高美林

摘 要：采用 4-氨基安替比林分光光度法測(cè)定揮發(fā)酚時(shí)，實(shí)驗(yàn)員發(fā)現(xiàn)試劑開封貯存時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)出現(xiàn)從淡黃色晶體變成淡紅色塊狀現(xiàn)象，同時(shí)會(huì)空白吸光度值也越來越高，導(dǎo)致檢出限過高，這個(gè)問題也是困擾很多實(shí)驗(yàn)員。在多次試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，本文從試驗(yàn)原理、工作曲線的繪制方法、空白和標(biāo)準(zhǔn)樣品數(shù)據(jù)對(duì)比等方面進(jìn)行了歸納總結(jié)，為提高測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確度提供了方法參考。

關(guān)鍵詞：揮發(fā)酚;4-氨基安替比林;檢出限;空白

HJ 503-2009《水質(zhì) 揮發(fā)酚的測(cè)定 4-氨基安替比林分光光度法》的測(cè)定方法有萃取分光光度法和直接分光光度法兩種。萃取分光光度法適用于地表水、地下水、飲用水，此方法具有地檢出限低，精密度高的特點(diǎn)，經(jīng)常被檢測(cè)人員所使用。但是操作中比直接分光光度法難度會(huì)高很多，按照方法標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的操作步驟有時(shí)候會(huì)發(fā)生空白值過高的現(xiàn)象，這是由于在測(cè)試過程中產(chǎn)生了試劑發(fā)紅起塊氧化現(xiàn)象，下面通過不同的開封貯存時(shí)間的試劑分別來驗(yàn)證一下。

1 方法原理

被蒸餾出的酚類化合物，于pH（10.0±0.2）介質(zhì)中，在鐵氰化鉀存在下，與4-氨基安替比林反應(yīng)，生成橙紅色的安替比林染料，用三氯甲烷萃取后，在460nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。

2 工作曲線的繪制方法

①于一組8個(gè)分液漏斗中，分別加入100mL無酚水，依次加入0.00，0.25，0.50，1.00，3.00，5.00，7.00和10.00酚標(biāo)準(zhǔn)使用液（1.00mg/L），再分別加水至250mL;②顯色：將8個(gè)分液漏斗加2.0mL緩沖溶液，混勻，pH（10.0± 0.2），加1.5mL4-氨基安替比林溶液，混勻，再加1.5mL鐵氰化鉀溶液，充分混勻后，密塞，放置10min;③萃取：在上述顯色分液漏斗中準(zhǔn)確加入10.00mL三氯甲烷，密塞，劇烈振搖2min，將其放氣，靜置分層。用干脫脂棉或?yàn)V紙拭干分液漏斗頸管內(nèi)壁，于頸管內(nèi)塞一小團(tuán)干脫脂棉或?yàn)V紙，將余下三氯甲烷直接放入光程為30mm的比色皿中;④2.4吸光度測(cè)定：于460nm波長(zhǎng)，以三氯甲烷為參比，測(cè)定三氯甲烷層的吸光度值;⑤空白試驗(yàn)：用無酚水代替試樣，空白應(yīng)與試樣同時(shí)測(cè)定;⑥依據(jù)HJ 503-2009《水質(zhì) 揮發(fā)酚的測(cè)定 4-氨基安替比林分光光度法》中的方法繪制工作曲線，取放置開封2年的4-氨基安替比林試劑按照方法標(biāo)準(zhǔn)的附錄B提純方法，得出來的曲線表1;⑦依據(jù)HJ 503-2009《水質(zhì) 揮發(fā)酚的測(cè)定 4-氨基安替比林分光光度法》中的方法繪制工作曲線，取放置開封半年的4-氨基安替比林試劑按照方法標(biāo)準(zhǔn)的附錄B提純方法，得出來的曲線表2。

3 試驗(yàn)數(shù)據(jù)對(duì)比

用開封不同時(shí)間的4-氨基安替比林試劑繪制的工作曲線公式計(jì)算出的測(cè)試結(jié)果見表3至表4。

由表1和表2數(shù)據(jù)分析得出，嚴(yán)格按照HJ 503-2009《水質(zhì) 揮發(fā)酚的測(cè)定 4-氨基安替比林分光光度法》中的方法繪制工作曲線，分別用放置開封2年的與放置開封半年的工作曲線得出的公式，從數(shù)據(jù)可得出放置開封2年的4-氨基安替比林空白數(shù)據(jù)偏高。

由表3和表4數(shù)據(jù)分析得出，放置開封2年的4-氨基安替比林的標(biāo)準(zhǔn)樣品吸光度偏高，結(jié)果均值高于范圍內(nèi)，放置開封2年的4-氨基安替比林本是淡黃色晶體，由于放置時(shí)間過長(zhǎng)加之容易氧化起塊狀，顏色變成淡紅色塊狀，引起空白顏色加深，吸光度值變大，檢出限隨之升高，無法達(dá)到0.0003mg/l的要求。所以在使用中必須要注意4-氨基安替比林的放置時(shí)間，顏色如變成淡紅色色塊狀，應(yīng)棄之不要再使用，以免影響樣品的準(zhǔn)確度。

操作中的注意事項(xiàng)：①每次做之前必須檢查好分液漏斗有無漏水情況，一起做空白試驗(yàn)，操作中盡量使用同一規(guī)格的量程器皿;②加入試劑先后順序不能顛倒;③加入量需準(zhǔn)確無誤至分液漏斗（標(biāo)液、無酚水及試樣）;④放置時(shí)間10min讓其充分反應(yīng)，劇烈振搖2min，力度每次盡量保持均勻，振搖過程中注意倒置用閥門放氣，靜置時(shí)間比放置時(shí)間稍長(zhǎng)2min，讓其分層明顯再收集濾液，很多實(shí)驗(yàn)人員收集濾液會(huì)出現(xiàn)濾液不太夠的情況，可能就是靜置時(shí)間不夠，或者棉絮太大塊塞得太緊，收集時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)揮發(fā)，正確操作建議先吸干頸管內(nèi)的水之后，然后塞一小塊干脫脂棉;⑤購(gòu)買試劑一定要做好相應(yīng)的廠家驗(yàn)收。

4 結(jié)論

HJ 503-2009《水質(zhì)揮發(fā)酚的測(cè)定4-氨基安替比林分光光度法》方法標(biāo)準(zhǔn)中未提及4-氨基安替比林試劑開封貯存時(shí)間所產(chǎn)生的影響，從數(shù)據(jù)中可看出即使在做好試劑提純的情況下，也不宜過久存放，4-氨基安替比林存放時(shí)間過久會(huì)變成淡紅色塊狀，從表1-表4數(shù)據(jù)表明試劑存放過久不但會(huì)導(dǎo)致空白值偏大，同時(shí)會(huì)影響準(zhǔn)確度。

此外，在組織能力驗(yàn)證和實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)的時(shí)候，組織方在作業(yè)指導(dǎo)書中對(duì)試劑開封保存時(shí)間和產(chǎn)生淡紅色塊狀現(xiàn)象應(yīng)該進(jìn)行必要說明，對(duì)于容器的選擇和無酚水的配制以及操作過程中必須嚴(yán)格按照方法標(biāo)準(zhǔn)。

參考文獻(xiàn)：

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