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        HPLC法檢測(cè)海水魚中組胺含量

        2020-07-09 18:55:48孫晶
        食品安全導(dǎo)刊·下旬刊 2020年3期
        關(guān)鍵詞:海水魚組胺

        孫晶

        摘 要:為了更好地保護(hù)人們的身體健康,減輕海水魚腐爛對(duì)人體造成的影響,設(shè)置各種不同的方式來(lái)檢測(cè)海水魚中的組氨含量,在本次的實(shí)驗(yàn)中,主要是檢測(cè)海水魚中組胺的含量,采用的方式是高效液相色譜法。這種方式可以提高實(shí)驗(yàn)過程中的準(zhǔn)確性,并且進(jìn)行快速而有效的定量。

        關(guān)鍵詞:HPLC;組胺;海水魚

        生物胺是生物活性物質(zhì)中含氮的低分子有機(jī)化合物的總稱,生物胺一般包括脂肪類、芳香類和雜環(huán)類3大類,組胺是其中的一種雜環(huán)類生物胺,存在在各種動(dòng)物和植物當(dāng)中。海水魚體內(nèi)含有一定的游離組氨酸,如果海水魚新鮮,就不會(huì)受細(xì)菌污染,但是,當(dāng)海水魚腐爛變質(zhì)時(shí),會(huì)受到大量微生物感染,這時(shí)在一定條件下就會(huì)產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng),分解組氨酸形成組胺。

        組胺在正常情況下是無(wú)色無(wú)味的,人的肉眼是無(wú)法分辨出組胺的。組胺是一種不發(fā)揮的有機(jī)胺,如果人體食入了不新鮮腐爛變質(zhì)的海水魚,就會(huì)出現(xiàn)相對(duì)應(yīng)的中毒癥狀,并且會(huì)引起一系列的慢性病變,從而影響人的各大神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)以及心血管系統(tǒng),嚴(yán)重的還會(huì)導(dǎo)致水腫、皮膚發(fā)紅、頭暈頭痛等各種中毒癥狀,甚至?xí)霈F(xiàn)呼吸困難、發(fā)熱、死亡,對(duì)于人體健康有非常大的影響。由于海水魚是人們?nèi)粘I町?dāng)中經(jīng)常使用的食物,經(jīng)常被人們搬上餐桌,所以重視海水魚中組胺含量的檢測(cè),對(duì)于人們的身體健康具有非常重要的意義[1]。

        1 海水魚中組胺的檢測(cè)方式

        組胺的檢測(cè)方式主要有分光光度法、高效液相色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法和電化學(xué)生物傳感器等方式。簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),分光光度法是利用提取液進(jìn)行提取,通過顯色劑作用顯色,并與標(biāo)準(zhǔn)系列溶液進(jìn)行比較定量,從而進(jìn)行組胺的檢測(cè)。這種處理方式比較節(jié)約時(shí)間,但是重現(xiàn)性較差,線性關(guān)系也不夠穩(wěn)定。薄層色譜法檢測(cè)組胺的原理是利用吸附劑吸附能力的不同,從而達(dá)到將每一種不同的成分分離的效果,但是這種方式在高溫下容易發(fā)生各種物質(zhì)變化,整體的實(shí)驗(yàn)結(jié)果并不準(zhǔn)確。若采用氣相色譜法來(lái)進(jìn)行檢驗(yàn),在檢測(cè)過程當(dāng)中容易出現(xiàn)峰拖尾的現(xiàn)象,整體的靈敏度較低。如果采用電化學(xué)生物傳感器的方式進(jìn)行分析,速度比較快,靈敏度高,但是生物固定化膜不夠穩(wěn)定。采用高效液相色譜法來(lái)進(jìn)行分析的話,分析速度更快,重現(xiàn)性比較高,靈敏度和柱效都比較好,擁有定量分析準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn),比較適合日常的海水魚組胺檢測(cè)[2]。

        2 海水魚組胺檢測(cè)過程

        2.1 材料與方式

        主要樣品為市面上售賣的海水魚,所需要的儀器包括液相色譜儀、色譜柱、離心器、渦旋振蕩器與電子天平。主要所使用的試劑包括三氯乙酸、氯化鈉、正已烷、鹽酸丙酮、氯化鈉、乙醚、甲醛、碳酸氫鈉溶液以及氫氧化鈉溶液等。

        2.2 實(shí)驗(yàn)過程

        在實(shí)驗(yàn)過程中,需要配置衍生劑溶液。想要制作衍生劑溶液,首先需要稱取一定量的丹磺酰氯,加入丙酮,配制成相應(yīng)濃度的衍生液。隨后配置流動(dòng)相,接著配制內(nèi)標(biāo)液,在上述過程完成之后,再配制標(biāo)準(zhǔn)溶液。標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制方法如下,將相應(yīng)的組氨溶解在一定量的鹽酸溶液當(dāng)中,然后轉(zhuǎn)至容量瓶定容至相應(yīng)刻度,配制成相應(yīng)濃度的儲(chǔ)存溶液,精密吸取儲(chǔ)存液并進(jìn)行稀釋,在臨用前配置。

        在溶液配制結(jié)束之后,需要依次進(jìn)行組胺標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制、精密度實(shí)驗(yàn)分析、重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)分析與加標(biāo)回收率測(cè)定。具體的實(shí)驗(yàn)過程如下:首先在規(guī)定的色譜條件下,將組胺標(biāo)準(zhǔn)溶液依次進(jìn)樣,并將組胺標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸收峰面積作為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度作為橫坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,按照上述步驟依次測(cè)定不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,并記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在實(shí)驗(yàn)過程當(dāng)中,為了提高檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,可以取同一批次6份供試樣,經(jīng)樣品處理后,進(jìn)行重復(fù)性考察,記錄結(jié)果,分析重復(fù)性,計(jì)算相對(duì)偏差,從而確保檢測(cè)的重復(fù)性。在重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)結(jié)束之后,需要取不同的樣品加入已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液當(dāng)中,進(jìn)行回收率考察。確保回收率在固定范圍之內(nèi),保障實(shí)驗(yàn)方準(zhǔn)確性[3]。

        3 結(jié)論

        本次實(shí)驗(yàn)當(dāng)中采用了HPLC來(lái)檢測(cè)海水魚中的組胺含量,具體的操作步驟包括試劑調(diào)配、組氨標(biāo)準(zhǔn)曲線制作、精密度實(shí)驗(yàn)、重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)與回收率測(cè)定。在本次實(shí)驗(yàn)過程當(dāng)中,采用丹磺酰氯制作延伸劑。通過最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析,可以明確這種方式在一定的線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,實(shí)驗(yàn)的精準(zhǔn)性和重復(fù)性都有較高保障,回收率在合理范圍內(nèi),方法整體來(lái)說(shuō)操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確度高、回收率較高,適用于一般情況下的海水魚組胺檢測(cè)。

        4 結(jié)語(yǔ)

        現(xiàn)在越來(lái)越多的人們的生活品質(zhì)得到了提高,餐桌上的海鮮也越來(lái)越多。海水魚作為現(xiàn)階段餐桌上使用較為廣泛的海鮮之一,應(yīng)確保其沒有腐爛變質(zhì),保證海水魚當(dāng)中的組氨含量在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi),減輕由于食用海水魚導(dǎo)致的各種中毒癥狀及慢性病變,確保人們的生活健康,提高人們的生活質(zhì)量。

        參考文獻(xiàn)

        [1]梁立廣,李綺敏,雷艷.HPLC法檢測(cè)海水魚中組胺的含量[J].食品安全導(dǎo)刊,2019(3):179-181.

        [2]譚彥君,彭接文,陳子慧,等.魚類罐頭相關(guān)食品標(biāo)準(zhǔn)法規(guī)中組胺指標(biāo)探討[J].中國(guó)食品衛(wèi)生雜志,2019,31(4):389-393.

        [3]張金彪.常見野雜魚中的生物胺分析及其對(duì)中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)存活、生長(zhǎng)和體內(nèi)累積的影響[D].上海海洋大學(xué),2012.

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