黃杰，易弋，羅福廣，文衍紅，胡大勝，蘭健勇，韓書煜

（1.柳州市漁業(yè)技術(shù)推廣站，廣西 柳州545006；2．廣西壯族自治區(qū)水產(chǎn)技術(shù)推廣總站，廣西 南寧530022；3.廣西科技大學(xué)生物與化學(xué)工程學(xué)院，廣西 柳州545006；4.柳州市谷之韻農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司，廣西 柳州545115）

田螺是我國大部分地區(qū)都有食用傳統(tǒng)的一種水生軟體動物，南方地區(qū)尤為喜愛。在分類地位上，屬于軟體動物門、腹足綱、中腹足目、田螺科、圓田螺屬[1]。田螺常見于各類水域，湖泊、河流、水庫、池塘及稻田都是其理想的棲息地，水草茂盛的水域?yàn)槠渥罴褩⒌豙2]。我國主要的田螺有中華圓田螺（Cipangopaludina cahayensis）、中國圓田螺（Cipangopaludina chinensis）2種。

田螺肉營養(yǎng)豐富，干物質(zhì)中含粗蛋白55.35%，鈣5.22%，磷0.42%，同時還含有豐富的維生素B和礦物質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)[3，4]。其是鈣含量遠(yuǎn)超60多種常見高鈣食物，是典型的高蛋白、低脂肪、高鈣質(zhì)的天然動物性保健食品。隨著社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人們也越來越喜歡這種具有地方特色的風(fēng)味食品。但由于農(nóng)藥、化肥的使用，野生的田螺資源越來越少，無法滿足日益增加的需求。因此，人工養(yǎng)殖田螺也就成為了養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的一個新方向[5]。

近年來，柳州螺螄粉從“路邊攤”走進(jìn)“工業(yè)園”，從名不見經(jīng)傳的地方特色小吃發(fā)展成為全國“網(wǎng)紅”食品，甚至出口到歐美國家[6-7]。2019年，柳州預(yù)包裝（袋裝）螺螄粉平均每天銷售150萬包，實(shí)體店突破1.8萬家，年產(chǎn)值超過60億元。為了保證螺螄粉原材料的供應(yīng)，柳州市從2018年起大力推廣田螺的人工養(yǎng)殖。

田螺行動緩慢，因此在人工養(yǎng)殖的條件下，如果投喂的人工飼料不能夠有效的吸引田螺前往覓食，而緊緊依靠它的隨機(jī)活動找到食物的概率比較低。在人工飼料中適當(dāng)添加誘食劑，能促進(jìn)田螺進(jìn)食，從而提高養(yǎng)殖效益。該文選擇了常見的幾種誘食劑，并人工添加到基礎(chǔ)飼料中，通過比較田螺對于的趨食性，篩選可能用于田螺人工飼料制作的誘食劑，以期為探索田螺人工養(yǎng)殖的科學(xué)方法提供一些依據(jù)。

1 材料及方法

1.1田螺

中國圓田螺，體質(zhì)量1.0~1.5 g/只，采集自柳州市谷之韻農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司位于柳州市柳江區(qū)里高鎮(zhèn)的田螺養(yǎng)殖基地。田螺采集后于實(shí)驗(yàn)室暫養(yǎng)1 d，然后選擇活力強(qiáng)的進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

1.2養(yǎng)殖用水

自來水預(yù)先曝氣充氧12 h。此時，養(yǎng)殖水中溶氧量約7~10 mg/L。

1.3誘食劑種類及飼料制作

選取四種氨基酸（丙氨酸、甲硫氨酸、天門冬氨酸、異亮氨酸）、兩種含硫化合物（甜菜堿、大蒜素）、酒糟干粉共7種誘食劑，以高筋面粉為基礎(chǔ)飼料，將誘食劑以不同比例添加于高筋面粉。其中氨基酸和含硫化合物類誘食劑個分成3個不同的添加量：0.2%、0.4%、0.6%，酒糟干粉添加量為固定的20%。高筋面粉與水按5∶3的質(zhì)量比混合揉捏制成面團(tuán)備用，每次試驗(yàn)現(xiàn)做現(xiàn)用。該文使用面粉作為基礎(chǔ)飼料主要考慮到面粉無味，可以有效的減少飼料本身的味道對于試驗(yàn)結(jié)果的影響，而且面粉加水揉捏成團(tuán)后成型性好，不易在水中溶散，也便于試驗(yàn)的開展。

1.4迷宮式養(yǎng)殖箱制作

試驗(yàn)養(yǎng)殖箱為75 cm×50 cm×30 cm（長×寬×高）的周轉(zhuǎn)箱，參考季延濱等人的試驗(yàn)[8]，用黑色PP板將周裝箱焊接成迷宮式養(yǎng)殖箱（圖1）。每個養(yǎng)殖箱被PP板分隔成7個區(qū)域，中央?yún)^(qū)域標(biāo)記為C區(qū)，為實(shí)驗(yàn)開始是放螺的位置。鄰近C區(qū)的為B區(qū)，添加誘食劑的面團(tuán)放置的區(qū)域?yàn)锳區(qū)，各區(qū)之間由5 cm的開口作為田螺行進(jìn)的通道。田螺從C區(qū)開始爬行，經(jīng)過2次選擇后進(jìn)入A區(qū)。

圖1 迷宮式養(yǎng)殖箱俯視圖簡圖

1.5試驗(yàn)方法

制備4個迷宮式養(yǎng)殖箱，水深10 cm，在C區(qū)各投放50個中國圓田螺。其中一個箱不放飼料作為對照，其余3只箱為平行試驗(yàn)，在A區(qū)放同一濃度下的3種不同添加劑飼料和酒糟飼料。放入田螺10 min后放入面團(tuán)進(jìn)行試驗(yàn)，2 h后觀察試驗(yàn)結(jié)果。其中酒糟飼料只有一個濃度，是為了作為對照方便數(shù)據(jù)分析時候?qū)⒉煌蔚恼T食效果做均一化處理。

1.6誘食效果的判定

為了更直觀的表示誘食效果，我們定義了以下下幾個概念，以便將誘食效果定量表示。規(guī)定試驗(yàn)結(jié)束時，誘食劑對C區(qū)的田螺的區(qū)域誘食度Qc=0，對B區(qū)的田螺區(qū)域誘食度Qb=2，對A區(qū)田螺的區(qū)域誘食度QA=4；田螺在空白組中相對于試驗(yàn)組自由擴(kuò)散到相對位置的C區(qū)自由擴(kuò)散度Rc=0，擴(kuò)散到相對位置的B區(qū)的自由擴(kuò)散度Rb=0，擴(kuò)散到相對位置發(fā)的A區(qū)的自由擴(kuò)散度Ra=4。

某誘食劑誘食度K計算方法如下：

式中：Na為試驗(yàn)結(jié)束時在某誘食劑A區(qū)存在的螺數(shù)，Nb為試驗(yàn)結(jié)束時最接近該誘食劑的B區(qū)存在的螺數(shù)，Na0為試驗(yàn)結(jié)束時該誘食劑在空白組相對位置的田螺數(shù)，Nb0為試驗(yàn)結(jié)束時該誘食劑在空白組相對位置最接近的B區(qū)的田螺數(shù)。所以K表示去除自由擴(kuò)散影響后的真實(shí)誘食劑效果。

相對誘食度K’=K某誘食劑/K酒糟。

2 結(jié)果

2.1 田螺隨機(jī)活動的顯著性差異分析

為了確認(rèn)田螺的隨機(jī)活動不會對試驗(yàn)結(jié)果造成影響，首先進(jìn)行了空白試驗(yàn)，即不添加飼料，讓田螺在養(yǎng)殖箱中自由活動，試驗(yàn)共進(jìn)行5次，對隨機(jī)活動到A區(qū)田螺的數(shù)量進(jìn)行了F檢驗(yàn)和T檢驗(yàn)。結(jié)果見表1。

表1 隨機(jī)活動到A區(qū)田螺數(shù)量的顯著性分析

從表中可以看出活動到A區(qū)各區(qū)的田螺數(shù)量在1~4個之間，2~3個居多。T檢驗(yàn)結(jié)果顯示各個區(qū)域之間的田螺數(shù)量不存在統(tǒng)計學(xué)意義差異。也就表明田螺活動到A區(qū)完全是一個隨機(jī)行為，不存在明顯的趨向性。

2.2 誘食劑第一次篩選

根據(jù)1.5所述的試驗(yàn)方法分別對不同添加量的誘食劑進(jìn)行了誘食效果試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果見圖2~圖4。

圖2 添加量0.2%的誘食劑對田螺的誘食效果

圖3添加量0.4%的誘食劑對田螺的誘食效果

試驗(yàn)結(jié)果顯示誘食劑對田螺的趨食性有明顯的誘導(dǎo)作用。除異亮氨酸外，其他誘食劑的效果要優(yōu)于酒糟，而丙氨酸、甜菜堿和大蒜素的誘食效果要優(yōu)于其他誘食劑。除了甲硫氨酸在0.6%的添加量下的效果要優(yōu)于另外2個較低的添加量外，其余誘食劑在此濃度下的誘食效果均最差，說明田螺對于過于強(qiáng)烈的氣味刺激還是有排斥的。丙氨酸0.2%，甜菜堿0.4%，大蒜素0.2%這幾個濃度是3種誘食劑各自幾個添加量中效果最好的，且與酒糟的誘食效果都具有極具統(tǒng)計學(xué)意義差異。

選擇在投放田螺2 h后觀察結(jié)果，是因?yàn)樘锫莸幕顒痈w中氧氣含量關(guān)系非常大[9]，水體中氧氣一旦降低太多，田螺就會沿著箱壁爬到水面呼吸。由于做的是誘食劑篩選，又不能夠向水體中增氧，否則氧氣的攪動會將香味成分混合，無法分析。經(jīng)過前期預(yù)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)投放田螺2 h后，田螺活動性還較強(qiáng)，誘食的趨向性也比較明顯，所以選擇在這個時間點(diǎn)觀察結(jié)果。

2.3 第二次篩選

由于丙氨酸0.2%，甜菜堿0.4%，大蒜素0.2%這3個條件沒有在同一個批次的試驗(yàn)中進(jìn)行，作者額外將這3個條件放在一起進(jìn)行了第二次篩選，同樣選擇酒糟最為對照，結(jié)果見圖5。結(jié)果顯示，3種誘食劑放在一起對各自的誘食效果還是有一定影響的。丙氨酸的相對誘食度略微上升，而甜菜堿和大蒜素的相對誘食度都有所下降，大蒜素的相對誘食度超過了甜菜堿，達(dá)到4.68。統(tǒng)計學(xué)分析表明甜菜堿和大蒜素的誘食效果要顯著高于丙氨酸，但大蒜素的相對誘食度超過了甜菜堿，二者之間卻沒有統(tǒng)計學(xué)意義差異。不過從添加量上比較，大蒜素的用量只有0.2%，低于甜菜堿的0.4%，二者如果成本差距不大，使用大蒜素更為合理。

圖5 誘食劑第二次篩選結(jié)果

3 討論

試驗(yàn)中甜味氨基酸丙氨酸、甜菜堿誘食效果明顯好于微苦的異亮氨酸和無味的天門冬氨酸；在誘食劑特殊氣味偏好上，中國圓田螺更偏好帶有刺激性的大蒜味道的大蒜素，但是對甲硫氨酸的特殊氣味、和具有酒香味的酒糟干粉偏好性不明顯。所以，就誘食效果來說中國圓田螺更偏好味甜、帶大蒜刺激味道的誘食劑。通過該次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加適當(dāng)濃度的誘食劑，能有效的提高田螺對食物的趨向性，在所測試的7種誘食劑中，大蒜素和甜菜堿的效果較好。

同種誘食劑的不同添加量對同一水產(chǎn)動物的誘食程度也是不一樣的，但不一定是越高越好。潘訓(xùn)彬等人研究了蘇氨酸、精氨酸等6種氨基酸單體對史氏鱘的誘食作用，結(jié)果表明較低濃度的氨基酸即可對史氏鱘表現(xiàn)出良好的誘食活性，過高濃度則會抑制其攝食[10]。周爽男在對誘食劑影響管角螺攝食和生長影響的研究中也發(fā)現(xiàn)添加氨基酸誘食劑對管角螺攝食有一定促進(jìn)作用；隨添加量增加，攝食率也增加；添加量達(dá)0.2%后；隨添加量增加，攝食率反而降低，其中甘氨酸表現(xiàn)的最為明顯[11]。該試驗(yàn)也得到類似的結(jié)果，除了甲硫氨酸外，其余幾種誘食劑在0.6%的添加量下的誘食效果均最差，說明田螺可能對于過于強(qiáng)烈的氣味刺激有排斥。

該次試驗(yàn)選用酒糟作為對照誘食劑主要是因本地有養(yǎng)殖戶使用該物質(zhì)添加在米糠、麥麩等主要原料中制作田螺飼料。當(dāng)然，他們在使用酒糟的時候并沒有考慮到誘食的作用，而是因?yàn)榫圃愀煞墼谠摰厝菀踪徺I，而且價錢也不高。田螺是一種雜食性動物，常以泥土中的微生物和腐殖質(zhì)及水中浮游植物、幼嫩水生植物、青苔等為食，蔬果、菜葉、米糠、麥麩、和各種動物下腳料等也能食用[12-13]。酒糟含大量的淀粉，也有一定的粗蛋白（15%~22%），理論上是可以作為田螺飼料的。

迷宮養(yǎng)殖箱的制作參考了季延濱等人的試驗(yàn)[8]，在他們的誘食劑篩選試驗(yàn)中，對蝦要經(jīng)過4次選擇才能達(dá)到最終的誘食劑區(qū)域。考慮到田螺行動緩慢，該試驗(yàn)將4次選擇降低為2次。此次試驗(yàn)所用的迷宮養(yǎng)殖箱1次只能測試4種誘食劑，去除一個對照，實(shí)際能測的只有3個，大大限制了試驗(yàn)的開展。但這個尺寸的塑料箱已經(jīng)是作者能夠從市面上買到的最大的箱子了。所以后續(xù)如果要加大誘食劑的篩選范圍，只能通過人工焊接制作更大的養(yǎng)殖箱，而且要做成圓形。圓形箱子的邊緣到中心點(diǎn)的距離都一樣，這樣能夠最大程度的增加誘食劑的投放區(qū)域。

過去，市場上田螺的來源主要依靠捕撈野生資源，所以針對田螺養(yǎng)殖的基礎(chǔ)性研究非常少。如今，田螺人工養(yǎng)殖的前景越來越大，廣西、湖南、廣東等地都有大量養(yǎng)殖戶開始從事田螺養(yǎng)殖。因此，希望各地的科研工作者能夠適時的開展關(guān)于田螺人工養(yǎng)殖的相關(guān)研究，為養(yǎng)殖戶能夠科學(xué)、高效地養(yǎng)殖田螺提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。