范久波，孫 莉，何家富，尚毅飛，魯家才，馬亞平，張 琴，趙建忠

（1.湖北文理學(xué)院附屬醫(yī)院 襄陽市中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗部，湖北 襄陽 441021；2. 襄陽職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院，湖北 襄陽 441000；3.湖北文理學(xué)院附屬醫(yī)院 襄陽市中心醫(yī)院呼吸內(nèi)科，湖北 襄陽 441021）

2019年12月發(fā)現(xiàn)于湖北武漢的新型冠狀病毒肺炎（corona virus disease 2019，COVID-19）是由β-冠狀病毒家族中的嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒2（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）感染誘發(fā)的新發(fā)傳染病，目前已在全球范圍迅速蔓延，嚴重危害人類的健康和生活。SARS-CoV-2傳染性極強，其誘發(fā)的COVID-19臨床表現(xiàn)以發(fā)熱、干咳、乏力為主，缺乏特異性，因此臨床以實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）或病毒基因測序結(jié)果為確診依據(jù)[1-2]。但由于PCR檢測費用昂貴，基層醫(yī)院無法普及，給臨床快速、準確診斷疾病帶來一定困難。血液學(xué)檢查因其操作簡便、快速、經(jīng)濟，是目前臨床輔助診斷的常用方法。血清淀粉樣蛋白A（serum amyloid A，SAA）是近幾年在臨床上被廣泛應(yīng)用的指標(biāo)，可反映機體感染情況。SAA升高主要見于病毒感染、心血管疾病、移植排斥反應(yīng)等，且敏感性高于C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）[3]。本研究擬分析COVID-19患者SAA、血常規(guī)、CRP水平，期望尋找有較高敏感性和特異性的血液學(xué)指標(biāo)，為COVID-19早期診斷和治療提供參考。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2020年1—2月襄陽市中心醫(yī)院住院的COVID-19患者30例（COVID-19組），依據(jù)我國國家衛(wèi)生健康委員會發(fā)布的《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第六版）》[2]要求，對疑似病例進行核酸檢測，在鼻咽拭子、痰液或下呼吸道分泌物、血液、糞便等標(biāo)本中檢出SARS-CoV-2核酸者確診為COVID-19。 將30例COVID-19患者按照電子計算機斷層掃描（computed tomography，CT）結(jié)果分為CT早期組（呈多發(fā)小斑片影及間質(zhì)改變，肺外帶明顯）和CT進展期組（雙肺多發(fā)磨玻璃影、浸潤影）。另選取襄陽市中心醫(yī)院同期體檢健康者33名（對照組）。

1.2 方法

通過醫(yī)院電子病歷系統(tǒng)收集患者臨床資料和實驗室檢查結(jié)果，臨床資料包括年齡、性別、體溫，實驗室檢查包括血常規(guī)、CRP、SAA、PCR，影像學(xué)檢查為CT。

1.3 儀器與試劑

SAA和CRP檢測采用Ottoman-1000自動特定蛋白即時檢測分析儀及配套試劑（上海奧普生物醫(yī)藥有限公司）。血常規(guī)檢測采用BC-6900五分類血液細胞分析儀及配套試劑購自深圳邁瑞公司。SARS-CoV-2核酸檢測試劑購自江蘇碩世生物科技股份有限公司，檢測儀器為ABI 7500實時熒光定量PCR儀（美國ABI公司）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 22.0軟件進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以例或率表示，組間比較采用χ2檢驗。正態(tài)分布的計量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗。非正態(tài)分布計量資料以中位數(shù)（M）[四分位數(shù)（P25～P75）]表示，組間比較采用Wilcoxon秩和檢驗。采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評估CRP、SAA聯(lián)合其他指標(biāo)的診斷效能。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 COVID-19組、對照組基本資料和血液學(xué)指標(biāo)比較

COVID-19組與對照組之間年齡和性別差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。與對照組比較，COVID-19組體溫、中性粒細胞百分比（the percentage of neutrophil，NEUT%）、CRP、SAA顯著升高，淋巴細胞百分比（the percentage of lymphocyte，LYMPH%）顯著降低（P<0.01），而白細胞（white blood cell，WBC）計數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2.2 各項血液學(xué)指標(biāo)診斷COVID-19的效能

COVID-19患者5個血液學(xué)指標(biāo)中，SAA陽性率最高（93.3%），其次是CRP（68.8%）。當(dāng)SAA為6.43 mg/L時，可獲得最大的診斷效能，此時診斷COVID-19的ROC曲線下面積（area under curve，AUC）為0.994，敏感性和特異性分別為100%和91.9%。見表2、圖1。

表1 COVID-19組和對照組一般資料比較

表2 COVID-19患者血液學(xué)指標(biāo)診斷效能

圖1 COVID-19患者血液學(xué)指標(biāo)ROC曲線

2.3 不同CT分期COVID-19患者血液學(xué)指標(biāo)比較

不同CT分期COVID-19患者SAA差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），而WBC計數(shù)、NEUT%、LYMPH%、CRP差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表3。

2.4 不同CT分期COVID-19患者血液學(xué)指標(biāo)陰性、陽性分布

分別以WBC計數(shù)>9.5×109/L、NEUT%>75%、LYMPH%<20%、CRP>10 mg/L、SAA>10 mg/L為陽性標(biāo)準，COVID-19患者不同CT分期之間WBC計數(shù)、NEUT%、LYMPH%、CRP、SAA陽性率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表4。

2.5 血液學(xué)指標(biāo)對不同CT分期COVID-19患者的診斷效能

COVID-19組5項血液學(xué)指標(biāo)中，SAA對CT分期的診斷效能最高，AUC為0.851，敏感性為82.4%，特異性為76.9%。見表5、圖2。

表3 不同CT分期COVID-19患者血液學(xué)指標(biāo)比較

表4 COVID-19患者不同CT分期血液學(xué)指標(biāo)陰性、陽性分布

表5 血液學(xué)指標(biāo)對CT分期的診斷效能

圖2 血液學(xué)指標(biāo)判斷CT分期的ROC曲線

3 討論

COVID-19患者多表現(xiàn)為發(fā)熱、干咳、乏力等癥狀，少數(shù)患者發(fā)病癥狀為腹痛腹瀉、頭暈頭痛等，易與普通肺炎混淆[5]，與以打噴嚏、流涕、咽痛等上呼吸道癥狀為主要發(fā)病癥狀的嚴重急性呼吸綜合癥和中東呼吸綜合癥不同[6]。在重型、危重型及死亡COVID-19病例中，往往合并高血壓、糖尿病、心臟病等慢性基礎(chǔ)疾病[7]。目前尚無治療SARS-CoV-2感染的特效藥物，因此對疑似病例實現(xiàn)早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療意義重大，可最大限度地避免由于延遲診療導(dǎo)致的死亡。

由于標(biāo)本采樣、患者病程、實驗操作和診斷試劑等因素的影響，已有較多SARS-CoV-2核酸檢測陰性轉(zhuǎn)陽性及肺部CT陽性SARSCoV-2核酸檢測陰性的報道[8-9]，給疫情評估帶來一定的困難。因此，尋找可簡便、快速輔助診斷COVID-19的血液學(xué)指標(biāo)對于臨床診斷很有幫助。本研究結(jié)果顯示，與對照組比較，COVID-19患者SAA、CRP、NEUT%顯著升高，LYMPH%顯著降低（P<0.05）。房曉偉等[10]發(fā)現(xiàn)，相對于普通型患者，重型和危重型COVID-19患者中性粒細胞絕對數(shù)、NEUT%、CRP顯著升高，而淋巴細胞絕對數(shù)和LYMPH%明顯下降，這些改變可能是由于細胞免疫受損，直接或間接通過細胞炎癥因子風(fēng)暴損害肺細胞而導(dǎo)致的，與本研究結(jié)果一致。有研究發(fā)現(xiàn)，COVID-19患者CRP水平均不同程度升高，且疾病程度越嚴重，升高越明顯[11]。

SAA是一種急性時相反應(yīng)蛋白，當(dāng)機體受到病原體感染后，血液中的SAA在4～6 h內(nèi)可迅速升高約1 000倍，清除病原體后又可迅速降低至正常水平[12]。在大量呼吸道感染相關(guān)文獻報道中，SAA的升高主要見于病毒、支原體、細菌感染，其敏感性高于CRP，而CRP的升高常見于細菌感染，病毒和支原體感染不升高或僅輕度升高[13-14]。YIP等[15]發(fā)現(xiàn)SAA可作為監(jiān)測肺炎疾病程度的標(biāo)志物。本研究結(jié)果也顯示，COVID-19患者5個血液學(xué)指標(biāo)中SAA陽性率最高（93.3%），其次是CRP（68.8%），NEUT%居第3位（53.1%）。當(dāng)SAA的臨界值為6.43 mg/L時，可獲得最大的診斷效能，此時診斷COVID-19的AUC為0.994，敏感性和特異性分別為100%和91.9%。此外，SAA區(qū)分不同CT分期的效能也最高，AUC達到0.851，敏感性為82.4%，特異性為76.9%，提示SAA可為COVID-19快速診斷和病程預(yù)測提供參考。

本研究回顧性分析了COVID-19患者臨床資料和實驗室檢查結(jié)果，評估了COVID-19患者各項指標(biāo)的診斷效能。結(jié)果顯示，血液學(xué)指標(biāo)，尤其是SAA，可快速、準確地輔助診斷COVID-19。但由于本研究樣本量有限，后續(xù)將聯(lián)合其他醫(yī)院，進一步擴大樣本量，進行多中心研究，進一步探討SAA對COVID-19的診斷價值，以幫助臨床快速、準確地判斷病情，為疫情的防控提供參考。