彭冬

摘 要： 現(xiàn)如今，真菌毒素檢測已成為食品安全檢測的重要關(guān)注點之一，其中，如何出具準確可靠的結(jié)果尤為受到重視。因此，需盡可能減少測量誤差及控制檢測過程中的關(guān)鍵風(fēng)險點，進而確保檢測結(jié)果準確可信。本文從取樣、制樣、前處理、方法選擇等方面進行逐一闡述，希望能為提高檢測工作質(zhì)量、降低風(fēng)險提供參考。

關(guān)鍵詞：真菌毒素 ?檢測 ?控制

真菌毒素廣泛存在于自然界，常見的真菌毒素包括黃曲霉毒素、脫氧學(xué)府鐮刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素、伏馬毒素等，其對人體健康的主要危害包括致癌、致畸等。通常而言，真菌毒素在食品中的含量較低，通常只有ppm或ppb級別（ppm級別相當(dāng)于32公斤糧食中的一顆），且真菌毒素分布不均——分布位置比較集中、單一，高污染區(qū)域和低污染區(qū)域的濃度相差數(shù)千倍。因此，如何取樣是檢測真菌毒素的關(guān)鍵，要做到取樣位置恰當(dāng)、取樣量合適。

1 取樣

一般而言，取樣原則包括數(shù)量保證、隨機抽取、機會均等、沒有傾向性等方面。同時，較為理想的采樣量一般需要大于1kg，總樣品數(shù)量達到4kg，縮分樣品量達到2kg，實驗室樣品量達到500g。此外，抽取點位要均勻分布，位置合理，隨機但不能隨意，即科學(xué)布點、選取中央位置，還應(yīng)在易發(fā)生霉變的位置適當(dāng)增加點位。

2 制樣

制樣順序是先磨后分，還是先分后磨？真菌毒素的分布位置較為集中，可能一批糧食中的某一個點位才會存在真菌毒素，如果采取先分后磨的原則，很可能會將受污染的點位劃分出去，從而造成檢測結(jié)果出現(xiàn)“未檢出”的尷尬局面。例如，10顆玉米中1顆含有真菌毒素，那么檢出的可能性只有10%，而未檢出的可能性有90%。所以，實驗室應(yīng)采取先研磨后分樣的方法，進而保證制樣的均一性，讓樣品更加均一，檢出值更加可靠。

粒度大小為多少才最合適？粒度太大易導(dǎo)致混合不均勻，存在取樣誤差，提取難度大，導(dǎo)致檢測結(jié)果誤差較大;粒度太小又會增大雜質(zhì)的提取度。經(jīng)過反復(fù)實驗發(fā)現(xiàn)，20目是檢測真菌毒素的最優(yōu)粒度大小，可使樣品混合更為均勻，提取也更充分，檢測誤差最小。

科學(xué)分樣是獲得準確結(jié)果的前提條件之一。本實驗采用四分法分樣，即將樣品混勻后平均分成4份，然后將對角2份混勻后再分成4份……一直執(zhí)行此操作直至完全混勻;或采取分樣器進行分樣，然后將樣品混合均勻即可。

3 真菌毒素檢測方法的選擇

真菌毒素的檢測有以下3種方法：色譜方法、ELISA及試紙條，其各自的優(yōu)缺點見表1。

當(dāng)前，實驗室常用的檢測方法為液相色譜法，也可根據(jù)各自需求選用適合自身的方法。例如，現(xiàn)場檢測通常只需判斷樣品有無定性測定，可選用試紙條，方便快捷的同時降低成本;企業(yè)自檢往往批次多、數(shù)量大，時間緊，但只需一個大致范圍——在合格區(qū)間內(nèi)即可，故可選用ELISA進行多通量同時檢測，該方法成本較低、檢測快捷且對人員要求不高。如果需要對樣品精確定量并出具具有法律效力的報告，則要選用儀器法，常用儀器有高效液相色譜儀和高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用儀，其檢測精度高、檢測限較低，相對而言檢測結(jié)果更為精準。

儀器法檢測的簡單檢測過程為：碾磨分樣、萃取、凈化、上機分析，其中，風(fēng)險控制點包括如下幾項。①免疫親和柱必須在5～6℃儲存，不得在室溫下放置，也不得冷凍保存，使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫。②樣品過柱流速十分關(guān)鍵，因為抗體與毒素反應(yīng)需要時間，過快過柱會影響回收率，故自然狀態(tài)過柱是最優(yōu)方法;淋洗可加快過柱速度，洗脫時需穩(wěn)定流速把真菌毒素全部洗脫下來。③凈化完試樣采用氮吹吹干，用流動相復(fù)溶，取樣體積必須精確為1mL，因為該體積要參與最終的結(jié)果計算。

4 真菌毒素檢測的質(zhì)量控制

質(zhì)量控制一般分為兩部分，即內(nèi)部質(zhì)量控制和外部質(zhì)量控制。內(nèi)部質(zhì)量控制的簡單方法就是隨樣品做空白試樣和質(zhì)控樣進行質(zhì)量控制，但質(zhì)控樣的價格相對昂貴，故可采取有證標(biāo)準物質(zhì)進行高、中、低3個濃度的加標(biāo)回收以進行內(nèi)部評估。外部質(zhì)量控制的常用方法就是參加能力驗證和實驗室間比對，通常選用前者，方便快捷，評估更加準確。

5 結(jié)語

只有合理的取樣、正確的制樣、選對合適的方法、做好質(zhì)量控制，才能更好地檢測真菌毒素，從而減少實驗誤差，提高檢測的可靠性。