陳康部

近年消化道惡性腫瘤患者逐漸增多，大腸癌是較為嚴(yán)重的消化道惡性腫瘤。大腸癌的發(fā)展較為漫長(zhǎng)，它是由正常的腸上皮組織逐漸演變?yōu)橄倭鲎詈笞優(yōu)閻盒园?，因此，在腸上皮組織癌變之前，大腸腺瘤可以作為癌變的標(biāo)志之一[1，2]。為盡量減少大腸癌的發(fā)生，通常在大腸腺瘤期進(jìn)行內(nèi)鏡下腺瘤摘除手術(shù)，術(shù)后再次復(fù)發(fā)演變成大腸癌的機(jī)率極低。大腸腺瘤的種類分兩種，一種為直徑小于5mm 的腺瘤，癌變機(jī)率較小，臨床上可以切除或者不切除將其保留[3，4]；另一種是直徑大于5mm 的腺瘤，這種腺瘤需要及時(shí)處理留取標(biāo)本進(jìn)行病理檢查，其癌變的機(jī)率較大。因此，通過(guò)腺瘤的形態(tài)改變可以判斷出腺瘤的癌變情況，通過(guò)形態(tài)特征和基因結(jié)構(gòu)表達(dá)來(lái)判斷是否含有有風(fēng)險(xiǎn)的腺瘤結(jié)構(gòu)，并且給予早期預(yù)防和控制，進(jìn)而控制大腸癌的進(jìn)一步發(fā)展，對(duì)預(yù)防大腸癌有非常重要的作用[5，6]。目前，通過(guò)各種醫(yī)學(xué)途徑均可證明大腸癌是通過(guò)多種基因信號(hào)的異常積累所導(dǎo)致，p53 和EGFR 的表達(dá)也成為大腸腺瘤惡性演變?yōu)榇竽c癌的重要表達(dá)因子。本研究選取我院2017年1月～2018年12月收治的大腸癌、大腸腺瘤以及正常結(jié)腸粘膜患者各50 例，通過(guò)分析三組患者中p53 和EGFR 的表達(dá)及其與臨床特征的關(guān)系，研究其對(duì)大腸癌發(fā)展的重要影響，進(jìn)而對(duì)日后大腸癌的預(yù)后起到重要作用。

1 材料與方法

1.1 一般資料選取我院2017年1月～2018年12月收治的大腸癌、大腸腺瘤以及正常結(jié)腸粘膜患者各50 例。大腸癌患者中女24 例，男26 例，年齡32～91 歲，平均（45.78±10.23）歲；大腸腺瘤患者中女15例，男35例，年齡21～79歲，平均（46.12±9.34）歲；正常結(jié)腸粘膜患者中女16 例，男34 例，年齡23～63 歲，平均（45.86±9.65）歲。三組患者一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)所有組織經(jīng)病理檢查證實(shí)且均含有癌性與癌旁組織；患者術(shù)前均未經(jīng)過(guò)任何抗癌治療且均行HE 染色明確病理類型。

1.3 方法正常大腸組織由腸鏡下活檢取出，大腸腺瘤經(jīng)腸鏡下整體電切后取出，大腸癌診斷均經(jīng)腸鏡組織活檢或手術(shù)組織病理學(xué)檢查確診。三組標(biāo)本均在手術(shù)中切除新鮮組織后經(jīng)10%中性福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，4μm 連續(xù)切片，采用免疫組化Envision 法對(duì)組織中EGFR、p53 進(jìn)行檢測(cè)。

1.4 診斷標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)陽(yáng)性及陰性對(duì)照顯色情況，確定無(wú)假陽(yáng)性及假陰性前提下，EGFR 染色定位于細(xì)胞胞膜和（或）胞漿，呈棕色；p53 染色定位于細(xì)胞胞核，以胞核內(nèi)有棕黃色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞，凡胞漿有棕黃色著色的不計(jì)入陽(yáng)性細(xì)胞內(nèi)，而作為陰性處 理[7]。低倍鏡下選取陽(yáng)性細(xì)胞最密集區(qū)，高倍鏡下計(jì)數(shù)腫瘤細(xì)胞。EGFR 陰性為無(wú)陽(yáng)性結(jié)果表達(dá)或非特異著色，＞10%區(qū)域陽(yáng)性表達(dá)且胞膜顯色不連續(xù)為+，＞10%區(qū)域陽(yáng)性表達(dá)且胞膜顯色連續(xù)，未形成完整細(xì)胞膜形態(tài)為++，＞10%區(qū)域陽(yáng)性表達(dá)且胞膜顯色連續(xù)，形成完整細(xì)胞膜形態(tài)為+++。p53 陰性為陽(yáng)性癌細(xì)胞計(jì)數(shù)＜10%，10%～25%為+，25%～50%為++，＞50%為+++。所有+以上的切片均由兩位資深的病理醫(yī)師進(jìn)行雙盲觀察[8]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 13.0 軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用±s表示，比較采用t檢驗(yàn)，組間比較采用非參數(shù)秩和檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組標(biāo)本中p53 和EGFR 的表達(dá)情況p53和EGFR 在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜內(nèi)均有表達(dá)，p53 在大腸癌、大腸腺瘤以及正常結(jié)腸粘膜的表達(dá)陽(yáng)性率分別為74.00%、62.00%、0，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；EGFR 在大腸癌、大腸腺瘤以及正常結(jié)腸粘膜的表達(dá)陽(yáng)性率分別為76.00%、64.00%、0，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 三組標(biāo)本中p53 和EGFR 的表達(dá)情況[n（%）]

2.2 大腸癌中p53 和EGFR 表達(dá)與臨床表現(xiàn)特征的關(guān)系p53 與分化程度：低分化及中-低分化p53的表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于中分化（P＜0.05）；而低分化與中-低分化p53 的表達(dá)陽(yáng)性率相當(dāng)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。p53 與浸潤(rùn)深度：T2、T3 和T4 的p53 的表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于T1（P＜0.05）。EGFR與分化程度：低分化及中-低分化的表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于中分化（P＜0.05），而低分化與中-低分化的表達(dá)陽(yáng)性率相當(dāng)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。EGFR 與浸潤(rùn)深度：T2、T3 和T4 的EGFR 的表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于T1（P＜0.05）。p53 和EGFR 表達(dá)在年齡和有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

2.3 大腸癌中p53 和EGFR 表達(dá)與Dukes 分期的相關(guān)性隨著Dukes 分期的逐漸升高，p53 和EGFR 表達(dá)的陽(yáng)性率也逐漸升高，p53 和EGFR 在患者體內(nèi)的表達(dá)與大腸癌的癌變程度均呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為rp53=0.520，rEGFR=0.518，P＜0.05。見表3。

表2 大腸癌中p53 和EGFR 表達(dá)與臨床特征的關(guān)系[n（%）]

表3 大腸癌中p53 和EGFR 表達(dá)與Dukes 分期的相關(guān)性

3 討論

大腸癌作為一種較為嚴(yán)重的消化道惡性腫瘤，其發(fā)展過(guò)程也較為復(fù)雜，一些正常的大腸黏膜可以轉(zhuǎn)化為良性的大腸腺瘤，而有些大腸黏膜會(huì)因?yàn)橐恍盒曰虻姆e累導(dǎo)致轉(zhuǎn)變?yōu)榇竽c癌[9，10]。大腸癌在50～70 歲人群中發(fā)病率較高，而且我國(guó)每年的大腸癌發(fā)病率都在逐漸升高，一些患者不注重惡性腫瘤的發(fā)展最終導(dǎo)致死亡[11]。由于生活水平的不斷提高，不良飲食習(xí)慣也給患者帶來(lái)了不良影響，使大腸癌發(fā)病率逐年上升[12]。p53 是一種可以參與細(xì)胞增殖分裂并能抑制腫瘤發(fā)展的基因，它通過(guò)負(fù)調(diào)節(jié)作用控制體內(nèi)的癌細(xì)胞發(fā)展。而突變后的p53 失去了對(duì)細(xì)胞增殖分化的控制功能，導(dǎo)致突變的p53 和野生p53 不斷結(jié)合積累，引起不良基因的積累，進(jìn)一步導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生[13]。研究表明，在大腸癌患者體內(nèi)，癌變?cè)絿?yán)重體內(nèi)突變的p53 含量越多，表達(dá)陽(yáng)性率也越高[14]。原癌基因c-erbB-1 的表達(dá)產(chǎn)物為表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR），正常細(xì)胞中EGFR 含量是正常的，而癌變細(xì)胞中EGFR 含量會(huì)表達(dá)過(guò)多過(guò)強(qiáng)。研究表明[15，16]，p53 和EGFR 的表達(dá)與浸潤(rùn)深度和分化程度有一定的關(guān)系，而和有無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移及年齡也有較大關(guān)系。根據(jù)Dukes 的分期可以表明，D 期p53 和DGFR 的表達(dá)最高，陽(yáng)性率也隨著期數(shù)的下降而降低，p53 和EGFR 的表達(dá)與大腸癌的癌變程度呈正相關(guān)。

本研究表明，p53 和EGFR 在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜內(nèi)均有表達(dá)，p53 在大腸癌、大腸腺瘤以及正常結(jié)腸粘膜的表達(dá)陽(yáng)性率分別為74.00%、62.00%、0，EGFR在大腸癌、大腸腺瘤以及正常結(jié)腸粘膜的表達(dá)陽(yáng)性率分別為76.00%、64.00%、0。p53 在不同分化程度組織中，低分化及中-低分化的表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于中分化，而低分化與中-低分化的表達(dá)陽(yáng)性率相當(dāng)。p53 在不同浸潤(rùn)深度中，T2、T3 和T4 的表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于T1。EGFR 在不同分化程度中，低分化及中-低分化的表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于中分化，而低分化與中-低分化的表達(dá)陽(yáng)性率相當(dāng)。p53 和EGFR 表達(dá)在年齡和有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中也有差異。大腸癌中p53 和EGFR 表達(dá)與Dukes 分期的相關(guān)性可見，隨著Dukes 分期的升高，p53 和EGFR 表達(dá)陽(yáng)性率也逐漸升高，p53 和EGFR 在患者體內(nèi)的表達(dá)與大腸癌的癌變程度呈正相關(guān)。因此，分化程度越高的腫瘤患者體內(nèi)，p53 和EGFR 的表達(dá)陽(yáng)性率也越高，與癌變程度呈正相關(guān)，說(shuō)明p53 和EGFR 可以作為篩查大腸癌的重要標(biāo)準(zhǔn)。

綜上所述，p53 和EGFR 的表達(dá)對(duì)腫瘤的浸潤(rùn)深度、轉(zhuǎn)移程度、分化程度都有直接的影響。因此p53 和EGFR 的表達(dá)可以作為大腸腺瘤及大腸癌組織中的早期診斷指標(biāo)，通過(guò)監(jiān)測(cè)p53 和EGFR 在體內(nèi)表達(dá)可以判斷患者的大腸組織是否有癌變的可能性，對(duì)腫瘤預(yù)后程度的判斷提供較可靠的依據(jù)，值得臨床推廣。