指標(biāo)對比

討 論

慢阻肺是一種慢性呼吸系統(tǒng)疾病，在慢阻肺發(fā)生期間，可能會發(fā)生肺動脈高壓等并發(fā)癥，它是導(dǎo)致患者逐漸發(fā)展為肺心病的關(guān)鍵因素[11]。及時發(fā)現(xiàn)并對患者進(jìn)行治療，有利于降低慢阻肺合并肺動脈高壓的發(fā)生。

慢阻肺患者一般存在炎性反應(yīng)與慢性缺氧癥狀，缺氧會進(jìn)一步提高患者發(fā)生肺動脈高壓的概率[12]。對患者的缺氧癥狀進(jìn)行緩解是治療慢阻肺合并肺動脈高壓的重要手段。在慢阻肺合并肺動脈高壓的發(fā)生發(fā)展期間，炎性反應(yīng)發(fā)揮了非常重要的作用[13]。研究顯示，研究組VEGF高于對照組(P=0.011)，研究組NT-proNBP高于對照組(P=0.047)，研究組ET-1高于對照組(P=0.040)，研究組CRP高于對照組(P=0.002)，這就說明，對患者的各項標(biāo)志物水平進(jìn)行檢測，有利于判斷患者病情，提出治療措施。

MiRNA屬于內(nèi)源性單鏈小分子，一般是由核苷酸構(gòu)成(21～25個)，它的組織特異性、時序性、保守性較高，主要是通過與特異mRNA進(jìn)行結(jié)合來促進(jìn)mRNA的降解或者是抑制mRNA翻譯，最終有利于對基因表達(dá)情況進(jìn)行調(diào)控[14]。臨床上發(fā)現(xiàn)，在慢阻肺合并肺動脈高壓患者中，血清miR-130a、miR-204水平明顯異常，miR-130a顯著升高，miR-204顯著降低。通過給予患者合成miR-204可以降低肺動脈壓[15]。這些均說明，血清miR-130a、miR-204水平與慢阻肺合并肺動脈高壓的發(fā)生存在緊密的聯(lián)系。研究顯示，研究組血清miR-130a水平高于對照組(P=0.008)；研究組miR-204水平低于對照組(P=0.003)，血清miR-130a水平與肺動脈壓水平呈正相關(guān)(P=0.017)；miR-204水平與肺動脈壓水平呈負(fù)相關(guān)(P=0.020)，這就說明，可以將血清miR-130a、miR-204水平作為判斷慢阻肺合并肺動脈高壓的臨床指標(biāo)，臨床利用價值較高。

研究顯示，研究組SPO2、PaO2水平低于對照組(P=0.005)；研究組PaCO2水平高于對照組(P=0.012)；研究組pH與對照組相比無明顯差別(P=0.127)，這就說明，慢性阻塞性肺疾病合并肺動脈高壓患者各項指標(biāo)均比單純的慢性阻塞性肺疾病患者差，慢性阻塞性肺疾病合并肺動脈高壓患者的呼吸功能更差，心肌耗氧量明顯增加，呼吸肌疲勞感嚴(yán)重，更容易發(fā)生呼吸衰竭，肺動脈高壓。因此，慢性阻塞性肺疾病合并肺動脈高壓患者的血氣各指標(biāo)更差。

綜上所述，慢阻肺合并肺動脈高壓患者血清miR-130a、miR-204水平及其臨床意義研究中，血清miR-130a水平與肺動脈壓呈正相關(guān)，miR-204水平與肺動脈壓呈負(fù)相關(guān)，通過對慢阻肺合并肺動脈高壓患者血清miR-130a、miR-204水平進(jìn)行檢測，有利于判斷患者病情，值得在臨床上多加推廣與應(yīng)用。