傅新征，葉錦龍

武夷學(xué)院茶與食品學(xué)院（武夷山 354300）

錐栗（Castanea henryi）為殼斗科植物，主要種植于我國(guó)南方地區(qū)，已有1 800多年的種植歷史[1]。福建省建甌市作為錐栗的主產(chǎn)區(qū)，全市栽培面積占全國(guó)70%以上，占福建省80%以上，目前年產(chǎn)量為全國(guó)最多，超過(guò)4.6萬(wàn) t，產(chǎn)值5億元[2]。錐栗殼為錐栗的果皮，占錐栗質(zhì)量的10%[3]。在錐栗加工企業(yè)，錐栗殼多數(shù)當(dāng)作廢棄物處理，既需要一定的處理費(fèi)用，又造成錐栗殼資源的大量浪費(fèi)，同時(shí)還增加碳排放量，提高了自然環(huán)境的壓力[4]。因此，開(kāi)發(fā)利用錐栗殼資源有巨大的現(xiàn)實(shí)意義。目前，有關(guān)錐栗的研究主要集中在種質(zhì)資源[5]、種植技術(shù)[6]、病蟲(chóng)害防治[7]、脫殼去衣[8]、產(chǎn)品加工[9]、錐栗淀粉性質(zhì)[10]等方面，而副產(chǎn)物錐栗殼綜合應(yīng)用的研究較少，主要集中在錐栗殼色素的提取純化和抗氧化等方面[11-12]，關(guān)于錐栗殼色素應(yīng)用的研究鮮少見(jiàn)到。

錐栗殼色素屬于棕色素類(lèi)，其主要活性成分是黃酮類(lèi)化合物[14]，黃酮類(lèi)色素穩(wěn)定性好且無(wú)毒副作用，是優(yōu)質(zhì)的天然色素，可作為食品添加劑使用。多酚類(lèi)化合物是葡萄酒的重要成分，分為黃酮類(lèi)和非黃酮類(lèi)[15]，其中黃酮類(lèi)起到重要作用，影響葡萄酒的外觀、色澤、口感、風(fēng)味和儲(chǔ)存性[16]。眾所周知，橡木桶在葡萄酒的釀造過(guò)程中賦予了葡萄酒特殊的香味物質(zhì)[13]。但橡木桶價(jià)格昂貴，使用3～5年就需更換，導(dǎo)致葡萄酒的造價(jià)較高。橡木桶源于橡樹(shù)，橡樹(shù)在植物分類(lèi)學(xué)上屬殼斗科[17-18]，與錐栗同屬，從物種角度推測(cè)錐栗殼與橡木的有效成分相近。綜上所述，錐栗殼及其色素可能是非常好的橡木桶替代品?；谝陨戏治?，此次試驗(yàn)探討將錐栗殼用于葡萄酒釀造，或提取錐栗殼色素用于葡萄酒釀造的可行性，旨在充分利用錐栗殼資源減少浪費(fèi)并提升錐栗的附加值，同時(shí)也為深入研究錐栗殼或錐栗殼色素代替橡木桶用于葡萄酒釀造奠定一定的基礎(chǔ)，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)葡萄酒生產(chǎn)成本的有效降低。

1 材料及方法

1.1 材料與試劑

錐栗、葡萄、白砂糖等（市售）。

氫氧化鈉、鹽酸、無(wú)水乙醇（分析純，上海展云化工有限公司）；石油醚（分析純，天津市北辰方正試劑廠）；乙酸乙酯（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化試劑有限公司）。

1.2 儀器與設(shè)備

Neofuge15R臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（力康生物醫(yī)療科技控股有限公司）；CyberScan pH510臺(tái)式pH計(jì)（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；糖度計(jì)（邦西儀器科技有限公司）；ZMKAMJJJ酒精計(jì)（河南威爾儀器廠）；RE-2000A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）；DGX-9243BC-1電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏設(shè)備有限公司）。

1.3 錐栗殼色素的提取工藝

錐栗殼→除雜→粉碎→烘干→NaOH堿溶劑浸提→減壓抽濾→旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮→萃取純化→干燥→色素成品

1.4 葡萄酒的制作工藝

葡萄→清洗瀝干→捏破放入容器→發(fā)酵→第2天加糖→第4天再加糖→發(fā)酵滿(mǎn)7 d→過(guò)濾皮渣→二次發(fā)酵→過(guò)濾→成品

試驗(yàn)選用自然發(fā)酵法制作葡萄酒，制作過(guò)程不需接種發(fā)酵菌株。操作工藝：稱(chēng)取500 g葡萄，用清水洗凈瀝干，捏破放入發(fā)酵罐中，加入0.05 g錐栗殼色素，混勻，進(jìn)行第1次發(fā)酵；發(fā)酵第2天加入20 g白砂糖，發(fā)酵第4天再次加入20 g白砂糖。第1次發(fā)酵共7 d，發(fā)酵過(guò)程中注意放氣，避免脹罐溢出，發(fā)酵溫度控制在20 ℃左右。第1次發(fā)酵結(jié)束后，紗布過(guò)濾去掉皮渣，進(jìn)行第2次發(fā)酵，注意放氣，發(fā)酵結(jié)束后過(guò)濾即可。

1.5 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

單因素試驗(yàn)主要探討錐栗殼和錐栗殼色素、錐栗殼色素添加量、白砂糖添加量和發(fā)酵時(shí)間對(duì)葡萄酒品質(zhì)的影響，以成品酒的感官評(píng)價(jià)、總糖、總酸、酒精度和pH等理化指標(biāo)作為評(píng)價(jià)指標(biāo)。

1.5.1 錐栗殼和錐栗殼色素對(duì)葡萄酒品質(zhì)的影響

分別稱(chēng)取3份葡萄，捏破葡萄放入發(fā)酵罐中，其中2份分別加入錐栗殼和錐栗殼色素，按照1.4小節(jié)的制作工藝發(fā)酵制作葡萄酒。

1.5.2 錐栗殼色素添加量對(duì)葡萄酒品質(zhì)的影響

稱(chēng)取5份葡萄，各500 g，捏破葡萄放入發(fā)酵罐，分別加入0.03，0.04，0.05，0.06和0.07 g的錐栗殼色素，混勻，按照1.4小節(jié)的制作工藝發(fā)酵制作葡萄酒。

1.5.3 白砂糖添加量對(duì)葡萄酒品質(zhì)的影響

缺陷連通域標(biāo)記用到的四鄰域規(guī)則窗口如圖4所示。首先對(duì)P×Q個(gè)區(qū)域塊從左到右、從上到下進(jìn)行掃描。設(shè)相鄰兩塊區(qū)域p1和p2存在跨塊缺陷， 可表示為C(p1)=C(p2)。

稱(chēng)取5份葡萄，各500 g，捏破葡萄放入發(fā)酵罐中，并分別加入0.05 g的錐栗殼色素，混勻，按照1.4小節(jié)的制作工藝發(fā)酵制作葡萄酒，發(fā)酵第2天時(shí)分別加入15，20，25，30和35 g白砂糖，發(fā)酵第4天時(shí)再次分別次加入15，20，25，30和35 g白砂糖。

1.5.4 發(fā)酵時(shí)間對(duì)葡萄酒品質(zhì)的影響

稱(chēng)取9份葡萄，各500 g，捏破葡萄放入發(fā)酵罐中，并分別加入0.05 g的錐栗殼色素，混勻，按照1.4小節(jié)的制作工藝發(fā)酵制作葡萄酒，分別控制發(fā)酵時(shí)間7，8，9，10，11，12，13，14和15 d。

1.5.5 錐栗殼色素用于葡萄酒制作的工藝參數(shù)優(yōu)化

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，進(jìn)行L9(33)正交試驗(yàn)，以感官評(píng)價(jià)作為指標(biāo)進(jìn)行參數(shù)優(yōu)化。因素水平見(jiàn)表1。

成品葡萄酒的理化指標(biāo)主要參照GB/T 15038—2006《葡萄酒、果酒的通用分析方法》中的方法測(cè)定。

1.5.7 葡萄酒感官評(píng)價(jià)的方法

由20人（男女各半）組成感官評(píng)定小組，根據(jù)表2進(jìn)行葡萄酒的感官評(píng)定，最終的評(píng)分為20人感官評(píng)分的平均值。感官評(píng)價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表2。

表2 葡萄酒的感官評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 錐栗殼和錐栗殼色素對(duì)葡萄酒品質(zhì)的影響

由表3可知，加錐栗殼和加錐栗殼色素的葡萄酒理化指標(biāo)差異較小，但加錐栗殼的葡萄酒在感官時(shí)有殼的異味且酒體渾濁有懸浮物，因此加錐栗殼的葡萄酒感官得分最低。不加錐栗殼或色素的葡萄酒感官評(píng)分較低，是因?yàn)槠渚企w顏色較淺，顯得葡萄酒不夠淳厚。因此，選擇加錐栗殼色素制作葡萄酒。

表3 錐栗殼和錐栗殼色素對(duì)葡萄酒品質(zhì)的影響

2.2 錐栗殼色素添加量對(duì)葡萄酒品質(zhì)的影響

由表4可知，隨錐栗殼色素添加量的增加，葡萄酒總糖含量升高、酒精度逐漸降低，分析原因可能與錐栗殼色素的有效成分有關(guān)，其有效成分主要為黃酮類(lèi)物質(zhì)，黃酮類(lèi)有一定的抑菌作用，所以添加色素一定程度上抑制了發(fā)酵菌的活性，導(dǎo)致代謝糖類(lèi)轉(zhuǎn)化為酒精的效率減弱。當(dāng)錐栗殼色素添加量小于0.06 g時(shí)，酒體顏色偏淺，總糖含量低，酒精度偏高，酒味重，因此感官評(píng)分不高；當(dāng)錐栗殼色素添加量為0.06 g時(shí)，感官評(píng)分最高，酒體甜度和酒度協(xié)調(diào)，顏色適宜；當(dāng)錐栗殼色素添加量大于0.06 g時(shí)，酒體顏色偏深，糖含量高，酒精度低，整體風(fēng)味不協(xié)調(diào)，評(píng)分較低。綜上，錐栗殼色素的適宜添加量為0.06 g。

表4 錐栗殼色素添加量對(duì)葡萄酒品質(zhì)的影響

2.3 白砂糖添加量對(duì)葡萄酒品質(zhì)的影響

由表5可知，隨白砂糖添加量的增加，葡萄酒總糖含量呈明顯升高趨勢(shì)，酒精度先快速升高后緩慢升高，而總酸和pH變化不大。當(dāng)白砂糖添加量為20 g時(shí)，酒體甜味和酒味協(xié)調(diào)，整體口感好，感官評(píng)分高；當(dāng)白砂糖添加量為15 g時(shí)，酒精度偏低，酒味淡，評(píng)分較低；當(dāng)白砂糖添加量大于20 g時(shí)，總糖含量高，酒體偏甜，甜味和酒味不協(xié)調(diào)，感官評(píng)分低。因此，白砂糖適宜的添加量為20 g。

2.4 發(fā)酵時(shí)間對(duì)葡萄酒品質(zhì)的影響

由表6可知，隨發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)，總糖含量起初快速下降，在發(fā)酵13 d后趨于平緩；酒精度先是快速升高，在13 d后緩慢升高；總酸含量在15 d內(nèi)呈上升趨勢(shì)。分析原因是發(fā)酵菌代謝糖類(lèi)生成酒精，所以總糖含量不斷減少，而酒精含量逐漸增多，此外發(fā)酵菌代謝同時(shí)產(chǎn)生一些酸性物質(zhì)，因此總酸增加。當(dāng)發(fā)酵時(shí)間為13和14 d時(shí)，理化指標(biāo)接近，酒體的甜味和酒味較協(xié)調(diào)，感官評(píng)分13 d略高于14 d，加上考慮時(shí)間效益，確定13 d為適宜的發(fā)酵時(shí)間。

表6 發(fā)酵時(shí)間對(duì)葡萄酒品質(zhì)的影響

2.5 工藝優(yōu)化試驗(yàn)結(jié)果

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選擇適宜的因素水平進(jìn)行L9(33)正交試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表7。三個(gè)因素對(duì)葡萄酒感官評(píng)分影響的主次順序?yàn)镃＞B=A，即發(fā)酵時(shí)間對(duì)葡萄酒感官品質(zhì)影響最大，其次是白砂糖添加量和錐栗殼色素添加量。最優(yōu)工藝組合為A1B2C3，即錐栗殼色素添加量0.05 g，白砂糖添加量20 g，發(fā)酵時(shí)間14 d。

表7 正交試驗(yàn)結(jié)果與分析

由表8可知，發(fā)酵時(shí)間（C）對(duì)葡萄酒的感官品質(zhì)有極顯著影響，白砂糖添加量（B）和錐栗殼色素添加量（A）對(duì)葡萄酒的感官品質(zhì)有顯著影響。

表8 正交試驗(yàn)結(jié)果方差分析

2.6 驗(yàn)證試驗(yàn)

正交試驗(yàn)優(yōu)化得到的最優(yōu)組合不在正交9組試驗(yàn)范圍內(nèi)，因此補(bǔ)充驗(yàn)證試驗(yàn)。分別按照最優(yōu)組合A1B2C3和正交試驗(yàn)評(píng)分最高的組A1B3C3制作葡萄酒，并對(duì)成品葡萄酒進(jìn)行感官評(píng)分。感官評(píng)分結(jié)果：A1B2C3為90分，A1B3C3為87分，即最優(yōu)組合評(píng)分更高。在最優(yōu)工藝A1B2C3條件下制作的葡萄酒，酒味和甜味協(xié)調(diào)，酒液澄清透亮，呈紫紅色。

3 結(jié)論

由單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)可知，錐栗殼色素用于葡萄酒制作的最優(yōu)工藝為：錐栗殼色素添加量0.05 g，白砂糖添加量20 g，發(fā)酵時(shí)間14 d。此條件下制作的葡萄酒，酒味和甜味協(xié)調(diào)，酒液澄清透亮，呈紫紅色。

此次試驗(yàn)是錐栗殼色素用于葡萄酒釀造的初探，通過(guò)試驗(yàn)證明了錐栗殼色素用于葡萄酒制作的可行性，同時(shí)也為深入研究錐栗殼色素代替橡木桶用于葡萄酒釀造奠定了一定基礎(chǔ)。