張 浩
(遼寧盤錦檢驗(yàn)檢測(cè)中心,遼寧 盤錦 124010)
甘草具有補(bǔ)脾益氣、清熱解毒、祛痰止咳、緩急止痛、調(diào)和諸藥等功效,其用途廣泛,有著“國老”別名[1-2]。神農(nóng)本草經(jīng)甘草是上品常用中藥,在中國甘草應(yīng)用于臨床的時(shí)間已有4000多年。甘草中的主要活性成分甘草酸具有抗炎、解熱消毒、抗腫瘤、抗過敏和保肝等作用[3]。本文選取了不同產(chǎn)地的甘草,采用高效液相色譜法對(duì)甘草苷和甘草酸含量進(jìn)行了測(cè)定,為以后的科研、醫(yī)院購藥、百姓用藥提供了指導(dǎo)。
Agilent1100型高效液相色譜儀,PRO-DI-T超純水機(jī)(德國Sartorius公司),BP211D電子天平(德國Sartorius公司),700VDE型數(shù)控超聲波清洗器(合肥金龍克機(jī)械制造有限公司),HL-100 型高速多功能粉碎機(jī)(上海塞耐機(jī)械有限公司),202-OAB型電熱恒溫干燥箱(天津市泰斯特儀器有限公司),甘草苷對(duì)照品(批號(hào):111610-201908,含量為95.0%)購于中國食品藥品檢定研究院,甘草酸銨對(duì)照品購于中國食品藥品檢定研究院,乙腈為色譜純,磷酸為優(yōu)級(jí)純(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。
本實(shí)驗(yàn)中所使用的甘草中藥飲片均購自遼寧盤錦地區(qū)的不同藥品經(jīng)營單位(6個(gè)產(chǎn)地,分別是新疆、內(nèi)蒙古、寧夏、甘肅、黑龍江、山西),經(jīng)遼寧盤錦檢驗(yàn)檢測(cè)中心主任中藥師張國友鑒定均為正品。
2.1.1 色譜條件
以十八烷基硅烷鍵合硅膠作為填充劑;流動(dòng)相A為乙腈,流動(dòng)相B為0.05%磷酸溶,檢測(cè)波長(zhǎng)237 nm;按下表中規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫。
表1 色譜條件
2.1.2 對(duì)照品溶液制備
甘草苷和甘草酸銨對(duì)照品精密稱定后加70%乙醇制成每l.0 ml含甘草苷20μg和甘草酸銨0.2 mg的溶液,用0.45μm微孔濾膜濾過,供測(cè)試使用(甘草酸重量=甘草酸銨重量/1.0207)。
2.1.3 供試品溶液的制備
取全部供試樣品,分別粉碎,粉碎后過三號(hào)篩,精密稱定上述6個(gè)供試樣品粉末約0.2g,加入100ml70%乙醇溶液,超聲處理30min,室溫放冷后稱定重量,補(bǔ)足超聲前后減少的重量,加入乙醇后搖勻,進(jìn)行過濾,取續(xù)濾液,即得供試品溶液。
2.1.4 甘草苷和甘草酸含量測(cè)定
吸取對(duì)照品和供試品溶液各10.0μL,注入高效液相色譜儀,通過峰面積計(jì)算進(jìn)而得到甘草苷和甘草酸的含量。
《中國藥典》2015年版一部中對(duì)甘草中甘草苷和甘草酸含量進(jìn)行了規(guī)定:按干燥品計(jì)算,含甘草苷不得少于0.45%,甘草酸不得少于1.8%。本文選取的6個(gè)產(chǎn)地的甘草均符合要求,其數(shù)值見表2。
表2 6個(gè)產(chǎn)地的甘草中甘草苷和甘草酸含量
本文選取了6個(gè)不同產(chǎn)地的甘草,采用高效液相色譜法分別測(cè)定了甘草中甘草苷和甘草酸的含量。高效液相色譜法,操作簡(jiǎn)單,靈敏度高,結(jié)果準(zhǔn)確可靠。經(jīng)過測(cè)定得出:內(nèi)蒙古出產(chǎn)的甘草中甘草苷和甘草酸含量最高,進(jìn)一步體現(xiàn)了藥材地道性的重要性。