高波，孫瑞健，肖李霞，湯曉建，丁堯堯，黃加澎，張志勇，張志偉

（1.江蘇省海洋水產(chǎn)研究所，江蘇 南通226007；2.啟東市漁業(yè)技術(shù)推廣站，江蘇 啟東226200；3.江蘇省沿海開發(fā)（東臺(tái)）有限公司，江蘇 東臺(tái)224237）

黑鯛（Acanthopagrusschlegelii）為廣溫、廣鹽性魚類，常棲息于礁巖和沙泥底質(zhì)的清水環(huán)境中，分布于北太平洋西部，在中國(guó)沿海均有分布，以黃、渤海產(chǎn)量最多，主要漁場(chǎng)位于山東沿海。黑鯛為肉食性魚類，成年黑鯛以小魚蝦和貝類為主要進(jìn)食對(duì)象。江蘇省海洋研究所在1984年突破黑鯛全人工繁殖技術(shù)。近年來，隨著科研投入的不斷加大，在育苗及養(yǎng)殖技術(shù)上均取得較大的進(jìn)展[1-4]，每年培育規(guī)格5 cm黑鯛苗種近千萬尾，其中一部分進(jìn)行人工養(yǎng)殖，大部分投入到自然海區(qū)進(jìn)行增殖放流。

標(biāo)志放流的主要目的是為了研究魚類洄游路徑以及進(jìn)行增殖放流效果評(píng)估。通常是給魚打上標(biāo)簽，之后放流重捕，根據(jù)重捕魚的地點(diǎn)，重捕率等繪制洄游路線，推斷該魚群的游動(dòng)速度、方向、范圍及路線。之后再根據(jù)重捕魚的體重體長(zhǎng)等參數(shù)，估算出此次標(biāo)志魚類的種群變動(dòng)，以此來評(píng)判標(biāo)致放流的效果[5-7]。

標(biāo)志方法目前分為兩大類，體內(nèi)標(biāo)記和體外標(biāo)記。其中體外標(biāo)記中最常見，最古老的標(biāo)記方法就是剪鰭法，剪鰭法一般將魚的胸鰭、腹鰭等較易分辨的魚鰭剪去，但是在以往的標(biāo)志放流重捕實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)將魚鰭剪掉之后會(huì)重新長(zhǎng)出來，對(duì)重捕過程造成很大的影響。其他的體外標(biāo)記法還有顏料標(biāo)記法和體外標(biāo)法等，其中體外標(biāo)法包括穿體標(biāo)、掛牌法等，掛牌法在標(biāo)志放流中可以讓漁民更容易發(fā)現(xiàn)保留，曾經(jīng)被廣泛運(yùn)用于標(biāo)志放流實(shí)驗(yàn)中。近年來體內(nèi)標(biāo)記的方法因?yàn)槠鋵?duì)魚體造成的傷害較小，對(duì)于標(biāo)記之后魚的生長(zhǎng)存活的影響較低，可以利用注射器向魚體注射小型芯片，這對(duì)魚體的傷害很小，逐漸成為標(biāo)記放流試驗(yàn)中常用的方法。其中的主要包括PIT（被動(dòng)整合雷達(dá)）法、CWT（金屬線碼）法、生物遙測(cè)標(biāo)記法、分離式衛(wèi)星標(biāo)記法等[8]。其中PIT標(biāo)記法是近年來發(fā)明并且發(fā)展迅速的新型的體內(nèi)電子生物標(biāo)記技術(shù)，該標(biāo)記方法可以給每一個(gè)被標(biāo)記的生物有一個(gè)單獨(dú)屬于自己的編碼，有助于對(duì)不同個(gè)體動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育開展相關(guān)研究[9-12]。

黑鯛作為海洋經(jīng)濟(jì)物種，由幼體到成體所用成長(zhǎng)時(shí)間短，在海中移動(dòng)范圍小，肉質(zhì)鮮美而成為發(fā)展海洋增養(yǎng)殖業(yè)的理想對(duì)象。黑鯛標(biāo)志放流技術(shù)在近年發(fā)展迅速，已經(jīng)有許多成熟的標(biāo)志放流技術(shù)，但是對(duì)于黑鯛的標(biāo)志放流技術(shù)仍然是需要繼續(xù)研究探討的，國(guó)內(nèi)目前有很多黑鯛標(biāo)志放流技術(shù)的試驗(yàn)研究，其中在舟山海域、大亞灣、萊州灣東部近海、江蘇南部沿海等海域都進(jìn)行了黑鯛的標(biāo)志放流試驗(yàn)[13-16]，并且獲得了良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，但是不同標(biāo)記方法對(duì)不同規(guī)格黑鯛生長(zhǎng)及存活的影響試驗(yàn)并未見報(bào)道，該試驗(yàn)使用兩種不同的標(biāo)記方法（體外剪鰭標(biāo)記、體內(nèi)PIT標(biāo)記）對(duì)大小兩種體質(zhì)量規(guī)格的黑鯛進(jìn)行了標(biāo)記試驗(yàn)，以期為黑鯛增殖放流方法的選擇、規(guī)格的確定提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)在江蘇省海洋水產(chǎn)研究所的江蘇省海水增養(yǎng)殖技術(shù)及種苗中心開展，試驗(yàn)采用兩種大小不同規(guī)格的黑鯛，兩種不同規(guī)格分別設(shè)置2個(gè)平行組，1個(gè)對(duì)照組，每組試驗(yàn)對(duì)象為30尾，共計(jì)300尾，其中大規(guī)格組平均體質(zhì)量為69.00克，小規(guī)格的平均體質(zhì)量為41.29克。整套PIT標(biāo)記設(shè)備，在相同條件的水溫、鹽度、pH值、投餌量環(huán)境下進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2 方法

該試驗(yàn)中將大規(guī)格體外剪鰭組定為A組，平行組為A1組，大規(guī)格體內(nèi)PIT標(biāo)記組定為B組，平行組為B1組，大規(guī)格空白對(duì)照組定為C組；小規(guī)格體外剪鰭組定為a組，平行組為a1組，小規(guī)格體內(nèi)PIT標(biāo)記組定為b組，平行組為b1組，小規(guī)格空白對(duì)照組定為c組。利用電子天平將每尾黑鯛稱重，并且測(cè)量其全長(zhǎng)和體長(zhǎng)，將體質(zhì)量、全長(zhǎng)、體長(zhǎng)3個(gè)數(shù)據(jù)分別記錄。進(jìn)行體外剪鰭標(biāo)記，統(tǒng)一剪去右胸鰭；進(jìn)行體內(nèi)PIT法標(biāo)記，將魚橫置于桌面，利用PIT注射器將芯片注射入魚體背鰭下方，注射針頭與魚體角度應(yīng)為45°，用PIT掃描儀掃描編碼記錄，將其與體重、全長(zhǎng)、體長(zhǎng)相對(duì)應(yīng)，空白對(duì)照組不做任何標(biāo)記處理，記錄試驗(yàn)所測(cè)量的體質(zhì)量、全長(zhǎng)、體長(zhǎng)3個(gè)生物參數(shù)。標(biāo)記處理之后將每組魚放入試驗(yàn)用養(yǎng)殖桶中，觀察1 d后開始正式試驗(yàn)。試驗(yàn)過程中每天8：00、16：00兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)投喂餌料，記錄每天水溫，觀察每組的進(jìn)食情況，記錄死亡情況。試驗(yàn)周期從4月16日到5月12日，為期25 d，結(jié)束時(shí)測(cè)量每組魚的體質(zhì)量、全長(zhǎng)、體長(zhǎng)并記錄。計(jì)算存活率（存活尾數(shù)/初始尾數(shù)）、生長(zhǎng)率（最終體質(zhì)量與初始體質(zhì)量的差值/最終體質(zhì)量）。

2 結(jié)果與分析

在試驗(yàn)開始后，起初每天兩個(gè)時(shí)間段投喂餌料，發(fā)現(xiàn)其中僅有大規(guī)格體內(nèi)PIT標(biāo)記組進(jìn)食情況良好，其他組僅有少量攝食或者不進(jìn)食情況，因?yàn)楹邗牉榈讞~類，試驗(yàn)所用餌料為浮料，推測(cè)不進(jìn)食的原因是因?yàn)轸~沒有對(duì)進(jìn)食產(chǎn)生反應(yīng)，于是繼續(xù)投喂餌料希望其余組魚可以產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，然而效果沒有想象中的好，于是將魚不進(jìn)食的原因懷疑是由于養(yǎng)殖桶水位太高，魚不進(jìn)行上游覓食，所以在之后的換水過程中將水位降低，水位降低之后效果明顯，每組魚在投喂餌料之后都產(chǎn)生進(jìn)食運(yùn)動(dòng)。

圖1 不同規(guī)格黑鯛不同標(biāo)記方法存活率

2.1 存活率

根據(jù)每天的試驗(yàn)記錄和最終的數(shù)據(jù)分析比較，大規(guī)格黑鯛組中，體外剪鰭標(biāo)記組的存活率為60.00%，體內(nèi)PIT標(biāo)記組的存活率為83%，空白對(duì)照組的存活率為93%。可以從圖1中看出，大規(guī)格黑鯛組中，體外標(biāo)記和體內(nèi)標(biāo)記有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異；小規(guī)格黑鯛組中，體外標(biāo)記、體內(nèi)標(biāo)記、空白對(duì)照3組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異；體外標(biāo)記的大規(guī)格與小規(guī)格之間差異性具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，體內(nèi)標(biāo)記的大規(guī)格與小規(guī)格之間同樣存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異；空白對(duì)照組之間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異。

2.2 生長(zhǎng)率

在試驗(yàn)開始時(shí)對(duì)每條魚測(cè)量了其體質(zhì)量、全長(zhǎng)、體長(zhǎng)3組生物參數(shù)，并且以體質(zhì)量為分組標(biāo)準(zhǔn)將其分為大小兩種規(guī)格（表1），大規(guī)格黑鯛組平均體質(zhì)量為69.00 g；小規(guī)格黑鯛組平均體質(zhì)量為

表1 初始體質(zhì)量、全長(zhǎng)、體長(zhǎng)

表2 最終體質(zhì)量、全長(zhǎng)、體長(zhǎng)

圖2 不同規(guī)格黑鯛不同標(biāo)記方法生長(zhǎng)率

4 1.29 g，兩種大小規(guī)格的黑鯛體質(zhì)量有明顯差異。

根據(jù)圖2可以看出，大規(guī)格黑鯛組中，體外標(biāo)記組和體內(nèi)標(biāo)記組的平均生長(zhǎng)率分別為3.32%和15.82%，二者差異明顯，與空白對(duì)照組的生長(zhǎng)率11.23%相比較分析也存在差異；小規(guī)格黑鯛組中，體外標(biāo)記組和體內(nèi)標(biāo)記組的平均生長(zhǎng)率分別是10.64%和22.31%，二者有差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，外標(biāo)記組和空白對(duì)照組的生長(zhǎng)率相比沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異，體內(nèi)標(biāo)記組和空白對(duì)照組的生長(zhǎng)率相比存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異；體外標(biāo)記的大小規(guī)格兩組之間，大規(guī)格組和小規(guī)格組的生長(zhǎng)率存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異，體內(nèi)標(biāo)記的兩組之間，大規(guī)格組和小規(guī)格組的生長(zhǎng)率存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異，大小規(guī)格的空白對(duì)照組之間的生長(zhǎng)率沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異。

3 分析與討論

在標(biāo)志放流試驗(yàn)中，最基礎(chǔ)也是最重要的步驟就是標(biāo)記，良好的標(biāo)記技術(shù)是影響試驗(yàn)后期結(jié)果的重要因素，所以在標(biāo)記時(shí)應(yīng)該盡可能地避免由于標(biāo)記手法導(dǎo)致的魚體受損。所以在體外剪鰭標(biāo)記時(shí)應(yīng)該快速的剪去魚的右胸鰭，并且盡量使剩余的鰭長(zhǎng)保持一致，減少不一致的剪鰭長(zhǎng)度導(dǎo)致的生長(zhǎng)差距；而在體內(nèi)PIT標(biāo)記時(shí)，注射針頭應(yīng)從鱗下插入，與魚體保持45°，不損傷魚的魚鱗，減少體外受傷導(dǎo)致感染發(fā)炎的現(xiàn)象。體外標(biāo)記由于試驗(yàn)所采用的是剪鰭法，剪去一側(cè)胸鰭會(huì)導(dǎo)致魚在水中無法掌握游動(dòng)時(shí)的平衡，對(duì)于魚的生長(zhǎng)存活影響較大；而體內(nèi)PIT標(biāo)記是將PIT芯片由專門配套的注射器注入，對(duì)于魚體的損傷幾率很小，并且對(duì)標(biāo)記之后的魚的生活影響較小。標(biāo)志放流試驗(yàn)中魚體的大小也會(huì)成為試驗(yàn)?zāi)芊癯晒Φ闹匾蛩?，因此本試?yàn)選用了兩種大小規(guī)格的黑鯛，想通過試驗(yàn)來判斷黑鯛標(biāo)志放流的最佳體質(zhì)量規(guī)格。

3.1兩種不同標(biāo)記方法對(duì)大小兩種規(guī)格黑鯛的存活影響

試驗(yàn)結(jié)果顯示，在相同的生長(zhǎng)條件下（水溫，鹽度，pH值，投餌情況），經(jīng)過25 d的投喂之后，大規(guī)格黑鯛的3個(gè)組中，每組各30尾魚，體外標(biāo)記組存活17尾魚，體內(nèi)標(biāo)記組存活25尾魚，存活率分別為56.67%、83.33%體外剪鰭標(biāo)記和體內(nèi)PIT標(biāo)記兩組之間的存活率存在顯著性差異，可以得到的結(jié)論是在大規(guī)格黑鯛組中，體外剪鰭標(biāo)記方法對(duì)于黑鯛的存活影響明顯大于體內(nèi)PIT標(biāo)記方法；大規(guī)格空白對(duì)照組存活率為93.33%，和兩個(gè)試驗(yàn)組相比都存在顯著性差異。所以通過分析比較大規(guī)格黑鯛組中體外剪鰭標(biāo)記組、體內(nèi)PIT標(biāo)記組、空白對(duì)照組能夠得知對(duì)大規(guī)格黑鯛進(jìn)行標(biāo)記之后，無論是體外剪鰭標(biāo)記還是體內(nèi)PIT標(biāo)記，都會(huì)對(duì)大規(guī)格黑鯛的存活有較大的影響。在小規(guī)格黑鯛的3個(gè)組中，同樣每組各30尾魚，體外體內(nèi)兩組沒有魚死亡，可以得知無論體外剪鰭標(biāo)記法、或者是體內(nèi)PIT標(biāo)記法，二者對(duì)小規(guī)格黑鯛的生存率影響可以忽略不計(jì)。同一種標(biāo)記方法中，體外標(biāo)記的大規(guī)格黑鯛存活率為56.67%，小規(guī)格黑鯛存活率為100.00%，二者的存活率明顯存在差異；體內(nèi)標(biāo)記的大規(guī)格黑鯛存活率為83.33%，而小規(guī)格黑鯛的存活率為100.00%，二者同樣差異明顯。所以在存活率方面，不論是體外剪鰭標(biāo)記法還是體內(nèi)PIT標(biāo)記法，小規(guī)格黑鯛明顯優(yōu)于大規(guī)格黑鯛。

3.2兩種不同標(biāo)記方法對(duì)大小兩種規(guī)格黑鯛的生長(zhǎng)影響

試驗(yàn)結(jié)果由圖2可以直觀表現(xiàn)出來，在相同的生長(zhǎng)條件下（水溫，鹽度，pH值，投餌情況），經(jīng)過25 d的投喂之后，大規(guī)格黑鯛的3個(gè)組中，體外剪鰭標(biāo)記組、體內(nèi)PIT標(biāo)記組、空白對(duì)照組生長(zhǎng)率分別為3.32%、15.82%、11.23%，體外剪鰭標(biāo)記組和體內(nèi)PIT標(biāo)記組的生長(zhǎng)率存在明顯差異，兩個(gè)試驗(yàn)組與空白對(duì)照組相比，其中體外標(biāo)記組與空白對(duì)照組的差異明顯，而體外標(biāo)記組與空白對(duì)照組的差異較?。恍∫?guī)格黑鯛組中，體外標(biāo)記組的生長(zhǎng)率為10.64%、體內(nèi)標(biāo)記組的生長(zhǎng)率為22.31%、空白對(duì)照組的生長(zhǎng)率為11.44%，可以看出體外標(biāo)記組和體內(nèi)標(biāo)記組的生長(zhǎng)率有明顯差異，兩個(gè)試驗(yàn)組與空白對(duì)照組相比，體外標(biāo)記組和空白對(duì)照組的生長(zhǎng)率沒有明顯差異，而體外標(biāo)記組和空白對(duì)照組的生長(zhǎng)率存在明顯差異。從標(biāo)記方法來看，體外剪鰭標(biāo)記的大規(guī)格黑鯛生長(zhǎng)率為3.32%，小規(guī)格黑鯛的生長(zhǎng)率10.64%，存在明顯差異，體內(nèi)PIT標(biāo)記的大規(guī)格黑鯛生長(zhǎng)率為15.82%，小規(guī)格黑鯛的生長(zhǎng)率為22.31%，可以看出二者有著明顯的差異。

總體來看，兩種不同的標(biāo)記方法對(duì)于大小兩種體質(zhì)量規(guī)格的黑鯛生長(zhǎng)存活的影響有著明顯差異，并且大小兩種體質(zhì)量規(guī)格的黑鯛對(duì)于同樣的標(biāo)記方法的適應(yīng)程度也有明顯差異，小規(guī)格體質(zhì)量的黑鯛，在體外剪鰭標(biāo)記和體內(nèi)PIT標(biāo)記兩種標(biāo)記方法標(biāo)記后生長(zhǎng)和存活的情況都要優(yōu)于同樣標(biāo)記方法的大規(guī)格體質(zhì)量的黑鯛，但是在小規(guī)格體質(zhì)量黑鯛的兩種標(biāo)記方法中，兩種方法對(duì)于小規(guī)格體質(zhì)量黑鯛的生存影響都沒有影響，而在生長(zhǎng)方面，體內(nèi)PIT標(biāo)記的小規(guī)格黑鯛明顯要比體外剪鰭標(biāo)記的小規(guī)格黑鯛的生長(zhǎng)狀況好。

該試驗(yàn)結(jié)果表明，體內(nèi)PIT標(biāo)記法對(duì)黑鯛生長(zhǎng)存活的影響遠(yuǎn)小于體外剪鰭標(biāo)記法對(duì)黑鯛生長(zhǎng)存活的影響；在選用的標(biāo)記黑鯛體質(zhì)量方面，小規(guī)格體質(zhì)量（40.00 g）的黑鯛對(duì)于標(biāo)記方法的適應(yīng)性要強(qiáng)于大規(guī)格體質(zhì)量（70.00 g）黑鯛。該試驗(yàn)為今后的黑鯛標(biāo)記放流以及黑鯛增殖放流試驗(yàn)提供了清晰的數(shù)據(jù)支持，在標(biāo)記放流中，應(yīng)選用小規(guī)格體質(zhì)量的黑鯛來進(jìn)行試驗(yàn)，標(biāo)記方法應(yīng)采用體內(nèi)標(biāo)記的方法來降低標(biāo)記對(duì)標(biāo)志魚生長(zhǎng)及存活的影響。